馮宗剛 毛跟紅 許 敏

鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院生殖中心 鄭州 450014

精液白細(xì)胞對(duì)精子質(zhì)量及IVF受精率的影響

馮宗剛 毛跟紅 許 敏△

鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院生殖中心 鄭州 450014

目的探討精液中白細(xì)胞對(duì)精子質(zhì)量以及對(duì)常規(guī)體外受精率的影響。方法分析35例門診白細(xì)胞精子癥患者及對(duì)照組的精子密度、活力、前向運(yùn)動(dòng)精子比例及精子畸形率。分析28例常規(guī)體外受精(IVF)白細(xì)胞精子癥及其對(duì)照組的受精率。結(jié)果白細(xì)胞精子癥患者精子密度、活力、前向運(yùn)動(dòng)精子比例均低于對(duì)照組，精子畸形率高于對(duì)照組，IVF受精率低于對(duì)照組。結(jié)論精液白細(xì)胞是可能造成精子質(zhì)量下降，IVF受精率降低的原因之一，糾正白細(xì)胞精子癥對(duì)于治療男性不育，提高IVF受精率有重要意義。

白細(xì)胞精子癥;IVF受精率;男性不育

目前，不孕不育的發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)，其中男方因素約占40%［1］。女性生育力降低，男性精子質(zhì)量下降是其根本原因。泌尿生殖道感染，精索靜脈曲張，內(nèi)分泌、染色體等因素均可對(duì)男性生育能力造成嚴(yán)重的影響。WHO規(guī)定［2］，精液中白細(xì)胞數(shù)量＞1×106/mL即為白細(xì)胞精子癥。本研究通過對(duì)35例白細(xì)胞精子癥患者的精子質(zhì)量分析及28例白細(xì)胞精子癥IVF受精率的研究分析，旨在探討白細(xì)胞對(duì)男性精子質(zhì)量及IVF受精率的影響。

1 材料和方法

1.1 對(duì)象選取 選取2011－01—2012－01在我院生殖中心就診符合條件的患者133例，年齡20～45歲，平均(28.22±1.21)歲。其中35例為白細(xì)胞精子癥的門診患者(研究組)，以40例精液白細(xì)胞濃度正常患者作為對(duì)照組;另選28例在我中心行體外受精－胚胎移植(IVF－ET)助孕且為白細(xì)胞精子癥的患者(IVF研究組)，以30例白細(xì)胞濃度正?；颊咦鳛镮VF對(duì)照組。白細(xì)胞精子癥組所有患者精液白細(xì)胞濃度＞1×106/mL，正常組白細(xì)胞濃度＜1×106/mL。

所有男性患者均排除內(nèi)分泌、遺傳、理化、精索靜脈曲張等因素造成的精子質(zhì)量異常，其中IVF的女方均以輸卵管因素為指征，已排除年齡、內(nèi)分泌以及卵子等原因造成的不孕。

1.2 標(biāo)本采集 按照《WHO人類精液及處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)》(第5版)規(guī)定，取精前禁欲2～7 d，手淫取精，將全部精液收集于無菌干燥的容器中，25℃室溫液化。

1.3 精液分析、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及IVF受精率統(tǒng)計(jì) 用西班牙SCA計(jì)算機(jī)輔助精子質(zhì)量分析系統(tǒng)分析每例標(biāo)本精子密度、精子活動(dòng)率、前向運(yùn)動(dòng)精子比例(a級(jí)+b級(jí))等參數(shù)。Diff－Quick快速染色法計(jì)數(shù)精子畸形率;采用過氧化物酶染色法分析精液中白細(xì)胞濃度(所有試劑均來自深圳市博瑞德生物科技有限公司)。以IVF受精數(shù)與獲卵數(shù)的比值作為IVF受精率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件，進(jìn)行t檢驗(yàn)和x2檢驗(yàn)，均值以±s表示，P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 精液中白細(xì)胞對(duì)精子密度、活動(dòng)率、前向運(yùn)動(dòng)精子比例以及畸形率的影響 見表1。

表1 2組精液中白細(xì)胞對(duì)精子質(zhì)量的影響

由表1可知，與對(duì)照組相比，白細(xì)胞精子癥組患者的精子密度、活動(dòng)率、前向運(yùn)動(dòng)精子比例均有不同程度的降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);精子畸形率則明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 精液中白細(xì)胞對(duì)常規(guī)IVF受精率的影響 見表2。

