劉彤鷗 王加謀

（湖北中醫(yī)藥大學臨床醫(yī)學院·430061）

化瘀固本方對CPID模型大鼠組織形態(tài)學影響的實驗研究

劉彤鷗 王加謀*

（湖北中醫(yī)藥大學臨床醫(yī)學院·430061）

目的：觀察化瘀固本方和康婦炎膠囊對CPID模型大鼠組織形態(tài)學的影響。方法：建立CPID大鼠模型，造模21天后分組給藥， 14天后肉眼觀察大鼠盆腔內生殖器官及在光鏡下左側輸卵管病理形態(tài)并評分。結論：化瘀固本方治療CPID模型大鼠的盆腔病變效果顯著。

化瘀固本方 慢性盆腔炎

慢性盆腔炎(CPID)是病原微生物侵及女性內生殖器官及其周圍結締組織發(fā)生的炎癥。其發(fā)病的機理主要是由于病原體感染盆腔組織后所引起的炎癥反應，炎癥浸潤波及盆腔器官、粘膜、結締組織，致使局部血流障礙、組織代謝與抗氧化力下降，發(fā)生粘連、水腫，瘢痕纖維化、充血。CPID的臨床癥狀表現(xiàn)為持續(xù)性下腹鈍痛或隱痛、經期延長、盆腔炎性包塊、白帶量多伴有異味、肛門和腰部墜脹、子宮活動受限，甚至出現(xiàn)“冰凍骨盆”，最終影響受孕甚至不孕。本實驗研究活血化瘀、利濕固本中藥對CPID模型大鼠組織形態(tài)學的影響，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與分組、實驗藥物

取40只成年未孕SD雌性大鼠，體重200±20g，50日齡。將大鼠隨機分為空白組、模型組、化瘀固本組、康婦炎組，每組10只?；旌暇海褐虏⌒源竽c埃希菌、金黃色葡萄球菌、B型溶血性鏈球菌以2∶1∶1混合（由湖北省中醫(yī)院細菌室提供）。

1.2 造模方法

空白組10只除外，其余3組大鼠均以10%水合氯醛，按350 mg /kg標準抽取麻醉劑，穿刺注入大鼠腹腔，麻醉成功后，下腹部備皮，活力碘消毒。取大鼠下腹部正中，恥骨聯(lián)合上做縱切口，長約2cm，逐層開腹后暴露子宮，用lml注射器針頭機械損傷子宮內膜，注入子宮腔0.lml混合菌液，并向左側輸卵管腔注入0.lml混合菌液，注畢，一號絲線分層關腹，消毒術區(qū)。分組正常清潔飼養(yǎng)。

1.3 試驗藥物

化瘀固本方由丹參、赤芍、敗醬草、王不留行、牡丹皮、川牛膝、郁金、山茱萸、菟絲子、炒黃芪、甘草組成。由湖北省中醫(yī)院藥劑室提供煎劑?？祴D炎膠囊由貴州遠程制藥有限公司出產，生產批號：國藥準字Z20025698 。

以上兩組藥物均按成人用藥量合成100ml，依據(jù)以下公式：100 ml（藥液）／60kg（人體重）＊6.7（換算系數(shù)）＊0.2kg（大鼠重）=2.2ml。

1.4 給藥方法

造模后第21天即分組灌胃給藥。空白組：正常喂養(yǎng)，予蒸餾水2ml灌胃，每日1次。模型組：正常喂養(yǎng)，予蒸餾水2ml灌胃，每日1次?；龉瘫窘M：以化瘀固本方灌胃2ml ，每日1次?？祴D炎組：康婦炎膠囊配制液灌胃2ml，每日1次。各組均灌胃共14天。

1.5 標本取材及觀察內容

灌胃14天后，將4組大鼠用10%水合氯醛麻醉猝死后，縱行切開下腹，肉眼觀察盆腔內生殖器官變化并評分，再摘取近子宮腔處左側部分輸卵管，10%甲醛溶液分組固定，石蠟包埋，在光鏡下觀察左側輸卵管病理形態(tài)學變化并評分。

2 統(tǒng)計分析

全部數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計軟件SPSS11.0建立的數(shù)據(jù)庫，計量資料比較，并采用單因素方差分析。計數(shù)資料組間比較用X2檢驗，等級資料則采用秩和檢驗，當P＜0.05時差異有統(tǒng)計學意義。

3 結果

3.1 肉眼觀察

根據(jù)盆腔的充血水腫、組織粘連、輸卵管狹窄程度自擬標準進行評分。依據(jù)肉眼下的觀察，以上每項陽性表現(xiàn)又分為輕、中、重三個級別，盆腔充血，炎性腫脹，分輕、中、重度，計1、2、3分；盆腔內有纖維組織粘連，分輕、中、重度，計1、2、3分；輸卵管狹窄、變硬、扭曲，分輕、中、重度，計1、2、3分。匯總為陽性積分，未見以上評分內容記0分。據(jù)雙盲法要求，由兩位病理醫(yī)生分別閱片計分，分值越高，提示慢性炎癥表現(xiàn)越重。

