王 雨 武 建 楊慧鵬 何永剛 張益民

（1.南京農(nóng)業(yè)大學生命科學學院，江蘇 南京 210095；2.南京農(nóng)業(yè)大學食品科技學院，江蘇 南京 210095）

構樹是一種適應性極強的落葉喬木，在我國大部分地區(qū)均有種植。構樹葉中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、無機氮浸出物、鈣、磷以及多種微量元素，是極具開發(fā)價值的非常規(guī)飼料資源[1]。但是，構樹葉粗纖維含量高，蛋白質(zhì)結構復雜，單胃動物難以消化，并且高比例飼喂未發(fā)酵構樹葉時，會導致一定的肝腎損傷和體重增加減緩[2]。經(jīng)研究，發(fā)酵之后的構樹葉能夠降低毒性，并改善其營養(yǎng)結構[3]。光葉楮是近幾年從日本引進的構樹新品種，具有生長快，產(chǎn)量高，經(jīng)濟效益好的特點[4]，且與野生構樹相比，光葉楮葉營養(yǎng)成分豐富全面，粗蛋白、粗纖維、鈣、磷等含量高[5]。目前，關于發(fā)酵構樹葉飼喂對小白鼠性器官、肝功能影響上的性別差異，以及光葉楮構樹葉飼喂小白鼠的毒性試驗均未見報道。本試驗將研究不同比例的發(fā)酵構樹葉引起小白鼠的性別差異，以及光葉楮構樹葉飼喂對小白鼠產(chǎn)生的毒性影響，為構樹葉飼料的實際應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

由南京市江寧區(qū)青龍山動物繁殖場代購自南通大學實驗動物中心的清潔級小白鼠72只,體重約16～18 g，雌雄各半，隨機分為6組，每組12只。

1.2 試驗飼料

試驗材料構樹葉：10月份摘采自江蘇省連云港市贛榆縣的構樹枝干的樹葉；發(fā)酵構樹葉：上述構樹葉參照張益民[3]的方法進行發(fā)酵處理；光葉楮樹葉：相同時間采自上述地點的日本光葉楮品種構樹的樹葉。以上構樹葉經(jīng)南京農(nóng)業(yè)大學動物科技學院粉碎處理，再由南京青龍山動物繁殖場加入試驗設計的基礎日糧比例配入后，混勻、加工成條狀。

1.3 試驗方法

在小白鼠基礎日糧的基礎上，按照試驗設計水平，將構樹葉配入各組中。即光葉楮組飼喂10%光葉楮未發(fā)酵構樹葉+90%基礎日糧；野生組飼喂10%野生未發(fā)酵構樹葉+90%基礎日糧；發(fā)酵A組10%發(fā)酵構樹葉+90%基礎日糧；發(fā)酵B組20%發(fā)酵構樹葉+80%基礎日糧；發(fā)酵C組30%發(fā)酵構樹葉+70%基礎日糧；對照組飼喂100%基礎日糧。

各組小白鼠按照試驗設計飼養(yǎng)49 d，自由采食，自由飲水。試驗期間觀察小白鼠的精神狀況。每天稱量每組小白鼠消耗的飼料重量。每周稱量每只小白鼠的體重。試驗結束后，稱量體重，對所有小白鼠進行斷頸采血，進行血液指標的分析；同時解剖所有雄性小白鼠，獲取睪丸，測量每個睪丸直徑以及每組睪丸的重量。

料肉比計算公式：料肉比=消耗飼料總量（kg）/增重總量（kg）

以上試驗數(shù)據(jù)用SPSS軟件統(tǒng)計分析，采用LSD法進行方差分析比較。

2 結果與分析

2.1 健康狀況

試驗期間所有小白鼠均活動正常，生長狀況良好，無一死亡。

2.2 料肉比(見表1)

表1 小鼠各組料肉比

由表1可知，前3周內(nèi)，雌性小白鼠料肉比均明顯高于雄性小白鼠，可見雄性小白鼠對飼料的利用率更高。前2周內(nèi)雌、雄鼠光葉楮組料肉比低于野生品種，而高于對照組。發(fā)酵構樹葉組料肉比大部分大于對照組，且料肉比隨著發(fā)酵構樹葉含量增加而呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢，可見發(fā)酵構樹葉濃度較高時對飼料利用率有不利影響。

2.3 體重（見表2、表3）

表2 雌性小鼠體重（g）

表3 雄性小鼠體重(g)

由表2可看出，經(jīng)過一段適應期后，雌性小白鼠在較低濃度（10%）的構樹葉（包括光葉楮樹葉、野生構樹葉以及發(fā)酵構樹葉）配比下，第三周起與對照組體重無顯著性差異；發(fā)酵B組與發(fā)酵C組小白鼠體重在試驗期內(nèi)則一直明顯低于對照組，具顯著性差異。由表3可看出，對于雄性小白鼠，從第三周起，光葉楮組、野生構樹葉組以及高濃度(30%)發(fā)酵構樹葉組在試驗期內(nèi)，體重均顯著低于對照組，可見未發(fā)酵構樹葉與高濃度發(fā)酵構樹葉飼喂對雄性小白鼠的生長影響較明顯。未發(fā)酵構樹葉飼喂對雄性小白鼠的生長的影響比對雌性更大。