表2 精液中白細(xì)胞對(duì)常規(guī)IVF受精率的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，白細(xì)胞精子癥組的常規(guī)IVF受精率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

男性不育的原因十分復(fù)雜，遺傳、內(nèi)分泌、生殖道感染、精索靜脈曲張、理化、環(huán)境等因素均可對(duì)精子質(zhì)量造成影響，但目前仍有許多不育原因不明。白細(xì)胞精子癥是男性生殖道感染的表現(xiàn)，其在男性不育中的發(fā)病率為10%～20%［3］。精液中白細(xì)胞多來自于前列腺或其他附屬性腺。白細(xì)胞對(duì)精子的影響是多途徑和機(jī)制的，活性氧(ROS)及炎性細(xì)胞因子是破壞精子膜結(jié)構(gòu)和介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的主要來源［4］。研究發(fā)現(xiàn)，精液白細(xì)胞特別是多形核白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞激活增加，可釋放比未激活白細(xì)胞多100倍的ROS［5］，白細(xì)胞吞噬過程中產(chǎn)生ROS，氧自由基可攻擊精子細(xì)胞膜，使精子膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化導(dǎo)致膜的通透性和蛋白結(jié)構(gòu)的改變，并對(duì)精子有毒性效應(yīng)［6］。炎性介質(zhì)γ－干擾素、TNF以及白介素家族的眾多成員均能通過多種途徑導(dǎo)致精子蛋白合成減少、成熟和功能障礙［7－8］，并且精液中大量白細(xì)胞還可以造成精子染色質(zhì)異常和DNA的損傷，造成ATP生成減少，精子活動(dòng)下降，畸形率增加［9－10］。本研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞精子癥組患者的精子密度、活率、前向運(yùn)動(dòng)精子比例均不同程度低于非白細(xì)胞精子癥組，而其畸形率高于非白細(xì)胞精子癥組，這與上述文獻(xiàn)結(jié)果相一致。

常規(guī)體外受精－胚胎移植(IVF－ET)是近年來新發(fā)展的一項(xiàng)輔助生殖技術(shù)，此技術(shù)的產(chǎn)生對(duì)于治療女性輸卵管因素造成的不孕具有革命性的意義。體外受精過程中，精子和卵子的質(zhì)量是影響IVF受精率的關(guān)鍵因素。目前，國(guó)內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)精液白細(xì)胞對(duì)IVF受精率影響的文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，本研究在排除女性內(nèi)分泌、遺傳等影響卵子質(zhì)量的因素后，通過比較白細(xì)胞精子癥與非白細(xì)胞精子癥的IVF受精率發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞精子癥組患者的受精率明顯低于非白細(xì)胞精子癥組，分析其原因，可能是白細(xì)胞產(chǎn)生的ROS及白細(xì)胞介素等炎癥介質(zhì)造成了對(duì)精子膜、頂體、DNA的損傷及其運(yùn)動(dòng)能力的下降，最終導(dǎo)致IVF受精率的降低。

近年來，男性生殖健康形勢(shì)十分嚴(yán)峻，白細(xì)胞精子癥是造成精子質(zhì)量下降、男性不育的因素之一，分析精液白細(xì)胞含量對(duì)于尋找男性不育病因，評(píng)估IVF受精率有重要意義，同時(shí)發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞精子癥感染，應(yīng)積極尋找病因并及時(shí)糾正。

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The effects of leukocytes in semen and sperm quality and in vitro fertilization(IVF)rates

Feng Zonggang，Mao Genhong，Xu Min，Department of Reproduction Center，the Second Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450014，China

ObjectiveTo investigate the effects of leukocytes in semen on sperm quality and in vitro fertilization rates.MethodsParameters including sperm quality of 35 leukospermia samples from outpatients and in vitro fertilization rates of 28 leukospermia samples from IVF assisted patients were tested and analysed with their control groups.ResultsCompared with control groups，leukospermia samples got lower sperm density，lower progressive motility and total motility percentages，higher teratozoospermia rates and lower IVF rates.ConclusionThe leucocyte in semen can lead sperm quality decline and low IVF rate，curing leukospermia contribute to curing male infer tility and raising IVF rate.

Leukospermia;In vitro fertilization rate;Male infertility

R698+.2

A

1007－8991(2012)04－0009－02

△通訊作者:主管技師，Tel:0371－63974617

(收稿 2012－02－11)