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        2例B(A)表型無(wú)償獻(xiàn)血者的家系調(diào)查

        2012-01-30 01:19:18閆曉鵬韓惠云李雪英
        中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥 2012年17期
        關(guān)鍵詞:分子生物學(xué)家系獻(xiàn)血者

        閆曉鵬 韓惠云 李雪英

        河南省焦作市中心血站,河南焦作 454000

        2例B(A)表型無(wú)償獻(xiàn)血者的家系調(diào)查

        閆曉鵬 韓惠云 李雪英

        河南省焦作市中心血站,河南焦作 454000

        目的 對(duì)2例B(A)表型無(wú)償獻(xiàn)血者的家系進(jìn)行調(diào)查,了解該血型在家系中的傳遞情況。 方法 (1)用2個(gè)生產(chǎn)廠家的單克隆抗血清和自配的ABO細(xì)胞,對(duì)獻(xiàn)血者1家系19人、獻(xiàn)血者2家系12人進(jìn)行ABO正反定型。凡正定型凝集強(qiáng)度<4+,反定型凝集強(qiáng)度<2+,或正反定型結(jié)果不符的標(biāo)本,分別與人源抗-A、抗-B,抗-H,抗-A1,A2及A2B細(xì)胞進(jìn)一步反應(yīng)進(jìn)行亞型鑒定。(2)凡血清學(xué)確定為亞型或疑為亞型的標(biāo)本,均由上海市血液中心血型參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行基因檢測(cè)。 結(jié)果 在獻(xiàn)血者1家系19人中共發(fā)現(xiàn)亞型8人,其中,5人表現(xiàn)為B(A)表型血清學(xué)特點(diǎn),3人表現(xiàn)為 ABX亞型血清學(xué)特點(diǎn),經(jīng)基因檢測(cè)均為B(A)02基因攜帶者;獻(xiàn)血者2家系12人中共發(fā)現(xiàn)亞型5人,均表現(xiàn)為B(A)表型血清學(xué)特點(diǎn),經(jīng)基因檢測(cè)均為B(A)04基因攜帶者。 結(jié)論 B(A)基因在兩個(gè)家系中呈穩(wěn)定的顯性遺傳趨勢(shì),ABO基因定型方法是正確判定血型不可缺少的輔助手段。但在分子生物學(xué)還不能普及的基層血站及醫(yī)院,采用家系調(diào)查的方法,觀察弱抗原在家系中的傳遞情況,有時(shí)可推測(cè)弱抗原的性質(zhì),對(duì)血清學(xué)診斷不明確的亞型標(biāo)本的鑒定具有一定幫助。

        B(A)表型;家系調(diào)查;基因;血清學(xué)

        ABO亞型是指在常見(jiàn)的人類A、B、O、AB 4種血型之下進(jìn)一步細(xì)分的 ABO 血型[1]。比如 A 血型的 A2、Aint、A3、AX、Aend、Am、Ay、Ael等 ,B 血 型 的 B3、BX、Bend、Bm、Bel等 ,AB 型 的 A2B、A3B、AB3、AXB、ABX、cisAB、B(A)等。所有 ABO 亞型均具有遺傳基礎(chǔ),并可通過(guò)家系調(diào)查或分子生物學(xué)方法進(jìn)行確認(rèn)[2]。本站近日對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者中發(fā)現(xiàn)的2例B(A)表型進(jìn)行家系調(diào)查,報(bào)道如下:

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 試劑 單克隆抗-A、抗-B(分別由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司和北京金豪生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供);人源抗-A、人源抗-B、抗-A1、抗-H、A2細(xì)胞、A2B 細(xì)胞(均由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供);所有試劑均在有效期內(nèi)使用。ABO細(xì)胞(由本室使用當(dāng)天自配)。

        1.1.2 儀器設(shè)備 KA-2200血球洗滌離心機(jī)(日本KUBOTA公司);SBHW2-1型電熱恒溫水浴箱(北京醫(yī)療設(shè)備廠有限責(zé)任公司)。

        1.2 方法

        1.2.1 血型血清學(xué)試驗(yàn) (1)ABO正反定型:分別用2個(gè)生產(chǎn)廠家的單克隆抗血清和自配的ABO細(xì)胞,對(duì)獻(xiàn)血者1家系19人、獻(xiàn)血者2家系12人進(jìn)行ABO血型鑒定。凡正定型凝集強(qiáng)度<4+,反定型凝集強(qiáng)度<2+,或正反定型結(jié)果不符,均視為ABO血型異常,需進(jìn)一步增加相關(guān)試驗(yàn)進(jìn)行亞型鑒定。(2)亞型檢測(cè):對(duì)ABO血型鑒定異常的標(biāo)本,增加以下試驗(yàn)并按文獻(xiàn)[3]進(jìn)行亞型檢測(cè)及結(jié)果判定,①和多克隆人源抗-A、抗-B反應(yīng);②和抗-H反應(yīng)并觀察其反應(yīng)強(qiáng)度;③和抗-A1反應(yīng);④和A2細(xì)胞、A2B細(xì)胞反應(yīng);⑤吸收放散試驗(yàn)。

