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        花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠胰島素敏感性的影響

        2012-01-26 09:49:18葛鵬玲劉萍馬育軒李冀
        中醫(yī)藥信息 2012年6期
        關(guān)鍵詞:花旗灌胃抵抗

        葛鵬玲,劉萍,馬育軒,李冀

        (黑龍江中醫(yī)藥大學,黑龍江 哈爾濱 150040)

        2型糖尿病的重要病理特征是胰島素抵抗。胰島素抵抗(insulin resistance IR)是指機體靶器官或組織對胰島素生物效應(yīng)的敏感性降低或喪失,即胰島素促進葡萄糖攝取和利用的效率下降[1]。IR貫穿了2型糖尿病發(fā)生發(fā)展的全過程[2-7],同時也是高血壓、冠心病、動脈硬化、肥胖等多種疾病共同聯(lián)系的病理基礎(chǔ)。

        花旗澤仁(西洋參、薏苡仁、澤瀉等)是臨床治療脾虛濕盛,濕熱內(nèi)蘊型糖尿病胰島素抵抗及相關(guān)疾病的經(jīng)驗方,療效確切。本研究利用胰島素抵抗大鼠模型,觀察花旗澤仁對胰島素敏感性的影響,證實花旗澤仁改善2型糖尿病胰島素抵抗的藥理作用。

        1 材料與方法

        1.1 實驗動物

        清潔級健康成年Wistar大鼠60只,雄性,體質(zhì)量180~220g,購自上海斯萊克實驗動物有限公司,動物合格證號:SCXK(滬)2007-0007。

        1.2 試劑與儀器

        GMJ型全自動放射免疫γ計數(shù)器(江蘇省醫(yī)療電子研究所);酶標儀(BIO-TEX INSTRUMENTS.

        基金項目:國家科技重大專項(重大新藥創(chuàng)制2012ZX09103201-018);黑龍江省自然科學基金(LC2011C03);黑龍江省教育廳項目(11521265);黑龍江省教育廳留學回國人員科技項目擇優(yōu)資助項目(2010);黑龍江省博士后科學基金(LBH-Z09001);黑龍江中醫(yī)藥大學?;?200723)

        作者簡介:葛鵬玲(1974-),女,醫(yī)學博士,副教授,碩士研究生導師,黑龍江中醫(yī)藥大學中藥學博士后科研流動站在站工作人員,主要從事中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機理研究。

        通訊作者:李冀(1960-),男,教授,博士研究生導師,國家重點學科方劑學學科帶頭人,主要從事方劑配伍規(guī)律、作用機理及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究。

        收稿日期:2012-03-05

        修回日期:2012-04-17

        INC.);TGL-16G臺式高速離心機(上海醫(yī)用分析儀器廠);One Touch血糖儀及試紙條(美國Lifescan);胰島素放射免疫分析試劑盒(北京科美東雅生物技術(shù)有限公司);羅格列酮(0409002);鏈脲佐菌素(Sigma公司)。

        1.3 IR大鼠模型的制備

        脂肪乳的制備:將豬油(20%)、丙硫氧嘧啶(1%)、膽固醇(5%)、谷氨酸鈉(1%)、蔗糖(5%)、果糖(5%)和食用鹽(6%)溶于Tween 80(20%)和丙二醇(30%)中,加水定溶配成脂肪乳。

        模型制備:將Wistar大鼠灌胃脂肪乳10天,灌胃量為10ml/kg/d。動物禁食不禁水12h后腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozocin,STZ)40mg/kg/d(STZ溶于0.1mol/L新鮮配制的枸櫞酸鈉緩沖液中,pH值4.2),連續(xù)注射2天。每次腹腔注射鏈脲佐菌素后15min,給大鼠腹腔注射胰島素0.4U,2.5h和5h后灌胃給予25%葡萄糖10ml/kg。最后一次注射鏈脲佐菌素后72h監(jiān)測血糖。所有動物繼續(xù)灌胃脂肪乳10ml/kg/d,共灌胃30 天[8]。

        1.4 分組及給藥

        以胰島素敏感指數(shù)為篩選指標,于造模組中篩選造模成功大鼠54只,隨機分為花旗澤仁高劑量組(13只)、花旗澤仁低劑量組(13只)、羅格列酮組(14只)和模型組(14只)。將花旗澤仁水煎,濃縮,得花旗澤仁水煎液。花旗澤仁高劑量組按10.8g/kg劑量灌胃給藥;花旗澤仁低劑量組按5.4g/kg劑量灌胃給藥;羅格列酮組按0.4mg/kg劑量灌胃給藥;空白組和模型組每日灌服同等體積的生理鹽水10ml/kg。

        1.5 標本收集及檢測

        連續(xù)給藥6周,于末次給藥后,禁食12h,尾靜脈采血,應(yīng)用血糖儀檢測空腹血糖(FBG);摘眼球取血,靜置30min后,4℃離心(3 000rpm)15min,吸取上部血清,采用放射性免疫分析法測定血清胰島素(FINS);計算胰島素敏感指數(shù)ISI=[1/(FBG×FINS)]。