圖1 雌性小白鼠生長曲線

圖2 雄性小白鼠生長曲線

由圖1和圖2可看出，相同飼料喂養(yǎng)下的雄性小白鼠的平均體重和生長速率均高于雌性小白鼠。雌雄小白鼠在第一周生長都最為迅速，之后速率都開始下降。雌性小白鼠第三周后的體重增長開始趨于平緩；雄性小白鼠在第四周后體重增長開始趨于平緩。

2.4 雄性小白鼠睪丸（見表4）

由表4可以看出，適量比例的發(fā)酵構樹葉（20%）可以促進睪丸增大；光葉楮組和發(fā)酵C組睪丸重量明顯低于對照組?？梢姽馊~楮構樹葉及高濃度（30%）發(fā)酵構樹葉飼喂對雄性小白鼠睪丸發(fā)育具有明顯抑制。

2.5 血清生化指標（見表5、表6）

表4 雄性小鼠睪丸

表5 雌性小鼠肝功能變化

表6 雄性小鼠肝功能變化

由表5和表6可知，雌雄小白鼠血液中的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶和天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量均與對照組無顯著性差異。可見在30%及以下的構樹葉配比飼料對小白鼠的肝功能無顯著影響。

3 討論

3.1 料肉比

料肉比指飼養(yǎng)的畜禽增重10 kg所消耗的飼料量，是評價飼料報酬的一個重要指標。后期小鼠生長進入平穩(wěn)期，體重增長不明顯，且小鼠為嚙齒動物，除正常食用外也會撕咬飼料，造成飼料消耗值的稱量上存在一定誤差，因此只取前3周的料肉比進行分析。本試驗中，發(fā)酵構樹葉組料肉比大部分大于對照組，且料肉比隨著發(fā)酵構樹葉含量增加而呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢，其可能原因是動物不能有效吸收構樹葉中的營養(yǎng)成分，飼料中構樹葉添加的比例越大，影響越大；雌性小白鼠的料肉比均明顯高于雄性小白鼠，可見雄性小白鼠對飼料利用率更大。日本光葉楮品種料肉比普遍低于野生構樹品種及對照組，可能是因為光葉楮構樹葉營養(yǎng)結構更加合理，更利于動物吸收利用。

3.2 體重

隨著構樹葉添加水平的增加，小白鼠的體重增長在下降。雌性小白鼠在10%的構樹葉配比下，經(jīng)前三周適應期后與對照組的體重無顯著差異；而雄性小鼠除低濃度發(fā)酵構樹葉組外，其他組差異顯著。未發(fā)酵構樹葉飼喂對雄性小白鼠的生長影響更大。相同飼料喂養(yǎng)下的小白鼠在平均體重及體重增長速率方面雄性均高于雌性，且雄性小白鼠體重增長周期更長：前5周內(nèi)一直以較快速率增長，第5周之后較緩慢增長；而雌性小白鼠第3周后的生長速率即開始變緩。日本光葉楮品種在小白鼠體重方面未見明顯優(yōu)勢。

3.3 雄性小白鼠睪丸

結果顯示，適當比例的發(fā)酵構樹葉（20%）可以促進睪丸增大。雄性小白鼠光葉楮組睪丸重量明顯低于對照組，由此可見光葉楮品種構樹葉對雄性小白鼠的性激素分泌可能有顯著影響。同時，發(fā)酵C組睪丸重量也明顯小于對照組，可見30%構樹葉配比對雄性小白鼠性激素分泌也可能有顯著影響。

3.4 血清生化指標

丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶與天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶是臨床上檢測肝功能的重要指標。當肝臟受到損傷時，血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶與天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶的含量均會升高。本試驗中所有組的小白鼠此兩項指標均無顯著增高?？梢?0%及以下的構樹葉配比對小白鼠的肝功能沒有顯著影響。

4 結論

①日本光葉楮品種的吸收利用率更高。

②對于雌性可用10%構樹葉配比的飼料飼喂，發(fā)酵與否均可；但對于雄性，未發(fā)酵構樹葉以及高比例發(fā)酵構樹葉配比均會對體重增長產(chǎn)生影響，比例越高影響越大，低濃度發(fā)酵構樹葉影響不顯著。

③日本光葉楮品種對于小鼠體重增長并無優(yōu)勢。

④適量比例的發(fā)酵構樹葉配比（20%）可引起小鼠睪丸直徑的增大。日本光葉楮及30%發(fā)酵構樹葉飼料對雄性小白鼠睪丸發(fā)育可能具有不利影響。

⑤30%及以下的構樹葉配比飼料對動物的肝功能沒有顯著影響。

[1]李海新.發(fā)酵構樹葉對生長豬營養(yǎng)物質(zhì)消化率、肥育性能、屠宰性能及肉質(zhì)的影響[D].湛江：廣東海洋大學，2010.

[2]趙峰，劉丹，黃所含，等.構樹葉飼喂小白鼠的亞慢性毒性試驗[J].食品與飼料工業(yè)，2006(6):30-32.

[3]張益民,于漢壽,張永忠,等.構樹葉發(fā)酵飼料中營養(yǎng)成分的變化[J].飼料工業(yè),2008，29（23）：54-55.

[4]宋協(xié)峰，范學鵬，孫廣佩，等.新型“搖錢樹”——光葉楮[J].種子世界,2008(3):37.

[5]李維英，蘇印泉，玉泉幸一郎，等.光葉楮成分測定與分析[J].西北林學院學報，2007，22（3）：141-143.