席文華， 李澤文，劉汝勝

(1、豐城市人民醫(yī)院，江西 豐城 331100；2、星子縣中醫(yī)院，江西 星子 332800；3、奉新縣人民醫(yī)院，江西 奉新330700)

高黏樣品影響全自動(dòng)生化分析儀加樣量

席文華1， 李澤文2，劉汝勝3

(1、豐城市人民醫(yī)院，江西 豐城 331100；2、星子縣中醫(yī)院，江西 星子 332800；3、奉新縣人民醫(yī)院，江西 奉新330700)

高黏樣品；影響；全自動(dòng)生化分析儀；加樣量

高黏度血清常見(jiàn)于血漿黏度增高型之高血黏滯綜合征[1]，如高脂血癥、原發(fā)性巨球蛋白血癥等。我們就高黏度血清對(duì)全自動(dòng)生化分析儀加樣量的影響進(jìn)行了試驗(yàn)，將溴甲酚綠分別溶于不同濃度的甘油作為不同黏度的樣品，測(cè)定KT6HB560全自動(dòng)生化分析儀非反應(yīng)試驗(yàn)的光密度，以探討高黏度樣品對(duì)全自動(dòng)生化分析儀加樣量的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 KT6HB560全自動(dòng)生化分析儀，H198103酸度計(jì)(上海精密儀器有限公司生產(chǎn))，上海精科723PC紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)。

1.1.2 試劑及測(cè)試液 生理鹽水，配制含溴甲酚綠均為0.6 mol/L的不同黏度的4組檢測(cè)樣品A、B、C、D，其含甘油分別為 0%、50%、80%、90%。

1.2 方法

1.2.1 對(duì)生化儀進(jìn)行常規(guī)保養(yǎng)維護(hù)，使儀器處于良好的狀態(tài)，每天用質(zhì)控品測(cè)定，結(jié)果在控。

1.2.2 0.6mol/L溴甲酚綠溶液用生理鹽水作30、60、120、240倍稀釋，用 H198103酸度計(jì)，測(cè)得各稀釋度溴甲酚綠溶液pH值為4.5～5.4之間。用723PC紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定各稀釋度溴甲酚綠溶液光密度(OD)，測(cè)得第1峰值為612 nm，第2峰值為405 nm，以此確立檢測(cè)波長(zhǎng)。

1.2.3 用A、B、C、D四組溴甲酚綠溶液作樣品，其含甘油分別為0%、50%、80%、90%，均測(cè)試3個(gè)加樣量：6、12、24μl，生理鹽水作試劑，加至 500μl，吸入量均為300μl，終點(diǎn)法10 min，主、副雙波長(zhǎng)全程測(cè)試。根據(jù)上述光密度測(cè)試結(jié)果及KT6HB560波長(zhǎng)設(shè)置，選擇主波長(zhǎng)600 nm、副波長(zhǎng)405 nm，光密度值為兩波長(zhǎng)光密度之差。重復(fù)測(cè)定10次，計(jì)算生化儀非反應(yīng)試驗(yàn)變異系數(shù)。用積差法計(jì)算相關(guān)系數(shù)。用SPSS軟件12.0進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 不同樣品黏度不同加樣量在KT6HB560非反應(yīng)測(cè)試OD值結(jié)果，見(jiàn)表1。

表1顯示，A組不含甘油，B組甘油含量低，兩組樣品黏度低；兩組各加樣量CV均較小，相同加樣量光密度均值接近，B組光密度均值稍大是甘油所致；兩組光密度均值與加樣量之間的直線關(guān)系呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r均為0.980，單側(cè)P<0.0005。C組甘油含量較高，樣品黏度較高，加樣量較少時(shí)(6μl)CV稍大，光密度均值為A組的94.9%；加樣量較多時(shí)(12、24μl)CV較小，但光密度均值分別為A組的72.2%、46.7%；光密度均值與加樣量之間呈較好的直線相關(guān)，r=0.9302，單側(cè)0.0250.25。

表1 各加樣量及樣品黏度的非反應(yīng)測(cè)試結(jié)果(n=10)

3 討論

液體流過(guò)水平圓管時(shí)的黏度遵循Poiseuillie公式[1]，即 Q=πr4△P/8ηL，則生化儀加樣量 V=Qt。從公式可以看出，生化儀加樣量與樣品黏度(η)成反比。表1的數(shù)據(jù)表明，當(dāng)樣品黏度增加到一定時(shí)，黏度相當(dāng)于80%的甘油時(shí)，其影響加樣量已顯現(xiàn)，加樣量已開(kāi)始減少；黏度相當(dāng)于90%的甘油時(shí)，加樣量明顯減少。且隨黏度的增加，影響越大。

