葛鵬玲，劉萍，馬育軒，李冀

(黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040)

2型糖尿病的重要病理特征是胰島素抵抗。胰島素抵抗(insulin resistance IR)是指機體靶器官或組織對胰島素生物效應(yīng)的敏感性降低或喪失，即胰島素促進葡萄糖攝取和利用的效率下降［1］。IR貫穿了2型糖尿病發(fā)生發(fā)展的全過程［2－7］，同時也是高血壓、冠心病、動脈硬化、肥胖等多種疾病共同聯(lián)系的病理基礎(chǔ)。

花旗澤仁(西洋參、薏苡仁、澤瀉等)是臨床治療脾虛濕盛，濕熱內(nèi)蘊型糖尿病胰島素抵抗及相關(guān)疾病的經(jīng)驗方，療效確切。本研究利用胰島素抵抗大鼠模型，觀察花旗澤仁對胰島素敏感性的影響，證實花旗澤仁改善2型糖尿病胰島素抵抗的藥理作用。

1 材料與方法

1．1 實驗動物

清潔級健康成年Wistar大鼠60只，雄性，體質(zhì)量180～220g，購自上海斯萊克實驗動物有限公司，動物合格證號:SCXK(滬)2007－0007。

1．2 試劑與儀器

GMJ型全自動放射免疫γ計數(shù)器(江蘇省醫(yī)療電子研究所);酶標儀(BIO－TEX INSTRUMENTS．

基金項目:國家科技重大專項(重大新藥創(chuàng)制2012ZX09103201－018);黑龍江省自然科學基金(LC2011C03);黑龍江省教育廳項目(11521265);黑龍江省教育廳留學回國人員科技項目擇優(yōu)資助項目(2010);黑龍江省博士后科學基金(LBH－Z09001);黑龍江中醫(yī)藥大學?；?200723)

作者簡介:葛鵬玲(1974－)，女，醫(yī)學博士，副教授，碩士研究生導師，黑龍江中醫(yī)藥大學中藥學博士后科研流動站在站工作人員，主要從事中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機理研究。

通訊作者:李冀(1960－)，男，教授，博士研究生導師，國家重點學科方劑學學科帶頭人，主要從事方劑配伍規(guī)律、作用機理及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究。

收稿日期:2012－03－05

修回日期:2012－04－17

INC．);TGL－16G臺式高速離心機(上海醫(yī)用分析儀器廠);One Touch血糖儀及試紙條(美國Lifescan);胰島素放射免疫分析試劑盒(北京科美東雅生物技術(shù)有限公司);羅格列酮(0409002);鏈脲佐菌素(Sigma公司)。

1．3 IR大鼠模型的制備

脂肪乳的制備:將豬油(20%)、丙硫氧嘧啶(1%)、膽固醇(5%)、谷氨酸鈉(1%)、蔗糖(5%)、果糖(5%)和食用鹽(6%)溶于Tween 80(20%)和丙二醇(30%)中，加水定溶配成脂肪乳。

模型制備:將Wistar大鼠灌胃脂肪乳10天，灌胃量為10ml/kg/d。動物禁食不禁水12h后腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozocin，STZ)40mg/kg/d(STZ溶于0.1mol/L新鮮配制的枸櫞酸鈉緩沖液中，pH值4．2)，連續(xù)注射2天。每次腹腔注射鏈脲佐菌素后15min，給大鼠腹腔注射胰島素0．4U，2．5h和5h后灌胃給予25%葡萄糖10ml/kg。最后一次注射鏈脲佐菌素后72h監(jiān)測血糖。所有動物繼續(xù)灌胃脂肪乳10ml/kg/d，共灌胃30 天［8］。

1．4 分組及給藥

以胰島素敏感指數(shù)為篩選指標，于造模組中篩選造模成功大鼠54只，隨機分為花旗澤仁高劑量組(13只)、花旗澤仁低劑量組(13只)、羅格列酮組(14只)和模型組(14只)。將花旗澤仁水煎，濃縮，得花旗澤仁水煎液。花旗澤仁高劑量組按10．8g/kg劑量灌胃給藥;花旗澤仁低劑量組按5．4g/kg劑量灌胃給藥;羅格列酮組按0．4mg/kg劑量灌胃給藥;空白組和模型組每日灌服同等體積的生理鹽水10ml/kg。

1．5 標本收集及檢測

連續(xù)給藥6周，于末次給藥后，禁食12h，尾靜脈采血，應(yīng)用血糖儀檢測空腹血糖(FBG);摘眼球取血，靜置30min后，4℃離心(3 000rpm)15min，吸取上部血清，采用放射性免疫分析法測定血清胰島素(FINS);計算胰島素敏感指數(shù)ISI=［1/(FBG×FINS)］。

