王青，龐玲霞，王友沛，葛海峰

（溫州醫(yī)學(xué)院，浙江 溫州 325035，1.機能中心；2.附屬眼視光醫(yī)院 檢驗科；3.附屬第二醫(yī)院檢驗科）

不孕不育是臨床生殖醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的難點和熱點。引起不孕不育的因素有很多，其中免疫因素是其最常見的原因。近年來隨著生殖免疫學(xué)的發(fā)展，人們開始認(rèn)識到不孕不育患者可能存在自身免疫失調(diào)，因此免疫性不孕不育的檢查已引起臨床的重視。研究發(fā)現(xiàn)，抗精子抗體（AsAb）和抗心磷脂抗體（ACA）是導(dǎo)致不孕不育的重要免疫因素。本研究通過檢測不孕不育患者AsAb、ACA水平，并以正常生育組作為對照，探討AsAb、ACA與不孕不育的關(guān)系。

1 對象和方法

1.1 對象 2003年1月至2011年3月在溫州醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院生殖中心就診的不孕不育患者1 756例，年齡21～45歲，平均（27.23±3.69）歲；不孕不育時間2～18年，排除生殖器畸形及其他病變。不孕不育的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照人民衛(wèi)生出版社樂杰主編的《婦產(chǎn)科學(xué)》第5版[1]。1 756例不孕不育患者檢測了ACA，其中1 326例不孕不育患者（不孕不育組）同時檢測了ACA和AsAb。1 127例反復(fù)自發(fā)性流產(chǎn)患者（流產(chǎn)≥2次）（高危組）檢測了ACA。20對正常生育夫婦作為正常對照（正常生育組），年齡23～35歲，平均（27.63±3.05）歲。所有入選者均為首次檢測血清AsAb、ACA。該研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 試劑及檢測方法 抽取靜脈血3～5 mL，不抗凝，離心后分離出血清，立即測定或置于-20 ℃冰箱保存，測定時血清經(jīng)解凍平衡至室溫。ACA與AsAb測定采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法，ACA檢測IgG、IgM及IgA三種抗體，AsAb檢測總抗體及IgM。ELISA試劑盒由歐蒙醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)有限公司提供，酶標(biāo)儀是DIAGNOSTIC.CRIFOLS.S.A.生產(chǎn)的TRITURUS變色龍全自動酶免系統(tǒng)，操作和結(jié)果判斷均按試劑盒說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理方法 采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析，組間統(tǒng)計學(xué)處理采用用x2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清AsAb的測定結(jié)果 1 326例不孕不育患者血清中AsAb陽性284例，占21.4%，其中IgM陽性179例，占13.5%。不孕不育組AsAb陽性率與正常生育組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果見表1。2.2 各組血清ACA測定結(jié)果 1 756例不孕不育患者中ACA陽性643例，陽性率為36.6%；高危組ACA陽性471例，陽性率為41.8%；與正常生育組（5.0%）比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），結(jié)果見表2。

表1 不孕不育組與正常生育組AsAb陽性率比較 n（%）

表2 三組ACA陽性率比較 n（%）

3 討論

隨著檢驗技術(shù)的提高和現(xiàn)代生殖免疫學(xué)研究的進展，人們對免疫性不孕不育有了更多的認(rèn)識。據(jù)文獻報道，除了遺傳因素、內(nèi)分泌失調(diào)、感染、全身性疾病及生殖器官畸形外，免疫因素約占不孕不育原因的50%～70%[2]。免疫性不孕的檢查現(xiàn)已引起臨床的重視。

AsAb是機體產(chǎn)生的與精子表面抗原特異性結(jié)合的抗體，通過抑制精子穿透宮頸黏液，抑制精子獲能、頂體反應(yīng)及減少精子存活率而降低受孕能力，甚至可導(dǎo)致不育[3]。目前認(rèn)為AsAb是免疫性不孕不育的重要因素[4]，不孕不育患者AsAb陽性率明顯高于正常生育人群[5]。本研究檢測結(jié)果也顯示，不孕不育組AsAb陽性率為21.4%，明顯高于正常生育組的7.5%。

ACA是一種能夠與帶負(fù)電荷的磷脂相結(jié)合的自身免疫性抗體。研究表明，不明原因的流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)、宮內(nèi)發(fā)育遲緩、胎盤早剝、不孕癥等生殖功能障礙性疾病均與ACA有關(guān)[6-8]。目前國內(nèi)外研究一致認(rèn)為，ACA陽性率在妊娠丟失以及妊娠并發(fā)癥等高危妊娠人群中比正常妊娠人群不孕不育中高得多[9]。ACA可能通過以下幾個途徑損害受孕能力[10]：ACA與卵巢組織磷脂成分結(jié)合形成復(fù)合物，干擾卵子形成和排出；ACA結(jié)合精子的磷脂成分，使精子凝集，失去活動力，導(dǎo)致精子獲能和穿透入卵功能下降；ACA與子宮內(nèi)膜磷脂成分結(jié)合形成復(fù)合物，破壞受精卵著床； ACA作用于滋養(yǎng)細(xì)胞表面依賴性抗原，影響絨毛黏附、分化及細(xì)胞滋養(yǎng)層的浸潤，影響受精卵著床。本組ACA總陽性率為36.6%，高危組陽性率高于不孕不育組，為41.8%，兩組與正常生育組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），表明ACA的存在很可能是引起不孕不育，尤其是反復(fù)妊娠丟失的原因之一。

綜上所述，AsAb、ACA表達與不孕不育有密切關(guān)系，是導(dǎo)致不孕不育的重要免疫因素。檢測AsAb、ACA對不孕不育患者診斷具有重要參考價值。

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