端木和運,韋生坤

(江蘇省常州市第三人民醫(yī)院肺科,江蘇常州,213001)

結(jié)核病的免疫是 T淋巴細胞介導(dǎo)的細胞免疫,對結(jié)核病的發(fā)病和轉(zhuǎn)歸具有決定性意義。腺苷脫氨酶(ADA)是人體嘌呤核苷代謝中的重要酶,在淋巴細胞中活性最高,是前 T淋巴細胞分化為T淋巴細胞不可缺少的酶。為進一步了解外周血ADA活性與T淋巴細胞亞群的關(guān)系及其臨床意義,本院對肺結(jié)核患者,進行了外周血淋巴細胞內(nèi)ADA活性和 T淋巴細胞亞群的定量檢測,現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將本科2008年9月—2012年5月收治的145例住院肺結(jié)核患者納入檢測組,其中初治100例,復(fù)治45例,均依據(jù)臨床癥狀、影像學(xué)、痰涂片或培養(yǎng)陽性進行診斷,且經(jīng)抗結(jié)核治療后好轉(zhuǎn)。上述患者中男102例,女43例,年齡15～82歲,平均(44.5±6.4)歲。初治患者采用2HE(S)RZ/ 4HR方案,復(fù)治患者采用 2HLvERZ/HERZ/ 5HRE方案。所有患者未使用免疫調(diào)節(jié)劑,且均無心、肝、腎等重要臟器疾患,肝、腎功能檢查正常,無合并糖尿病。另選同期60例來自本院健康體檢者作為對照組,其中男36例,女24例,年齡23～76歲,平均(46.8±6.1)歲。2組患者性別、年齡等資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法

標(biāo)本采集時間為6∶00～7∶00,空腹采靜脈血2 mL于肝素抗凝管內(nèi),用流式細胞儀檢測 T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+,采靜脈血2 mL于肝素抗凝管內(nèi),由美國杜邦全自動化分析儀ADA檢測,試劑:由上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司生產(chǎn)。采用流式細胞檢測技術(shù)(FCM)檢測外周血中的 T淋巴細胞亞群,FCM為美國BD公司生產(chǎn),型號為FACS Calibur。

2 結(jié) 果

2.1 2組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果比較

檢測組患者與正常對照組ADA、T淋巴細胞亞群檢測數(shù)據(jù)比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或 P<0.01),見表1。

表1 2組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果比較(±s)

表1 2組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果比較(±s)

與對照組比較,3P<0.05,33P<0.01

組別 n ADA CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+對照組 65 8.0±5.0 70.0±6.0 40.0±4.0 31.0±5.0 1.3±0.2檢測組 145 17.0±3.033 60.0±10.03 36.0±6.03 37.0±8.03 0.9±0.33

2.2 檢測組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果與年齡的比較

肺結(jié)核ADA、T淋巴細胞亞群檢測數(shù)據(jù)與年齡比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表2。

表2 檢測組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果與年齡的比較(±s)

表2 檢測組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果與年齡的比較(±s)

指標(biāo) <30歲(n=15) 31～40歲(n=25) 41～50歲(n=45) 51～60歲(n=40) >60歲(n=20) ADA 18.0±7.0 19.0±7.0 25.0±5.0 16.0±7.0 16.0±7.0 CD3+ 60.0±10.0 58.0±10.0 58.0±10.0 59.0±10.0 60.0±10.0 CD4+ 35.0±8.0 37.0±8.0 36.0±11.0 34.0±10.0 35.0±7.0 CD8+ 37.0±6.0 37.0±8.0 37.0±7.0 38.0±7.0 38.0±8.0 CD4+/CD8+ 1.0±0.1 1.1±0.2 1.0±0.0 0.9±0.1 0.9±0.1

2.3 檢測組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果與肺結(jié)核病情比較

檢測組ADA、T淋巴細胞亞群檢測數(shù)據(jù)與病情比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表3。

表3 檢測組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果與肺結(jié)核病情比較(±s)

表3 檢測組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果與肺結(jié)核病情比較(±s)

痰菌涂片初復(fù)治指標(biāo) 涂(+)(n=70) 涂(-)(n=75)初治(n=100) 復(fù)治(n=45) ADA 18.0±6.0 17.0±4.0 17.0±5.0 18.0±6.0 CD3+ 59.0±9.0 59.0±50.0 60.0±7.0 59.0±9.0 CD4+ 35.0±6.0 36.0±5.0 37.0±5.0 35.0±7.0 CD8+ 38.0±8.0 36.0±8.0 37.0±8.0 38.0±8.0 CD4+/CD8+ 1.0±0.19 1.0±0.2 0.9±0.2 1.0±6.5

2.4 檢測組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果與治療不同時期的比較

檢測組ADA、T淋巴細胞亞群檢測數(shù)據(jù)與治療不同時期的比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),見表4。

表4 檢測組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果與治療不同時期的比較(±s)

表4 檢測組各數(shù)據(jù)檢測結(jié)果與治療不同時期的比較(±s)

