張 迅 ，何清湖，梁 兵 ，梁季鴻 ，鄺曉聰 ，蒙志斌 ，梁世坤 ，韋國強 ，朱春暉 ，宋衛(wèi)儒 ，李廣裕

（1.廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院男性學科，廣西 南寧 530021；2.湖南中醫(yī)藥大學，湖南 長沙 410208）

加減知柏地黃湯對合并不育癥的Ⅳ型前列腺炎細胞因子影響的臨床研究

張 迅1，何清湖2*，梁 兵1，梁季鴻1，鄺曉聰1，蒙志斌1，梁世坤1，韋國強1，朱春暉1，宋衛(wèi)儒1，李廣裕1

（1.廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院男性學科，廣西 南寧 530021；2.湖南中醫(yī)藥大學，湖南 長沙 410208）

目的 觀察加減知柏地黃湯對合并不育癥的Ⅳ型前列腺炎細胞因子的影響。方法 將200例合并不育癥的Ⅳ型前列腺炎患者隨機分為治療組（加減知柏地黃湯組）及對照組（前列康片組）各100例，另選30例正常健康男性作為細胞因子基礎(chǔ)參考值。兩組均治療3個月，觀察治療后前列腺液（EPS）中白細胞(WBC)計數(shù)及白介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-8（IL-8）、白介素-10（IL-10）水平的變化。結(jié)果 治療前兩組 EPS-WBC 計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平均偏離正常（P＜0.05），治療后兩組均能降低 EPS-WBC 計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8 水平（P＜0.05），提高IL-10水平（P＜0.05），且治療組能恢復IL-1β、TNF-α至正常水平，而對照組不能恢復至正常水平。結(jié)論 Ⅳ型前列腺炎發(fā)病與細胞因子失調(diào)有關(guān)，加減知柏地黃湯能有效降低EPS-WBC計數(shù)及調(diào)整細胞因子水平。

Ⅳ型前列腺炎；細胞因子；加減知柏地黃湯；不育癥；臨床觀察

與美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）其他類型前列腺炎相比，Ⅳ型前列腺炎無臨床癥狀，常因不育而就診時被發(fā)現(xiàn)[1]，常規(guī)細菌培養(yǎng)陰性，發(fā)病機制及臨床治療令人困惑。有證據(jù)顯示免疫系統(tǒng)在其發(fā)生發(fā)展中起重要作用[2]，這為認識與治療Ⅳ型前列腺炎提供了新的視角。2007年11月至2010年11月，我們應(yīng)用加減知柏地黃湯治療伴有不育癥的Ⅳ型前列腺炎時發(fā)現(xiàn)其能提高精液質(zhì)量、降低前列腺液（EPS）白細胞（WBC）計數(shù)，為了進一步揭示其治療機制以及Ⅳ型前列腺炎發(fā)病機制，我們從細胞因子水平進行了臨床研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2007年11月至2010年11月在廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院男性科門診因不育癥診斷為Ⅳ型前列腺炎的患者200例，采取隨機數(shù)字表法，將病例分為治療組、對照組，各100例。并隨機選取30例年齡 20～50（29.32±8.55）歲正常健康男性作為Ⅳ型前列腺炎細胞因子基礎(chǔ)參考值。治療組年齡21～49（30.27±8.59）歲，自然不育時間 12～60（19.25±18.00）月；對照組年齡 19～48（30.30±9.73）歲，自然不育時間 13～55（21.17±16.95）月。兩組年齡、自然不育時間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 診斷標準

1.2.1 男性不育癥診斷標準 參照《男科學》[3]相關(guān)標準，即夫妻同居未避孕1年以上，性生活正常，排除女方原因，配偶未懷孕及生育者。

1.2.2 Ⅳ型前列腺炎診斷標準 參照1995年美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）制定Ⅳ型前列腺炎診斷標準[1]，即無癥狀的前列腺炎，無主觀癥狀，前列腺活檢、精液、前列腺按摩液或按摩后尿液（VB3）有超過正常水平的白細胞。

