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        毛細(xì)管電泳技術(shù)在藥學(xué)研究的應(yīng)用概述

        2012-01-25 06:32:46于虹敏林文津徐榕青張亞敏
        中國(guó)民族民間醫(yī)藥 2012年1期
        關(guān)鍵詞:映體毛細(xì)管電泳

        于虹敏,林文津,徐榕青,張亞敏

        1.福建中醫(yī)藥大學(xué),福建 福州 350001;2.福建省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院,福建 福州 350001

        毛細(xì)管電泳技術(shù) (CE)是在80年代后期出現(xiàn)并逐漸應(yīng)用到藥學(xué)等領(lǐng)域的,其最高柱效可達(dá)105理論板數(shù),最高靈敏度可達(dá)10-19 mol,擁有區(qū)帶電泳,凝膠電泳等多種形式[1]。CE正在逐漸成為藥物鑒定的參考或標(biāo)準(zhǔn)方法,2010版藥典化藥品種中就采用了分離效能較高的毛細(xì)管電泳法,其中抑肽酶增加的去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶和去丙氨酸-抑肽酶檢查就是采用毛細(xì)管電泳法。本文對(duì)毛細(xì)管電泳技術(shù)在藥學(xué)領(lǐng)域定性定量研究中的應(yīng)用作一概述。

        1 定量分析

        藥物主成分測(cè)定、雜質(zhì)分析、產(chǎn)品合格檢驗(yàn)、生產(chǎn)過(guò)程控制、真?zhèn)萎a(chǎn)品鑒別、藥物品質(zhì)測(cè)試等工作都離不開定量工作,因此定量分析是制藥行業(yè)必不可少的內(nèi)容。李喜鳳等[2]應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定蒲公英中主要有效成分咖啡酸、綠原酸和阿魏酸的含量。吳敏[3]等應(yīng)用毛細(xì)管電泳法同時(shí)測(cè)定中成藥及保健品中人參皂苷 Rg1、Re、紅景天苷、淫羊藿苷、腺苷5種苷類成分的含量。

        2 定性分析

        CE本身和色譜一樣,并不具備結(jié)構(gòu)鑒別能力,所以不能直接用于藥物的定性分析。但利用其分離特性并結(jié)合其他技術(shù),CE也可以用于定性分析。

        2.1 復(fù)雜樣品的指紋圖譜

        徐都冷等[4]應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳技術(shù)建立蒙藥材森登的指紋圖譜,并對(duì)7種不同產(chǎn)地的森登進(jìn)行了分析,初步建立了以6個(gè)共有峰為特征指紋信息的 HPCE指紋圖譜。李偉東等[5]以10個(gè)批次的通塞脈微丸為樣品建立了通塞脈微丸的毛細(xì)管電泳指紋圖譜,確認(rèn)共有指紋峰16個(gè),并確定了甘草苷、甘草素、甘草酸單銨鹽、肉桂酸、綠原酸、阿魏酸的峰。蘇恒等[6]采用高效毛細(xì)管電泳法,研究了江浙蝮蛇蛇毒蛋白指紋圖譜,為建立更全面的色譜指紋圖譜,滿足蛇毒的全面質(zhì)量管理的需要提供了依據(jù)。

        2.2 手性分離分析

        李英杰等[7]提出了高效毛細(xì)管電泳拆分手性藥物中間體1-甲基-3-苯基丙胺的方法,分離快捷,為進(jìn)一步開展1-甲基-3-苯基丙胺對(duì)映體的研究提供了依據(jù)。黃碧云等[8]建立一種快速有效拆分苯磺酸氨氯地平對(duì)映體的分析方法。該法可快速有效地分離苯磺酸氨氯地平對(duì)映體,可用于其手性拆分及光學(xué)純度測(cè)定。