實驗結果顯示，模型組大鼠的盆腔評分與空白組比較有極顯著性差異 (P＜0.01)，化瘀固本組評分與模型組比較差異有極顯著性(p＜0.01)，與康婦炎組比較差異有顯著性(P＜0.05)，與空白組比較差異無顯著性(P＞O.05)。見表1。

表1 各組大鼠盆腔肉眼觀察結果比較

3.2 HE染色

根據(jù)輸卵管粘膜的破壞程度自擬標準進行評分，依據(jù)在光鏡下陽性表現(xiàn)，分為輕、中、重、極重四個級別，分別記為1分、2分、3分、4分。內膜中出現(xiàn)少量炎癥細胞浸潤，為輕度，計1分;內膜中出現(xiàn)大量炎癥細胞浸潤，腺上皮輕度增生、極性排列規(guī)則，為中度，計2分;間質大量炎細胞浸潤，腺上皮增生、極性紊亂，為重度，計3分；間質有大量炎細胞浸潤，見明顯結締組織增生，管腔有不同程度粘連阻塞，為極重，計4分。匯總為陽性積分，未見以上評分內容記0分。據(jù)雙盲法要求，由匯總為陽性積分。未見以上評分內容的記0分。據(jù)雙盲法要求，由兩位病理醫(yī)生分別閱片計分，分值越高提示慢性炎癥表現(xiàn)越重。

實驗結果顯示，模型組大鼠輸卵管HE染色評分與空白組比較有極顯著性差異 (P＜0.01)，化瘀固本方組的評分與模型組比較差異有極顯著性(p＜0.01)，與康婦炎組比較差異有顯著性(P＜0.05)，與空白組比較差異無顯著性(P＞O.05)。見表2。

表2 各組大鼠輸卵管HE染色結果比較

4 討論

CPID會導致盆腔環(huán)境改變，而盆腔環(huán)境的改變尤其以盆腔粘連為主要臨床特征。調查顯示有過盆腔手術史的婦女在尸檢中盆腔粘連發(fā)生率高達1/3[1]。Carta等[2]報道盆腔手術后約有60%-90%的婦女形成腹膜粘連。也有研究已經證實輸卵管粘膜的病理改變對生育結局有著重要的影響[3]。謝花香等[4]研究藥物流產后常會發(fā)生慢性輸卵管炎，并成為繼發(fā)不孕的主要原因。

手術是盆腔粘連的西醫(yī)主要治療方法。輕中度盆腔粘連手術容易分離，但也容易復發(fā)，重度盆腔粘連手術難度較大，創(chuàng)面大、分離困難、出血多、容易感染、吸收熱時間長[12]。此外，還有相關研究顯示，輸卵管粘膜層的破壞而形成的瘢痕也使手術治療后一定時間內輸卵管再次出現(xiàn)粘連，甚至加重[5]。Yaron等[6]報道,在腹腔鏡粘連松解術后,仍有96%的患者再次形成粘連。所以是否減輕了盆腔環(huán)境的破壞是評價治療CPID效果的一個重要指標。經以上實驗證明，化瘀固本組對減輕CPID大鼠盆腔炎癥表現(xiàn)優(yōu)于康婦炎組。

本方用藥丹參，《婦科明理論》有“一味丹參散，功同四物湯”之說?！侗静萁浖ⅰ吩疲骸吧炙幊嗾咝±?，俗方以止痛，乃不減當歸?！倍帪榫帯１痉綌♂u草取其涼血消癰之效，意在攻濕熱之邪，防本病的急性發(fā)作。王不留行“王不留行，性走而不守”，用此藥助活血通絡之性，又可防本病常兼有的淋證。牡丹皮其涼血散瘀消癰之功，助“熱”“瘀”消散。川牛膝走而能補，性善下行，可引諸藥作用于下焦又助活血化瘀之效。故本方以敗醬草、王不留行、牡丹皮、川牛膝共為臣藥。

郁金祛煩解郁、調整患者的情緒效果頗佳，可使患者拂郁之肝氣得舒，氣機通暢；并且有防止肝郁化火之義，有“防病于未然”之妙。山茱萸可收斂固脫，凡氣血津液脫散皆可用之。菟絲子“其味微辛，則陰中有陽，守而能走，與其他滋陰諸藥之偏于膩滯者絕異”。菟絲子與山茱萸酸甘相合，平補肝腎，不膩不燥，以除患者神疲乏力、腰骶酸痛、帶下量多等腎虛之癥。黃芪乃補氣之圣藥，蓋氣無形，血則有形，有形不能速生，必得無形之氣以生之。血藥生血其功緩，氣藥生血其功速，況氣分血分之藥，合而相同，則血得氣而速生。而炒黃芪補脾益氣而不壅滯，使用炒黃芪以增強健脾和胃功效。以上四味共為佐藥。甘草為使藥。本方諸藥合用，共奏活血化瘀、利濕固本之效，使沖任胞宮氣血通暢，腎氣充盛，癥瘕、疼痛消散。方中虛實同治，攻補兼施，以活血祛瘀為主，寒熱平調，棄苦寒溫燥之品不用，兼顧脾腎，無耗氣傷陰之弊。

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（2012-09-06 收稿）