1.3 納入標準

符合Ⅳ型前列腺炎及男性不育癥診斷標準，按NIH慢性前列腺炎癥狀評分標準(Chronic prostatitis symptom index，CPSI)評分＜8 分， EPS-WBC 計數(shù)≥10個/高倍視野。治療前停用一切對本研究有影響的藥物7 d以上。

1.4 排除標準

合并有尿道炎、膀胱炎、泌尿系統(tǒng)結(jié)石、附睪炎、睪丸炎、精囊炎、精索靜脈曲張者；合并有前列腺增生或前列腺癌者；合并心腦血管、肝、腎及造血系統(tǒng)等嚴重疾病者；合并有風濕、類風濕或其他結(jié)締組織疾病者；睪丸前性、睪丸性及其他睪丸后性因素所致男性不育者；其他類型前列腺炎者；前列腺液難以取出或EPS-WBC計數(shù)正常的Ⅳ型前列腺炎者（EPS白細胞計數(shù)正常，若按摩后VB3或精液中白細胞5個/高倍視野，也可診斷為Ⅳ型前列腺炎）；有明顯神經(jīng)官能癥或?qū)z查、治療不合作者。

1.5 治療方法

治療組以加減知柏地黃湯治療。加減知柏地黃湯基本方藥組成：山茱萸6 g，淮山藥10 g，澤瀉10 g，茯苓 10 g，虎杖 10 g，黃柏 6 g，蒲公英 15 g，野菊花15 g，金銀花15 g，連翹15 g，紫花地丁10 g，紫背天葵 10 g，菟絲子 10 g，補骨脂 10 g，桃仁 6 g，赤芍 10 g，當歸 10 g，牡丹皮 6 g，桂枝 6 g。脈虛大者加灸黃芪20 g，黨參10 g。每日1劑，分2次服。對照組予以口服前列康片（浙江康恩貝集團制藥有限公司，批號 090242， 0.57 g/片），4 片/次，3次/d。兩組療程均為3個月。服藥期間禁用其他治療前列腺炎的藥物，禁酒、久坐及辛辣食物。

1.6 觀察指標及方法

檢查前禁欲2～3 d，由專人進行前列腺按摩術(shù)，取EPS 1.0 mL，部分用于EPS常規(guī)檢查，其余-20℃保存待測細胞因子。放射免疫法測定前列腺液中 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10（試劑盒購自北京解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所），檢測方法嚴格按照試劑盒說明進行。

1.7 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后EPS-WBC計數(shù)、EPS中IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10水平變化及與正常組比較

與正常組比，治療前兩組細胞因子水平均有差異（P<0.05），表現(xiàn)為 IL-1β、TNF-α、IL-8 水平升高，IL-10水平降低；治療后兩組IL-8、IL-10水平均未恢復至正常水平（P<0.05），但治療組 IL-1β、TNF-α水平與正常組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。治療前兩組EPS-WBC計數(shù)及EPS中IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），治療后差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與本組治療前比， 治療后兩組 IL-1β、TNF-α、IL-8 、IL-10 含量及EPS-WBC計數(shù)差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表 1 治療前后 EPS-WBC 計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平比較 （，ng/mL）

表 1 治療前后 EPS-WBC 計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平比較 （，ng/mL）

注：與本組治療前比較*P<0.05；與對照組比較▲P<0.05；與正常組比較#P<0.05。

組 別 n IL-1β TNF-α IL-8 IL-10 EPS-WBC（個/HP）治療組 100 治療前 1.06±0.34# 4.31±1.32# 11.73±8.64# 189.92±56.32# 26.92±6.52治療后 0.73±0.24*▲ 2.88±0.96*▲ 6.71±4.13*▲# 231.84±68.74*▲# 11.99±4.85*▲對照組 100 治療前 1.32±0.39# 4.76±1.25# 10.98±8.76# 186.79±50.08# 27.33±5.06治療后 0.88±0.30*# 3.44±1.04*# 8.42±6.15*# 204.45±69.46*# 16.12±4.36*正常組 30 0.70±0.33 2.58±1.36 4.47±5.59 259.74±61.65

2.2 不良反應(yīng)