我們?cè)诠ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)高脂血癥[2]，因其血清黏度增加而影響全自動(dòng)生化分析儀的吸樣量。該患者血清在使用KT6HB560檢測(cè)時(shí)，樣品探針吸取血清后，生化儀異常停機(jī)并報(bào)警，清洗探針與傳感器后，重復(fù)測(cè)定還是如此，這時(shí)探針黏有濃稠血清，就像血凝塊，經(jīng)查血清無(wú)凝固；試著將探針與傳感器間的距離加大后再測(cè)，儀器運(yùn)行好似正常，但測(cè)試結(jié)果很低，就像無(wú)反應(yīng)測(cè)試；再次清洗探針和傳感器，重做室內(nèi)質(zhì)控，結(jié)果在控，但該患者血清重測(cè)結(jié)果還是很低；最后該患者血清用生理鹽水稀釋成正常血清黏度后再測(cè)，儀器運(yùn)行順暢，測(cè)試反應(yīng)正常。該患者血清總蛋白高達(dá)120g/L，球蛋白高達(dá)82g/L；顯然上述異常是高黏度血清所引起。停機(jī)原因是高黏度血清黏在探針與傳感器之間致其隔開(kāi)而引起。將探針與傳感器間的距離加大后，它們之間不再黏上高黏度血清后儀器能運(yùn)行；但是，因高黏度血清，探針不能吸取血清致測(cè)不出結(jié)果。將患者血清稀釋成正常黏度血清后，探針就能正常吸取血清，測(cè)試結(jié)果正常[3]。

血液黏度的升高與諸多因素有關(guān)[1]，如紅細(xì)胞比積增高，紅細(xì)胞變形性降低，紅細(xì)胞聚集性增高，血漿蛋白增高，血脂增高等。血液黏度升高可能是上述某一原因的結(jié)果，也可能是幾種因素共同作用所致。血清成份較甘油復(fù)雜，其中的蛋白質(zhì)尤其是球蛋白的量和質(zhì)的改變對(duì)白清黏稠度的影響會(huì)更大。盡管黏稠血清對(duì)全自動(dòng)生化分析儀加樣的影響要比單純甘油復(fù)雜得多；但溴甲酚綠易溶于醇[4]，是常用的試劑且顏色穩(wěn)定；甘油具黏稠特性，能與水任意比例混合；甘油與血清均為牛頓液體。盡管測(cè)試時(shí)甘油也有光密度，但甘油為無(wú)色澄明黏稠液體[5]，其光密度可以忽略不計(jì)。故溴甲酚綠溶于甘油作為高黏度樣品代替黏稠血清在生化儀上作無(wú)反應(yīng)測(cè)定有可比性。其檢測(cè)結(jié)果亦能表明臨床常見(jiàn)高黏稠血清對(duì)全自動(dòng)生化分析儀加樣量的影響。

綜上所述，高黏度血清使全自動(dòng)生化分析儀加樣量減少，甚至嚴(yán)重減少，致測(cè)定結(jié)果明顯減低，應(yīng)引起足夠重視。在使用KT6HB560全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定高脂血癥樣品或其他高黏度樣品時(shí)，如出現(xiàn)測(cè)定結(jié)果不合理偏低，或生化儀異常停機(jī)并報(bào)警，應(yīng)清洗探針與傳感器，將患者血清稀釋成正常血清黏度時(shí)再檢測(cè)，就能測(cè)出真實(shí)結(jié)果。

[1]張 翼.實(shí)用血液流變學(xué)[M].廣西師范大學(xué)出版社，2009:16-18.

[2]張新生,郭小春,朱宇椿,等.高脂血癥與血液流變學(xué)相關(guān)性研究報(bào)告[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2008,26(3)：345.

[3]楊繼明.日立7180全自動(dòng)生化分析儀使用過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題分析與處理[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，29(6)：684.

[4]中國(guó)醫(yī)藥公司上?；瘜W(xué)試劑采購(gòu)供應(yīng)站編.試劑手冊(cè)[M].第3版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2011:216.

[5]國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典[M].北京.化學(xué)工業(yè)出版社，2010:72-76.

R446.11+2

B

1674-1129(2012)05-0500-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.05.035