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        溶劑法提取青蒿素的工藝

        2012-01-25 06:32:46周凌云
        中國(guó)民族民間醫(yī)藥 2012年1期
        關(guān)鍵詞:濾餅青蒿青蒿素

        周凌云

        安徽省皖南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系,安徽 蕪湖 241002

        青蒿素(Artennuin)是從菊科植物青蒿 (Artemisia annua L.)中提取而得,對(duì)腦型及抗氯喹惡性瘧疾有特殊療效,引起國(guó)內(nèi)外的重視。[1]目前,青蒿素的提取方法及純化方法有很多種,筆者也曾經(jīng)報(bào)道過(guò)通過(guò)多次柱層析來(lái)降低成本的研究工藝,[2]但同樣存在回收率低,不易工藝化,生產(chǎn)周期長(zhǎng)的缺點(diǎn)。

        本實(shí)驗(yàn)僅采用溶劑法處理,簡(jiǎn)化了生產(chǎn)步驟,生產(chǎn)周期短;且對(duì)濾餅中夾帶的少量青蒿素也用溶劑反復(fù)處理得到結(jié)晶,回收率高。

        1 原料及試劑

        黃花蒿購(gòu)自安徽亳州中藥基地;青蒿素對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所;所涉試劑除120號(hào)汽油外其余均為國(guó)產(chǎn)化學(xué)純;Agilent公司1100系列HPLC。

        2 HPLC檢測(cè)方法

        ZORBAX-C18色譜柱 (4.6mmх150mm,5um);流動(dòng)相:乙腈:水 (44:56);檢測(cè)波長(zhǎng):210nm;柱溫:30℃;流速:1mL/min,進(jìn)樣體積:10uL。本方法精密稱取青蒿素對(duì)照品20mg于10mL棕色容量瓶,用流動(dòng)相溶解,取對(duì)照品溶液10uL注入,按上述色譜條件進(jìn)行檢測(cè),按外標(biāo)法測(cè)定,以峰面積計(jì)算。測(cè)得青蒿素平均回收率100.1%(n=3),RSD=0.3。

        3 實(shí)驗(yàn)步驟

        3.1 精制過(guò)程 將青蒿原料粉碎至60目,然后倒入5倍青蒿總量的120號(hào)溶劑油 (價(jià)格為石油醚的1/2,提取率相似,達(dá)到90%以上)。通過(guò)均勻設(shè)計(jì)的現(xiàn)代試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法,確定了分三次提取,時(shí)間分別為4-3-3小時(shí),每次溶劑量均為5倍量,第一次的前2個(gè)小時(shí)冷浸,后2小時(shí)加熱,后面均直接加熱,加熱溫度為50~55度,每次提取均應(yīng)攪拌。提取結(jié)束后60度下回收溶劑,大約每10Kg青蒿原材料的提取液可濃縮至600mL膏狀物。在其中加入自配的混合溶劑,經(jīng)過(guò)濾,得到黃色濾餅,其中夾雜有白色針狀結(jié)晶,該濾餅中含有大量的青蒿素 (提取率約90%,HPLC檢測(cè)含量約40%),濾液中還有約10%青蒿素,留待合并處理。在黃色濾餅中加入固體物20倍量的80~85%乙醇,和固體重量10%的粉狀活性炭,加熱至沸騰2min,放出過(guò)濾,濾液自然冷卻結(jié)晶12小時(shí),過(guò)濾出結(jié)晶體,加熱乙醇重結(jié)晶,可得白色針狀結(jié)晶物 (純度為99.0%)。

        3.2 濾液中剩余10%青蒿素的處理 合并多次濾液,濃縮成浸膏,取2倍量的無(wú)水乙醇與濃縮剩余物充分混合,然后緩緩加入水,加水量約為無(wú)水乙醇量的30%,上層油狀物濾去,下層液體回收為浸膏,采用3.1方法處理即可得到結(jié)晶。濾餅中經(jīng)HPLC檢測(cè)僅含約1%青蒿素。

        4 小結(jié)

        本工藝的精制部分,取消了繁瑣的柱層析方法,改用溶劑法,首先使用混合溶劑除去提取物中大部分的雜質(zhì),得到粗品,再用乙醇進(jìn)行結(jié)晶-重結(jié)晶,得到純度很高的精品。方法簡(jiǎn)單易行,溶劑消耗量少,毒性相對(duì)較小,且60度下回收率高,生產(chǎn)周期短 (約為60小時(shí)),易進(jìn)行工藝生產(chǎn)。

        [1]李國(guó)棟,周全.青蒿素類藥物的研究現(xiàn)狀[J].中國(guó)藥學(xué)雜志,1998,33(7):385-389.

        [2]周凌云.青蒿素純化工藝的研究[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥,2010,19(11):49.

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