于虹敏,林文津,徐榕青,張亞敏
1.福建中醫(yī)藥大學,福建 福州 350001;2.福建省醫(yī)學科學研究院,福建 福州 350001
毛細管電泳技術(shù) (CE)是在80年代后期出現(xiàn)并逐漸應用到藥學等領(lǐng)域的,其最高柱效可達105理論板數(shù),最高靈敏度可達10-19 mol,擁有區(qū)帶電泳,凝膠電泳等多種形式[1]。CE正在逐漸成為藥物鑒定的參考或標準方法,2010版藥典化藥品種中就采用了分離效能較高的毛細管電泳法,其中抑肽酶增加的去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶和去丙氨酸-抑肽酶檢查就是采用毛細管電泳法。本文對毛細管電泳技術(shù)在藥學領(lǐng)域定性定量研究中的應用作一概述。
藥物主成分測定、雜質(zhì)分析、產(chǎn)品合格檢驗、生產(chǎn)過程控制、真?zhèn)萎a(chǎn)品鑒別、藥物品質(zhì)測試等工作都離不開定量工作,因此定量分析是制藥行業(yè)必不可少的內(nèi)容。李喜鳳等[2]應用高效毛細管電泳法測定蒲公英中主要有效成分咖啡酸、綠原酸和阿魏酸的含量。吳敏[3]等應用毛細管電泳法同時測定中成藥及保健品中人參皂苷 Rg1、Re、紅景天苷、淫羊藿苷、腺苷5種苷類成分的含量。
CE本身和色譜一樣,并不具備結(jié)構(gòu)鑒別能力,所以不能直接用于藥物的定性分析。但利用其分離特性并結(jié)合其他技術(shù),CE也可以用于定性分析。
徐都冷等[4]應用高效毛細管電泳技術(shù)建立蒙藥材森登的指紋圖譜,并對7種不同產(chǎn)地的森登進行了分析,初步建立了以6個共有峰為特征指紋信息的 HPCE指紋圖譜。李偉東等[5]以10個批次的通塞脈微丸為樣品建立了通塞脈微丸的毛細管電泳指紋圖譜,確認共有指紋峰16個,并確定了甘草苷、甘草素、甘草酸單銨鹽、肉桂酸、綠原酸、阿魏酸的峰。蘇恒等[6]采用高效毛細管電泳法,研究了江浙蝮蛇蛇毒蛋白指紋圖譜,為建立更全面的色譜指紋圖譜,滿足蛇毒的全面質(zhì)量管理的需要提供了依據(jù)。
李英杰等[7]提出了高效毛細管電泳拆分手性藥物中間體1-甲基-3-苯基丙胺的方法,分離快捷,為進一步開展1-甲基-3-苯基丙胺對映體的研究提供了依據(jù)。黃碧云等[8]建立一種快速有效拆分苯磺酸氨氯地平對映體的分析方法。該法可快速有效地分離苯磺酸氨氯地平對映體,可用于其手性拆分及光學純度測定。
凌笑梅等[9]采用毛細管電泳法研究了凝血酶和水蛭素及肝素問的相互作用,并測定了凝血酶和水蛭素的結(jié)合常數(shù)。林炳承[10,12]課題組以肝素為模型藥物,采用間接激光誘導熒光檢測技術(shù)在玻璃芯片上研究了肝素與牛血清白蛋白之間的相互作用。該作者[12]還采用毛細管電泳方法研究15種不同鏈長和不同硫酸基含量的硫酸寡聚糖 (DexS)和G-CSF的相互作用。采用細胞生物學實驗觀察被篩選出的寡聚糖與G-CSF結(jié)合后對小鼠白血病細胞增生、細胞周期、細胞表面抗原的表達和細胞形態(tài)的影響,以證明毛細管電泳所篩選出的DexS具有促進細胞分化等生物學活性。
綜上所述,CE可以對藥物及其產(chǎn)品進行含量測定、指紋分析、組分定性、純度鑒定等;利用CE的峰參數(shù)不僅可以對中藥的來源、真?zhèn)?、品質(zhì)進行鑒定或判別,還可以對制藥的過程進行監(jiān)控或動態(tài)分析。此外,CE還可以分析小分子和大分子藥物,已成為基因工程藥物的一種有效的分析和鑒定手段。CE還能夠用以研究藥物的代謝過程,測定代謝產(chǎn)物、分析各種體液中的藥物成分及其分布、研究藥物分子的相互作用、探討藥物的毒理等。相信隨著CE技術(shù)不斷成熟,必將會得到更加廣泛的應用。
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