        1.2.2 分子生物學(xué)確認(rèn)試驗(yàn) 將血清學(xué)檢測(cè)為亞型的標(biāo)本快遞至上海市血液中心,由血型參比實(shí)驗(yàn)室協(xié)助進(jìn)行ABO基因檢測(cè)。

        2 結(jié)果

        通過(guò)血型血清學(xué)試驗(yàn),在獻(xiàn)血者1家系19人中共發(fā)現(xiàn)亞型8人,其中,5人表現(xiàn)為B(A)表型血清學(xué)特點(diǎn),3人表現(xiàn)為ABX亞型血清學(xué)特點(diǎn);獻(xiàn)血者2家系12人中共發(fā)現(xiàn)亞型5人,均表現(xiàn)為B(A)表型血清學(xué)特點(diǎn)。所有血清學(xué)確認(rèn)為亞型或疑為亞型的標(biāo)本,由上海市血液中心血型參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行基因檢測(cè)。結(jié)果見(jiàn)表1。

        表1 2名獻(xiàn)血者家系異常血型檢測(cè)結(jié)果

        3 討論

        由表1可見(jiàn),本次2個(gè)家系的基因測(cè)定結(jié)果均為國(guó)內(nèi)已報(bào)道的 B(A)*02 和 B(A)*04 等位基因[4],并在家系中呈穩(wěn)定的顯性遺傳趨勢(shì)。B(A)*02的B基因是在nt700處發(fā)生了單堿基突變C>G,B(A)*04的B基因則是在nt640處發(fā)生了單堿基突變A>G,從而導(dǎo)致變異的B基因具有了編碼雙功能活性酶的能力。因此,B(A)表型的血清學(xué)除了表現(xiàn)基本正常的B抗原特異性外,還表現(xiàn)少量A抗原特異性,極易被誤定為B型而輸注給B型患者,給安全輸血帶來(lái)一定隱患。采供血機(jī)構(gòu)應(yīng)選擇高質(zhì)量的抗血清進(jìn)行血型鑒定,以避免B(A)表型的漏檢[5-8]。

        表1還顯示,在血清學(xué)檢測(cè)時(shí),獻(xiàn)血者1家系中有3人表現(xiàn)為ABX亞型特點(diǎn),如果不是在B(A)表型家系調(diào)查中發(fā)現(xiàn),作為日常工作中遇到的標(biāo)本,不進(jìn)行基因檢測(cè),很難證實(shí)其弱的B抗原是由于B(A)基因所致。因?yàn)榛蜓芯匡@示,ABX和B(A)具有完全不同的分子生物學(xué)基礎(chǔ)。B(A)表型是由于B基因發(fā)生了單堿基突變而具有了編碼雙功能活性酶的能力,目前國(guó)際上報(bào)道了 6種 B(A)等位基因,即 B(A)*01~06[4]。而ABX或BX亞型則是由于B基因發(fā)生了單堿基突變而使B轉(zhuǎn)移酶活性降低,導(dǎo)致B抗原弱表達(dá),如Bw03基因即為B基因在nt721處發(fā)生單堿基突變C>T所致。目前發(fā)現(xiàn)7種新的B等位基因與B的弱表達(dá)有關(guān),即 Bw02~08[9]??梢?jiàn),ABO基因定型方法由于能克服血型血清學(xué)方法的限制,是正確判定血型不可缺少的輔助手段。但由于分子生物學(xué)技術(shù)目前還難以在基層血站或基層醫(yī)院普及,所以ABO亞型的檢測(cè)仍以血型血清學(xué)為主。如果遇到血清學(xué)診斷不明確的標(biāo)本,可采用家系調(diào)查的方法,觀察弱抗原在家系中的傳遞情況,有時(shí)便可推測(cè)弱抗原的性質(zhì),對(duì)鑒定亞型有一定幫助。比如本文中獻(xiàn)血者1首先作為先證者被確認(rèn)為B(A)表型,在對(duì)其家系進(jìn)行調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn),先證者父親的血型為ABX,母親為A,大哥為B(A),二哥和大姐均為ABX,并且B(A)血型在第三代中仍有傳遞,由此推測(cè),獻(xiàn)血者1父親的基因型應(yīng)該為A/B(A),母親的基因型應(yīng)該為A/O,獻(xiàn)血者1和其大哥因遺傳了父親的B(A)基因和母親的O基因,所以血型表現(xiàn)為B(A);而其二哥和大姐因遺傳了父親的B(A)基因和母親的A基因,所以血型表現(xiàn)為ABX;如果是血型表現(xiàn)為ABX的獻(xiàn)血者1的二哥或大姐作為先證者,通過(guò)家系調(diào)查可得出同樣的推論。另外,家系調(diào)查對(duì)確定患者的血型也非常有用。比如某患者的血型表現(xiàn)為Am,就需要判斷患者的血型是真正的亞型還是由于疾病導(dǎo)致的抗原減弱,如果是亞型,在家系調(diào)查中應(yīng)該有相同的血型傳遞,否則,很有可能是疾病導(dǎo)致的抗原減弱,應(yīng)密切觀察血型在病程中的變化情況,必要時(shí)進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定。