與治療前比較,33P<0.01

指標(biāo) 治療前 治療后2個月 治療后6個月ADA 17.0±4.0 14.0±4.033 12.0±4.033 CD3+ 59.0±10.0 62.0±9.033 67.0±7.033 CD4+ 35.0±8.0 37.0±7.033 37.0±5.033 CD8+ 37.0±8.0 36.0±6.033 33.0±5.033 CD4+/CD8+ 0.9±0.2 1.1±0.133 1.2±0.133

3 討 論

ADA是嘌呤核苷酸代謝過程中起重要作用的酶,廣泛分布于 T淋巴細胞內(nèi),是前 T淋巴細胞分化為T淋巴細胞不可缺少的酶,與T細胞的分化與增殖密切相關(guān),尤其與T淋巴細胞的激活有關(guān)。鄢仁晴等[1]認為持續(xù)高活性的ADA即可使T化成熟不可缺少的成分,持續(xù)高活性的ADA即可使 T淋巴細胞不斷處于旺盛的增殖狀態(tài); ADA活性亦是反映細胞免疫功能的一個重要指標(biāo),是活動性肺結(jié)核輔助性 T淋巴細胞(CD4+)的一種標(biāo)志物。結(jié)核是 T淋巴細胞介導(dǎo)為主的多種細胞因子參與的綜合病理反應(yīng)有關(guān)[2-3],可激發(fā)前淋巴細胞分化為T淋巴細胞增加,促使淋巴細胞內(nèi)小分子ADA進入血液中,導(dǎo)致肺結(jié)核患者血清中ADA明顯升高。T淋巴細胞不僅是細胞免疫的主要細胞,而且是更重要的免疫調(diào)節(jié)細胞,其免疫調(diào)節(jié)作用是通過亞群細胞實現(xiàn)的。由于ADA活性是反映細胞免疫功能的一個重要指標(biāo),肺結(jié)核患者T淋巴細胞亞群比例失調(diào)與淋巴細胞內(nèi)ADA活性升高有密切的關(guān)系[4]。Kar2 taloglu等[5]報道肺結(jié)核患者血清ADA水平明顯高于健康人,在肺結(jié)核不同時期,血清ADA水平亦有變化,隨著治療病情好轉(zhuǎn),血清ADA逐漸下降。血清ADA分為ADA1與ADA2兩種,Ishii等[6]通過測定肺結(jié)核患者治療前后3個月血清ADA,ADA1、ADA2及T淋巴細胞亞群,發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核患者ADA水平與T淋巴細胞亞群有關(guān),血清ADA2的活性與CD3+淋巴細胞及CD4+淋巴細胞數(shù)量有關(guān),血清ADA1的活性與淋巴細胞的數(shù)量無關(guān),而血清ADA1的活性與肺結(jié)核病程有一定的關(guān)系。Reiley等[7]認為CD4+T細胞在肺結(jié)核免疫防御機制中占有重要地位,CD4+T細胞表達降低可能是肺結(jié)核惡化有原因之一?？菇Y(jié)核治療后病情好轉(zhuǎn)后CD4+水平升高。外周血T淋巴細胞用其亞群分析是公認的反映機體細胞免疫狀態(tài)的較好指標(biāo)[8]。其中CD3+代表 T淋巴細胞總數(shù),CD4+為輔助性 T淋巴細胞、CD8+為抑制性T淋巴細胞,T細胞亞群間相互協(xié)作和制約,能產(chǎn)生適度的免疫應(yīng)答,既能清除病原體,以能避免過強的免疫反應(yīng)損傷自身組織,是機體正常自穩(wěn)的功能。T細胞在肺結(jié)核免疫防御機制中占有重要地位,CD4+T細胞的表達降低,可能是肺結(jié)核惡化的原因之一。有效的抗結(jié)核治療有助于CD4+水平升高。本文研究發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核患者與正常對照組ADA、T淋巴細胞亞群檢測數(shù)據(jù)對比分析,肺結(jié)核患者血清ADA水平明顯高于健康人群,CD3+、CD4+明顯低于健康人群:CD8+升高, CD4+/CD8+降低,2者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義?？菇Y(jié)核治療2、6個月后,血清ADA水平明顯下降,CD3+、CD4+。顯著升高,CD8+細胞顯著降低,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。可見ADA與T淋巴細胞亞群CD4+/CD8+2者之間有著明顯的相關(guān)性。本研究結(jié)果顯示,患者的年齡及病情影響ADA,T淋巴細胞亞群在外周血中的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義。T淋巴細胞亞群表達功能異常是結(jié)核病灶存在和發(fā)展的基礎(chǔ),如果CD3+、CD4+/ CD8+比值繼續(xù)下降并伴CD8+升高,提示病情加重、病灶擴散,預(yù)后較差。及時治療、糾正和提高機體細胞免疫功能有利于結(jié)核菌的清除、病情的緩解,適時檢測患者外周血ADA、T淋巴細胞亞群的變化對病情監(jiān)控、療效判定和預(yù)后判斷具有臨床意義。

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