余 紅, 薛文杰, 王小玲

(阜寧縣人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 阜寧224400)

乙型肝炎標志物少見模式隨訪分析

余 紅, 薛文杰, 王小玲

(阜寧縣人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 阜寧224400)

目的對乙型肝炎標志物(HBV-M)出現(xiàn)少見模式的患者進行隨訪動態(tài)觀察，以進一步提高對HBV-M的認識。方法用時間分辨免疫熒光分析(TRFIA)定量檢測21278例標本的HBV-M，將出現(xiàn)HBV-M少見模式的患者列入隨訪對象。乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗體(抗-HBs)、乙肝 e 抗原(HBeAg)、乙肝 e 抗體(抗-HBe)、乙肝核心抗體(抗-HBc)分別以 1、2、3、4、5來表示，并以其陽性項目的序號為該模式的代碼。結(jié)果21278例標本共檢出51例HBV-M少見模式。51例HBV-M少見模式為：①“1”：2 例，②“1、2”：4 例，③“3”：1 例，④“2、3”：4 例，⑤“1、2、3、5”：8 例，⑥“1、2、4、5”：29 例，⑦“2、3、5”：2 例，⑧“1、2、3、4、5”1例。結(jié)論乙型肝炎病毒感染者在不同病程可出現(xiàn)HBV-M不同模式的組合，有時只看到一張檢驗報告單很難做出合理的解釋，應(yīng)動態(tài)觀察HBV-M組合模式的變化。

乙型肝炎標志物；少見模式；時間分辨免疫熒光分析；隨訪分析

乙型肝炎病毒感染呈全世界流行，我國為乙型肝炎高發(fā)流行區(qū)。雖然現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)展了HBVDNA的檢測，但在臨床上乙型肝炎病毒免疫學(xué)指標的檢測仍然是診斷乙型肝炎病毒感染的常用方法，各項標志物在血清中出現(xiàn)組成了不同的模式。隨著檢測技術(shù)和檢測靈敏度的提高、病毒的變異、抗病毒藥物及乙型肝炎疫苗的廣泛使用，臨床上出現(xiàn)一些少見的且難以解釋的HBV-M模式。筆者收集了近年來的HBV-M檢測資料，進行統(tǒng)計，并對HBV-M少見模式的病人進行隨訪。以進一步認識HBV-M少見模式的臨床意義，有助于臨床的診斷和治療。

1 材料與方法

1 材料

1.1 標本來源 自2009年1月至2010年6月來我阜寧縣人民醫(yī)院就診的患者21278例，其中住院10546例，男性6142例，女性5404例,年齡 1～96歲。門診患者9732例，其中男性5024例，女性4708 例，年齡1～72歲。

1.2 試劑與儀器 HBV-M檢測采用時間分辨免疫熒光分析法，儀器購自上海新波生物技術(shù)有限公司，型號為EFFICUTA。試劑與標準液配套購自蘇州新波生物技術(shù)有限公司。

1.3 方法 對HBV-M少見模式的標本，于次日重新抽血進行復(fù)檢做雙孔，如仍為HBV-M少見模式，將其列入隨訪對象，囑其3～6個月內(nèi)來復(fù)檢HBV-M。所有操作均按儀器和試劑說明書規(guī)范操作。

2 結(jié)果

21278 例標本出現(xiàn)8種HBV-M少見模式，共52例，經(jīng)次日復(fù)查后仍為HBV-M少見模式的有51例。 51例 HBV-M 少見模式為：①“1”：2例，②“1、2”：4 例，③“3”：1 例，④“2、3”：4 例，⑤“1、2、3、5”：8 例，⑥“1、2、4、5”：29 例，⑦“2、3、5”：2 例，⑧“1、2、3、4、5”1 例。 實際隨訪到的只有 27 例患者。

僅 “1”陽性 1 例隨訪檢測結(jié)果為“1、3、5”陽性。 “1、2”陽性 3 例隨訪檢測結(jié)果為：2 例“2、4、5”陽性，1 例“2、5”陽性。 “2、3”陽性 1 例隨訪檢測結(jié)果為：“2、4、5”陽性。 “1、2、3、5”陽性 6 例隨訪檢測結(jié)果為：3 例“2、4、5”陽性。1 例“2、5”陽性，1 例“1、3、5”陽性，1 例仍為“1、2、3、5”陽性，只是“1、3”的含量呈下降趨勢，“2、5”含量呈上升趨勢。 “1、2、4、5”陽性 15 例隨訪結(jié)果為：8 例“2、4、5”陽性，6 例“2、5”陽性，1 例“1、4、5”陽性。 “2、3、5”陽性 1 例隨訪結(jié)果為“2、4、5”。