        [1] 向東.ABO 亞型的檢測(cè)[J].中國(guó)輸血雜志,2010,23(8):577-580.

        [2]吳遠(yuǎn)軍,吳勇,陳寶嬋,等.Am亞型患者1例的血型血清學(xué)及輸血[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2007,27(9):863-864.

        [3]肖星甫.輸血技術(shù)手冊(cè)[M].成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社,1992:68-70.

        [4]范亞欣,孟慶麗,潘凌子,等.1例罕見(jiàn)的B(A)亞型患者的血型鑒定和配血[J].中國(guó)輸血雜志,2011,24(10):892-893.

        [5]方建華,劉玉振,溫濤.國(guó)產(chǎn)單克隆抗體試劑漏檢AX1例[J].中國(guó)輸血雜志,2004,17(2):119.

        [6]徐洪衛(wèi).街頭無(wú)償獻(xiàn)血漏檢AXB亞型1例[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2006,8(1):57.

        [7]王宏法,劉玉振.國(guó)產(chǎn)血型定型試劑導(dǎo)致BX亞型漏檢1例原因分析[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2008,8(25):6152-6153.

        [8]宿蘭,楊世英,廉維,等.罕見(jiàn)的B(A)表型血清學(xué)及基因檢測(cè)[J].中國(guó)輸血雜志,2010,23(3):200-202.

        [9]李蓓,李繼明,郭忠慧,等.1例BX亞型的分子生物學(xué)研究[J].中國(guó)輸血雜志,2006,19(1):33-34.

        Family Investigation of 2 cases of B(A)phenotype gratis blood donors

        YAN Xiaopeng HAN Huiyun LI Xueying
        The Central Blood Station of Jiaozuo City in Henan Province,Jiaozuo 454000,China

        ObjectiveTo investigate the genealogy of 2 cases of B(A)phenotype gratis blood donors,in order to understand the transmission of the blood type in genealogy.MethodsMonoclonal antiserum produced by two manufacture factories and self-make ABO cells were used to proceed ABO positive and negative stereotypes among 19 people of blood donor 1 genealogy and 12 people of blood donor 2 genealogy.Specimen with positive stereotypes aggregation intensity<4+,negative stereotypes aggregation intensity<2+,or non-inconformity of positive and negative stereotypes results were given subtypes appraisal by further reaction with human anti-A,anti-B,anti-H,anti-A1,A2 and A2B cell.Subtype or subtype suspected specimen which were confirmed by serology were given genetic testing by blood type CST laboratory of Shaihai city blood center.ResultsAmong 19 people in blood donor 1 genealogy found subtype in 8 people,of whom 5 people expressed serological characteristics of B(A)phenotype,3 people expressed serological characteristics of ABX phenotype.Genetic testing showed that they were all B(A)02 genecarriers.Among 12 people in blood donor 2 genealogy found subtype in 5 people,who all expressed serological characteristics of B(A)phenotype.Genetic testing showed that they were all B(A)02 genecarriers.ConclusionB(A)gene shows a stable dominance heredity trend in two families.ABO gene stereotypes method is the necessary auxiliary means to correctly determine the blood type.Basic level blood stations and hospitals which can not popularize molecular biology,family study method is adopt to observe the weak antigen transmission in genealogy,and sometimes can speculate the character of weak antigen.It has helped to identify subtypes specimens which can not be diagnosed by serology.

        B(A)phenotype;Family investigation;Gene;Serology

        R457.1+1

        A

        1674-4721(2012)06(b)-0072-02

        2012-05-08 本文編輯:魏玉坡)

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