1．6 統(tǒng)計學處理

2 實驗結(jié)果

2．1 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)的影響

由表1結(jié)果可見，與空白組比較，模型組大鼠空腹血清FBG、FINS水平升高，差異極顯著(P＜0．01);與模型組比較，花旗澤仁高、低劑量組大鼠FBG、FINS下降，差異極顯著(P＜0．01)。本實驗結(jié)果提示，花旗澤仁可降低胰島素抵抗大鼠的FBG和FINS，改善胰島素抵抗時的糖代謝異常。

表1 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠FBG和FINS的影響(±s)

表1 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠FBG和FINS的影響(±s)

注:與空白組比較，▲▲P ＜0．01;與模型組比較，★★P ＜0．01。

分組 n FBG(mmol/L) FINS(μIU/ml)空白組10 4．53 ±0．44 26．02 ±4．73花旗澤仁高劑量組 13 5．74±0．54★★ 30．04±3．71★★花旗澤仁低劑量組 13 6．01±0．47★★ 31．72±5．39★★羅格列酮組 14 5．86±0．52★★ 30．25±5．33★★模型組 14 7．47 ±0．67▲▲ 38．91 ±6．30▲▲

2．2 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠胰島素敏感指數(shù)(ISI)的影響

由表2結(jié)果可見，與空白組比較，模型組大鼠ISI下降，差異極顯著(P＜0．01)，說明胰島素抵抗模型復(fù)制成功;與模型組比較，花旗澤仁高、低劑量組大鼠ISI胰島素抵抗升高，差異顯著(P＜0．05)。本實驗結(jié)果提示，花旗澤仁可升高胰島素抵抗大鼠的ISI，增強胰島素敏感性。

表2 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠ISI的影響(±s)

表2 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠ISI的影響(±s)

注:與空白組比較，▲▲P ＜0．01;與模型組比較，★P ＜0.05，★★P ＜0．01。

分組n ISI空白組10 －4．77 ±0．69花旗澤仁高劑量組 13 －5．27±0．41★花旗澤仁低劑量組 13 －5．36±0．30★羅格列酮組 14 －5．22±0．58★★模型組 14 －5．81±0．53▲▲

3 討論

糖尿病，特別是2型糖尿病發(fā)病率及致死率逐年升高，已被我國列入嚴重危害人民健康的10類(種)重大多發(fā)病和常見病之一。胰島素抵抗(insulin resistance IR)是2型糖尿病的重要病理特征，貫穿了2型糖尿病發(fā)生發(fā)展的全過程［2－7］，同時也是肥胖、高血壓、高血脂、冠心病等多種疾病共同聯(lián)系的病理基礎(chǔ)。發(fā)生IR的確切機制尚未完全闡明，按其產(chǎn)生環(huán)節(jié)目前被人為地分為受體前抵抗、受體水平抵抗和受體后抵抗，其中以后兩者尤為重要。

由于常用的胰島素增敏劑可促進肥胖的產(chǎn)生［9］，故西醫(yī)對IR的治療存在不可避免的治療矛盾。近年來，注重整體調(diào)節(jié)和辨證論治的中醫(yī)藥在IR及其相關(guān)疾病的防治中不斷取得新進展。實驗研究表明，西洋參具有改善胰島素抵抗的藥理作用［10］?；ㄆ鞚扇室宰剃幯a氣、清熱生津之西洋參，伍以利水、滲濕、泄熱之澤瀉，滲濕、健脾之薏苡仁，補氣健脾、利濕泄熱之功尤佳，對脾虛濕盛，濕熱內(nèi)蘊患者的2型糖尿病胰島素抵抗療效確切。本研究利用胰島素抵抗大鼠模型，通過觀察花旗澤仁對大鼠胰島素敏感指數(shù)的影響，證實花旗澤仁改善2型糖尿病胰島素抵抗藥理的作用，為其在臨床推廣應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，經(jīng)藥物干預(yù)后，花旗澤仁高、低劑量組均可明顯升高大鼠胰島素敏感指數(shù)，與模型組比較差異顯著(P＜0．05)。因此，從實驗研究角度證實了花旗澤仁改善2型糖尿病胰島素抵抗的藥理作用，為進一步探討花旗澤仁的作用機制奠定了基礎(chǔ)。

［1］Panzer C，Lauer MS，Brieke A，et al．Association of fasting plasma glucose with heart rate recovery in healthy adults:a population－based study［J］．Diabetes，2002，51:803 －807．

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［10］葛鵬玲，李冀，馬育軒，等．葡萄糖氧化酶法篩選西洋參干預(yù)胰島素抵抗脂肪細胞模型的活性成分［J］．中醫(yī)藥信息，2010，27(3):110－112．