3 討論

HBV-M檢測均采用TRFIA進行檢測分析。TRFIA技術(shù)采用三價稀土銪離子作為示蹤物，用時間分辨熒光分析儀測定產(chǎn)物中的熒光強度，以此來定量檢測被測物質(zhì)的濃度。此方法具有靈敏度高，特異性強，穩(wěn)定性好，且測定范圍寬等優(yōu)點。筆者檢測21278例標本，共出現(xiàn)HBV-M少見模式52例，經(jīng)重新抽血復(fù)查只有1例兩次結(jié)果不一致，這位患者第一天結(jié)果為“1、2、4、5”其中抗-HBs 為15.5MIU/ml,第二天結(jié)果為“1、4、5”其中抗-HBs為9.2 MIU/ml，其他幾項結(jié)果基本一致。HBV-M少見模式構(gòu)成比0.2%(51/21278)。

對于1例單獨HBsAg陽性，后隨訪結(jié)果為“1、3、5”陽性，認為此患者初次檢測時可能為HBV感染早期，HBeAg的濃度還達不到檢測的靈敏度，另外機體應(yīng)答還不完善，或此時正處在窗口期。1例單獨HBeAg陽性，由于沒有隨訪到患者的結(jié)果，無法給出合理的解釋。但有很多文獻報道確實檢測出單獨 HBeAg 陽性[1]。 對于 HBV-M“1、2”、“1、2、3、5”、“1、2、4、5”、“1、2、3、4、5”這種 HBsAg 與抗HBs共存的現(xiàn)象，有觀點認為是不同的HBV亞型感染，即某一血清型亞型感染后誘導(dǎo)產(chǎn)生了該型的特異抗體，隨后患者又感染了另一亞型，原先產(chǎn)生的抗HBs不能中和新感染的不同亞型HBV。故血清中同時出現(xiàn)HBsAg與抗HBs共存[2，3]。還有觀點認為HBV基因發(fā)生了變異，“a”決定族是與抗HBs結(jié)合的關(guān)鍵性位點，此處個別氨基酸的變異足以改變其抗原性和免疫應(yīng)答，導(dǎo)致HBsAg與抗HBs共存[4]。筆者隨訪24例HBsAg與抗HBs共存的患者有 22 例轉(zhuǎn)變“2、4、5”、“2、5”模式，這基本可以說明有些抗原與抗體共存時只是暫時的狀態(tài)，它可以隨著藥物治療，機體免疫等因素而發(fā)生不同模式的轉(zhuǎn)換。

HBV感染患者后絕大多數(shù)感染者會出現(xiàn)HB-sAg陽性，通常認為HBeAg只存在于HBsAg陽性的血清中，但檢測出“3”、“2、3”、“2、3、5”陽性的共7例。有研究認為，HBsAg陰性而HBeAg陽性模式與HBV S基因區(qū)變異有關(guān)。HBV-DNA在編碼“a”決定族的基因前區(qū)，相當(dāng)于S基因編碼122-124a.a之間出現(xiàn)插入變異，可發(fā)生HBsAg陰性的HBV變異株感染[5]。還有研究認為：患者HBV感染后產(chǎn)生抗HBs除與HBsAg形成免疫復(fù)合物仍有過剩，故HBsAg檢測不出[6]。筆者隨訪到2例患者，幾個月后均轉(zhuǎn)換成“2、4、5”陽性。

在檢測出51例標本中，檢測出HBV-M少見模式主要以“1、2、3、5”“1、2、4、5 模式為主，其構(gòu)成比為72.5%(37/51)。這兩種模式共隨訪到21例患者，這些患者大多轉(zhuǎn)歸為“2、4、5”或“2、5”陽性模式。 他們大多可能是“1、4、5”或“1、3、5”向“2、4、5”或“2、5”模式轉(zhuǎn)換的中間轉(zhuǎn)換模式。對于1例“1、2、3、4、5”全陽性的患者由于沒有隨訪資料，很難做出解釋。 從文獻中看出“1、2、3、4、5”有向“1、2、5”轉(zhuǎn)變的趨勢[7]。

總之當(dāng)患者感染HBV后，由于HBV在體內(nèi)感染的階段不同和在每個個體之間復(fù)制的強弱不同，機體對病毒產(chǎn)生免疫反應(yīng)的差異以及HBV可能發(fā)生的基因變異等原因，使得感染者血清中出現(xiàn)一些HBV-M的少見模式。這些模式多數(shù)不是一種較穩(wěn)定狀態(tài)，而是處于常見模式轉(zhuǎn)換中的暫時表現(xiàn)，通過本組病例隨訪證實這一點。由于本次實驗出現(xiàn)的HBV-M少見模式的例數(shù)有限，隨訪到的患者更有限，而且只做了一次隨訪，沒有得出更多的數(shù)據(jù)。這次試驗的目的旨在提醒廣大醫(yī)務(wù)工作者，在分析HBV-M檢驗報告時，遇到那些HBV-M少見模式時，別輕易妄下結(jié)論，應(yīng)結(jié)合臨床資料，必要時再結(jié)合血清HBV-DNA及肝組織學(xué)免疫組化等結(jié)果，并動態(tài)觀察HBV-M模式的轉(zhuǎn)換，以期給患者正確的解釋，及時準確地進行診斷治療。

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R512.6+3,R446.62

B

1674-1129(2012)05-0470-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.05.019