治療期間，治療組中有8例胃腸道不適，其不良反應(yīng)發(fā)生率為8.0%。對照組無明顯不良反應(yīng)。治療組胃腸道不良反應(yīng)均輕微，一般能耐受，3 d后不良反應(yīng)消失，未影響治療，且均完成全部療程。

3 討論

慢性前列腺炎的病因及病理機制至今尚不明確。近年來的研究表明，自身免疫反應(yīng)和細胞因子在其發(fā)病中起著重要的作用。細胞因子可以被分為兩大類：促炎癥細胞因子如IL-1β、TNF-α、IL-8等和抗炎癥細胞因子如IL-10等。促炎癥細胞因子在組織的炎癥反應(yīng)過程中起促進作用，而抗炎癥細胞因子可抑制炎癥反應(yīng)及促進組織的修復和再生。兩者的平衡將影響組織創(chuàng)傷和炎癥的結(jié)局[4-5]。促炎性細胞因子IL-1β、TNF-α主要由單核-吞噬細胞產(chǎn)生，主要作用于內(nèi)皮細胞，增加某些黏附分子的表達，促進炎癥細胞黏附、游走、浸潤及中性粒細胞脫顆粒，參與和促進炎癥反應(yīng)[6]。IL-8也是一種促炎癥細胞因子，在炎癥刺激后由單核細胞、巨噬細胞、纖維母細胞、內(nèi)皮細胞和多種上皮細胞產(chǎn)生，主要的特點是幫助募集中性粒細胞和單核細胞進入炎癥部位和調(diào)節(jié)白細胞黏附分子的表達，對于上述細胞離開血液循環(huán)并滲透入組織是必需的[7]。IL-10是人類免疫應(yīng)答中已發(fā)現(xiàn)的最重要的抗炎癥因子，主要由單核巨噬細胞、T和B淋巴細胞產(chǎn)生，在炎癥過程中，IL-10被認為是單核吞噬細胞功能的強抑制劑，它抑制單核吞噬細胞、多形核白細胞和嗜酸性粒細胞產(chǎn)生前炎癥因子，如TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8，以及下調(diào)巨噬細胞產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)一氧化氮[8]。因而，IL-10被認為是一種強有力的抗炎癥因子，它下調(diào)T1淋巴細胞產(chǎn)生的IFN2γ、IL-2和TNF-α[8]。

本研究中，正常人 EPS 中 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10均能被檢出，但與Ⅳ型前列腺炎相比含量有顯著性差異。說明細胞因子水平的改變存在于Ⅳ型前列腺炎EPS中，并且與其發(fā)病相關(guān)。治療后，加減知柏地黃湯與前列康片均能降低Ⅳ型前列腺炎EPS-WBC計數(shù)及促炎癥細胞因子IL-1β、TNF-α、IL-8含量，提高抗炎癥細胞因子IL-10含量，但加減知柏地黃湯更有效，并且雖然兩組均不能恢復IL-8、IL-10至正常水平，但加減知柏地黃湯能而前列康片不能恢復IL-1β、TNF-α至正常水平。這為加減知柏地黃湯臨床療效優(yōu)于前列康片從細胞因子水平提供了理論基礎(chǔ)。

本研究中可以得出Ⅳ型前列腺炎發(fā)病的假設(shè)模型：在特定的條件下，抗原性物質(zhì)激活自身免疫系統(tǒng)，組織局部上皮細胞以及單核-巨噬細胞激活釋放出細胞因子IL-1β、TNF-α等，增加血管內(nèi)皮細胞黏附分子的表達以及中性粒細胞游走、浸潤，緊接著局部多種細胞激活釋放細胞因子IL-8，募集大量的中性粒細胞向炎癥部位集中，同時抗炎癥細胞因子IL-10分泌相對不足，無法對抗促炎癥細胞因子如IL-1β、TNF-α、IL-8等的效應(yīng)，這樣Ⅳ型前列腺炎得以發(fā)生發(fā)展。同時，由于種種不明原因，環(huán)氧化酶(Cox2)/前列腺素E2(PGE2)系統(tǒng)沒有被激活，因而患者無臨床癥狀。這說明了細胞因子譜系在不同類型前列腺炎中扮演角色不同，因而治療方法也不一樣。由于臨床試驗條件的限制，本研究并沒有進一步指出更起決定性作用的細胞因子及干預細胞因子何環(huán)節(jié)能取得更有效的臨床治療效果。

