梅小寒

湖北省丹江口市第一醫(yī)院，湖北 丹江口 442700

為加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室生物安全，防止實(shí)驗(yàn)室交叉感染，本文試對(duì)HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)室的生物安全的若干問題進(jìn)行初步探討。

1 實(shí)驗(yàn)室要求

實(shí)驗(yàn)室主要配置：酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、洗眼裝置，離心機(jī)生物安全柜。其中，生物安全柜應(yīng)放置在沒有氣流明顯流動(dòng)的地方，避免生物安全柜在工作時(shí)受外界氣流影響正常的內(nèi)部層流。

2 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理

實(shí)驗(yàn)室危害評(píng)估對(duì)新建成或已建HIV抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室必須作一次實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危害評(píng)估。評(píng)估內(nèi)容應(yīng)根據(jù)各實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)狀、條件、人員，以及具體實(shí)驗(yàn)活動(dòng)等諸多因素綜合考慮。

2.2 健全實(shí)驗(yàn)室管理制度體系完善各類生物安全管理制度。應(yīng)包括樣本的處置與包藏管理、儀器的安全使用、消毒隔離措施、應(yīng)急事故處理、實(shí)驗(yàn)廢棄物處理、人員健康定期醫(yī)學(xué)監(jiān)護(hù)制度、職業(yè)暴露處理等。

2.3 個(gè)人防護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員所采用的個(gè)人防護(hù)裝備均應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。使用前應(yīng)仔細(xì)檢查，不使用標(biāo)志不清或破損的防護(hù)用品。同時(shí)應(yīng)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)用品，并正確使用。一次性的用品不可反復(fù)使用。

3 樣本采集

3.1 HIV抗體檢測(cè)只要采集血液樣本。樣本采集的工作人員應(yīng)掌握相關(guān)專業(yè)知識(shí)和操作技能。能夠有效地防止病原微生物擴(kuò)散和感染。

3.2 在樣本采集過程中工作人員必須清楚意識(shí)到待檢樣本的潛在感染性。操作時(shí)必須戴手套 (如果采集已知的HIV感染者或患者的樣本時(shí)，應(yīng)戴雙層手套)，提倡使用真空采血器，若使用普通的注射器，采血后不得使用手摘取針頭。不得給注射器重新“戴帽”，避免刺傷手。針筒內(nèi)的血要小心緩慢地沿管壁注入試管內(nèi)，防止血液外濺。

3.3 使用后的真空采血器或普通注射器及止血棉球都含有待檢樣本的血液。必須立即放入含有消毒液的容器內(nèi)，按有關(guān)要求消毒一定期限后，作為醫(yī)療廢棄物處理，或放置于生物廢棄袋中，在密封的情況下送去作高壓滅菌處理。

4 樣品轉(zhuǎn)移

實(shí)驗(yàn)室間的遠(yuǎn)程運(yùn)輸需利用車、船、飛機(jī)等交通工具運(yùn)輸?shù)臉颖?、?yīng)采用世界衛(wèi)生組織 (WHO)提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)。

5 樣本接受、開啟

實(shí)驗(yàn)室接受樣本應(yīng)在生物安全柜內(nèi)開啟包裝件，并檢查盛裝樣本的試管有無破損或滲出的情況。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將存留的樣本移出，對(duì)被污染的試管、試管架和盛器均需作嚴(yán)格消毒。

6 樣本分離

6.1 離心機(jī)分離血清樣本在離心前最好在實(shí)驗(yàn)室自然放置1～2h。在離心時(shí)，最好使用帶有密封離心桶 (安全杯)或者密封轉(zhuǎn)頭的離心機(jī)分離血清。離心后，應(yīng)在生物安全柜里開啟試管。在生物安全柜內(nèi)分離血清，操作時(shí)盡量避免產(chǎn)生氣溶膠，工作人員的手臂動(dòng)作幅度不能太大。以免影響安全柜內(nèi)的空氣層流，如果是無蓋的試管，應(yīng)在離心完畢后，靜止30min后，再開啟離心機(jī)蓋。如發(fā)生試管破損，要對(duì)離心機(jī)進(jìn)行嚴(yán)格消毒。

6.2 血清分離器械的處理操作完畢后，所有的吸管、Tip吸頭、含血細(xì)胞的試管等廢棄物應(yīng)置于規(guī)定的已含適當(dāng)消毒液容器內(nèi)，小心移出生物安全柜，高壓后焚燒。如使用濾紙片作為載體收集的樣本，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用緩沖液浸泡、離心收集樣本的操作，亦參照上述要求處理。要求工作人員將所有實(shí)驗(yàn)操作移至生物安全柜中進(jìn)行，安全柜內(nèi)工作臺(tái)面由左到右分別為相對(duì)清潔和污染區(qū)域。

7 樣本檢測(cè)

7.1 手工操作加樣、混勻用移液器將分離好的血清在生物安全柜內(nèi)加樣至酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)或其他試劑反應(yīng)孔中，小心混勻，盡可能避免氣溶膠的產(chǎn)生。封蓋后，用托盤平移至溫箱孵育;洗滌、溢出洗板機(jī)使用前應(yīng)檢查洗液針孔是否阻塞，如發(fā)現(xiàn)阻塞應(yīng)盡快疏通，在洗滌過程中要注意洗滌液不能溢出;每次洗滌完畢，用蒸餾水洗滌幾次，以免洗滌液中的成分產(chǎn)生結(jié)晶阻塞針孔，造成實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染。

7.2 自動(dòng)化酶標(biāo)儀檢測(cè) 該儀器操作中存在有加樣探針及洗滌的廢液均應(yīng)根據(jù)每次廢液的量加入足夠的消毒劑，作用規(guī)定時(shí)間后處理。

8 剩余樣本處理

如需保藏的血清或血漿樣本，應(yīng)設(shè)有專用冰箱，登記造冊(cè)入檔專人保管。若專庫保藏的，必須按國(guó)家高致病性樣本管理要求保藏。不需保藏的所有標(biāo)本，按實(shí)驗(yàn)室廢棄物處置。

9 廢棄物處置

9.1 從實(shí)驗(yàn)室出來的所有廢棄物。包括不需要的樣本 (血細(xì)胞、血清)、反應(yīng)板試劑陰陽性對(duì)照、ELISA標(biāo)記物、試劑包裝盒等，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器或生物廢物袋中。經(jīng)高壓無害處理后，密封容器或扎緊廢物袋口。按環(huán)衛(wèi)部門要求處置。有專人按特定程序和方法進(jìn)行清潔和消毒，污染或可能造成污染的材料在帶出實(shí)驗(yàn)室前均應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格消毒。

9.2 記錄廢棄物的處理應(yīng)做好記錄。

9.3 消毒效果檢測(cè)可使用化學(xué)、生物指示帶 (劑)法。每次高壓滅菌需要的化學(xué)指示帶，每月用生物指示劑來檢測(cè)滅菌效果。

10 人員準(zhǔn)入制度

實(shí)驗(yàn)室必須建立嚴(yán)格的人員準(zhǔn)入制度，嚴(yán)禁非本職工作人員進(jìn)人實(shí)驗(yàn)區(qū)域。

HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)室的生物安全作為體系管理，在實(shí)驗(yàn)室的管理工作中具備著極其重要的意義。在每次實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中，把可能對(duì)人員和環(huán)境發(fā)生的危害控制到最低。這些管理活動(dòng)使原來一些不規(guī)范的操作受到約束和干預(yù)，但是，為了長(zhǎng)治久安和每位工作人員的生命安全，，每個(gè)工作人員必須要樹立科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度來搞好實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作。