        2.3 藥物篩選

        凌笑梅等[9]采用毛細(xì)管電泳法研究了凝血酶和水蛭素及肝素問(wèn)的相互作用,并測(cè)定了凝血酶和水蛭素的結(jié)合常數(shù)。林炳承[10,12]課題組以肝素為模型藥物,采用間接激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)技術(shù)在玻璃芯片上研究了肝素與牛血清白蛋白之間的相互作用。該作者[12]還采用毛細(xì)管電泳方法研究15種不同鏈長(zhǎng)和不同硫酸基含量的硫酸寡聚糖 (DexS)和G-CSF的相互作用。采用細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察被篩選出的寡聚糖與G-CSF結(jié)合后對(duì)小鼠白血病細(xì)胞增生、細(xì)胞周期、細(xì)胞表面抗原的表達(dá)和細(xì)胞形態(tài)的影響,以證明毛細(xì)管電泳所篩選出的DexS具有促進(jìn)細(xì)胞分化等生物學(xué)活性。

        3 展望

        綜上所述,CE可以對(duì)藥物及其產(chǎn)品進(jìn)行含量測(cè)定、指紋分析、組分定性、純度鑒定等;利用CE的峰參數(shù)不僅可以對(duì)中藥的來(lái)源、真?zhèn)巍⑵焚|(zhì)進(jìn)行鑒定或判別,還可以對(duì)制藥的過(guò)程進(jìn)行監(jiān)控或動(dòng)態(tài)分析。此外,CE還可以分析小分子和大分子藥物,已成為基因工程藥物的一種有效的分析和鑒定手段。CE還能夠用以研究藥物的代謝過(guò)程,測(cè)定代謝產(chǎn)物、分析各種體液中的藥物成分及其分布、研究藥物分子的相互作用、探討藥物的毒理等。相信隨著CE技術(shù)不斷成熟,必將會(huì)得到更加廣泛的應(yīng)用。

        [1]林炳承.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,1992,19(4):269-258.

        [2]李喜鳳,郝哲,邱天寶,等.HPCE同時(shí)測(cè)定蒲公英3種有機(jī)酸的含量[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥,2011,28(4):350-353.

        [3]吳敏,盧佳,孫成均,等.HPCE法同時(shí)測(cè)定保健品及中成藥中的5種苷類成分[J].華西藥學(xué)雜志,2011,26(2):165~167.

        [4]徐都冷,紅顏,巴根那,等.蒙藥森登HPCE法的指紋圖譜研究[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志,2011,1(1):31-33.

        [5]李偉東,張志杰,蔡寶昌,等.通塞脈微丸高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜的研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010,16(17):53-56.

        [6]蘇恒,魏曉東,趙丈杰,等.蝮蛇蛇毒蛋白指紋圖譜研究及應(yīng)用[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志,2009,40(4):288-291.

        [7]李英杰,孫鵬,秦世麗,等.高效毛細(xì)管電泳法分離1-甲基-3-苯基丙胺對(duì)映體[J].理化檢驗(yàn)-化學(xué)分冊(cè),2010,(46):170-171.

        [8]黃碧云,趙鑫,袁牧,等.苯磺酸氨氯地平對(duì)映體的高效毛細(xì)管電泳手性分離[J].藥學(xué)進(jìn)展2009,33,(9):222-226.

        [9]凌笑梅,劉一,賴先銀,等.采用毛細(xì)管電泳方法以凝血酶為靶點(diǎn)篩選天然藥物提取化合物[J].高等學(xué)?;瘜W(xué)學(xué)報(bào),2007,2(28):234-237.

        [10]林炳承,等.毛細(xì)管電泳篩選與集落細(xì)胞刺激因子有相互作用的寡聚糖及其生物活性[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,11(8):1276-1281.

        [11] LIU XJ,LI ANG AY.LIN BC,et a1.Studying drug-plasma protein interactions by two- injector microchip electrophoresis frontal analysis[J].Electrophoresis,2006,27(24):5128 -5131.

        [12] LIU XJ,LIU X,LIN BC,et a1.Studying protein-drug interaction by microfluidic chip affinity capillary electrophoresis with indirect laser-induced fluorescence detection[J].Electrophoresis,2006,27(15):3125 -3128.

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