慢性前列腺炎（包括Ⅳ型前列腺炎）屬于中醫(yī)學“精濁”的范疇，其病因病機以“腎虛”為本，“血瘀”、“濕熱”、“毒”為標。目前，中醫(yī)藥治療前列腺炎取得比較滿意療效，研究重點也逐漸從臨床水平向細胞因子水平進展[9]。本研究中，與前列康片單味成分油菜花花粉相比，加減知柏地黃湯組方以補腎為主，兼以活血、利濕解毒，更符合中醫(yī)前列腺炎病因病機。方以山茱萸、淮山藥、補骨脂、菟絲子補腎，為君藥；以金銀花、蒲公英、紫花地丁、紫背天葵、連翹清熱解毒，以桃仁、丹皮、赤芍、當歸活血化瘀，虎杖、茯苓、澤瀉清熱利濕，以上均為臣藥；桂枝溫經(jīng)通脈，既能有助于活血化瘀，又能防止諸藥寒涼冰伏濕熱之毒，為佐藥；黃柏既能清利下焦?jié)駸幔稚谱呦陆?，引諸藥下歸前列腺，為佐使藥。綜觀全方，以知柏地黃湯、五味消毒飲、桂枝茯苓丸（桂枝、茯苓、桃仁、丹皮、芍藥）加減化裁，緊扣慢性前列腺炎的病因病機，不良反應(yīng)少，因而能有效改善前列腺液EPS-WBC計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平。

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（本文編輯 馬 薇）

Clinical study on effects of Modified Zhibo Dihuang decoction on cytokines in patients with NIH-IV prostatitis accompanying with infertility

ZHANG Xun1， HE Qing-hu2*,LIANG Bing1， LIANG Ji-hong1， KUANG Xiao-cong1，MENG Zhi-bin1， LIANG Shi-kun1， WEI Guo-qiang1， ZHU Chun-hui1， SONG Wei-ru1，LI Guang-yu1
(1.Department of Andrology,First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University，Nanning,Guangxi 530021，China;2.College of Integrative Medicine,TCM University of Hunan,Changsha,Hunan,410208 China)

Objective To evaluate effects of Modified Zhibo Dihuang decoction on cytokines in prostatic fluid in patients with NIH-IV prostatitis accompanying with infertility.Methods 200 patients with NIH-IV prostatitis accompanying with infertility were randomly divided into 2 groups,100 patients in treatment group were treated with Modified Zhibo Dihuang decoction and 100 in control group with Qianliekang tablets;and other 30 healthy men were tested for cytokine reference values.The count of EPS-WBC and the levels of IL-1β,TNF-α,IL-8 and IL-10 in 2 groups were examined before and after 3 months treatment.Results The count of EPS-WBC and the levels of IL-1β,TNF-α,IL-8 and IL-10 in 2 groups were deviated from the normal before therapy.After 3 months treatment,in both groups the counts of EPS-WBC and the levels of IL-1β,TNF-α and IL-8 were decreased effectively and the level of IL-10 was increased effectively.The levels of IL-1β and TNF-α in treatment group returned to the normal but those data of the control group could not.Conclusion NIH-IV prostatitis is correlated to Cytokines dysfunction in prostatic fluid.Modified Zhibo Dihuang decoction can effectively decrease the count of EPSWBC and adjust the levels of cytokines in prostatic fluid.

NIH-IV prostatitis;cytokines;Modified Zhibo Dihuang decoction;Infertility;Clinical observation

R697.33

B

10.3969/j.issn.1674－070X.2012.05.014.056.04

2011－12－13

廣西教育廳課題資助項目（200710LX064）。

張 迅（1978-），男，湖南攸縣人，主治醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合男科研究。

* 何清湖，男，博士研究生導師，Email：chaoliu2807@sina.com。