        1.6 統(tǒng)計學處理

        2 實驗結(jié)果

        2.1 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)的影響

        由表1結(jié)果可見,與空白組比較,模型組大鼠空腹血清FBG、FINS水平升高,差異極顯著(P<0.01);與模型組比較,花旗澤仁高、低劑量組大鼠FBG、FINS下降,差異極顯著(P<0.01)。本實驗結(jié)果提示,花旗澤仁可降低胰島素抵抗大鼠的FBG和FINS,改善胰島素抵抗時的糖代謝異常。

        表1 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠FBG和FINS的影響(±s)

        表1 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠FBG和FINS的影響(±s)

        注:與空白組比較,▲▲P <0.01;與模型組比較,★★P <0.01。

        分組 n FBG(mmol/L) FINS(μIU/ml)空白組10 4.53 ±0.44 26.02 ±4.73花旗澤仁高劑量組 13 5.74±0.54★★ 30.04±3.71★★花旗澤仁低劑量組 13 6.01±0.47★★ 31.72±5.39★★羅格列酮組 14 5.86±0.52★★ 30.25±5.33★★模型組 14 7.47 ±0.67▲▲ 38.91 ±6.30▲▲

        2.2 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠胰島素敏感指數(shù)(ISI)的影響

        由表2結(jié)果可見,與空白組比較,模型組大鼠ISI下降,差異極顯著(P<0.01),說明胰島素抵抗模型復(fù)制成功;與模型組比較,花旗澤仁高、低劑量組大鼠ISI胰島素抵抗升高,差異顯著(P<0.05)。本實驗結(jié)果提示,花旗澤仁可升高胰島素抵抗大鼠的ISI,增強胰島素敏感性。

        表2 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠ISI的影響(±s)

        表2 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠ISI的影響(±s)

        注:與空白組比較,▲▲P <0.01;與模型組比較,★P <0.05,★★P <0.01。

        分組n ISI空白組10 -4.77 ±0.69花旗澤仁高劑量組 13 -5.27±0.41★花旗澤仁低劑量組 13 -5.36±0.30★羅格列酮組 14 -5.22±0.58★★模型組 14 -5.81±0.53▲▲

        3 討論

        糖尿病,特別是2型糖尿病發(fā)病率及致死率逐年升高,已被我國列入嚴重危害人民健康的10類(種)重大多發(fā)病和常見病之一。胰島素抵抗(insulin resistance IR)是2型糖尿病的重要病理特征,貫穿了2型糖尿病發(fā)生發(fā)展的全過程[2-7],同時也是肥胖、高血壓、高血脂、冠心病等多種疾病共同聯(lián)系的病理基礎(chǔ)。發(fā)生IR的確切機制尚未完全闡明,按其產(chǎn)生環(huán)節(jié)目前被人為地分為受體前抵抗、受體水平抵抗和受體后抵抗,其中以后兩者尤為重要。

        由于常用的胰島素增敏劑可促進肥胖的產(chǎn)生[9],故西醫(yī)對IR的治療存在不可避免的治療矛盾。近年來,注重整體調(diào)節(jié)和辨證論治的中醫(yī)藥在IR及其相關(guān)疾病的防治中不斷取得新進展。實驗研究表明,西洋參具有改善胰島素抵抗的藥理作用[10]?;ㄆ鞚扇室宰剃幯a氣、清熱生津之西洋參,伍以利水、滲濕、泄熱之澤瀉,滲濕、健脾之薏苡仁,補氣健脾、利濕泄熱之功尤佳,對脾虛濕盛,濕熱內(nèi)蘊患者的2型糖尿病胰島素抵抗療效確切。本研究利用胰島素抵抗大鼠模型,通過觀察花旗澤仁對大鼠胰島素敏感指數(shù)的影響,證實花旗澤仁改善2型糖尿病胰島素抵抗藥理的作用,為其在臨床推廣應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

        本研究結(jié)果顯示,經(jīng)藥物干預(yù)后,花旗澤仁高、低劑量組均可明顯升高大鼠胰島素敏感指數(shù),與模型組比較差異顯著(P<0.05)。因此,從實驗研究角度證實了花旗澤仁改善2型糖尿病胰島素抵抗的藥理作用,為進一步探討花旗澤仁的作用機制奠定了基礎(chǔ)。

        [1]Panzer C,Lauer MS,Brieke A,et al.Association of fasting plasma glucose with heart rate recovery in healthy adults:a population-based study[J].Diabetes,2002,51:803 -807.

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        [5]高秀娟,吳范武,馬會霞,等.三清降糖方改善2型糖尿病患者胰島素抵抗的臨床研究[J].西部中醫(yī)藥,2012,25(4):58 -59.

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        [8]魏偉,吳希美,李元建.藥理實驗方法學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:1367-1368.

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        [10]葛鵬玲,李冀,馬育軒,等.葡萄糖氧化酶法篩選西洋參干預(yù)胰島素抵抗脂肪細胞模型的活性成分[J].中醫(yī)藥信息,2010,27(3):110-112.

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