鐘正賢， 張 穎， 盧文杰， 牙啟康

(廣西中醫(yī)藥研究院， 廣西 南寧 530022)

多葉越南槐(SophoratonkinensisGagnep.var.polyphylla S.)為豆科槐屬植物，與山豆根(越南槐)Sophoratonkinensis是同科同屬同種的根，是越南槐的一個(gè)變種。生長(zhǎng)于石山區(qū)，分布于廣西、廣東、云南、貴州和江西等省[1]，在廣西主要分布于紅水河流域，如都安、馬山、忻城、武鳴等地[2]。其性寒，味苦，具有清熱解毒、消腫利咽之功效，常用于火毒蘊(yùn)結(jié)，咽喉腫痛，齒齦腫痛等疾患的治療。市場(chǎng)上山豆根日益面臨枯竭的現(xiàn)狀，因其與山豆根性狀和藥效相似，廣西民間把多葉越南槐當(dāng)作山豆根藥材來(lái)使用，《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》1990版也將多葉越南槐作為山豆根藥材的植物來(lái)源之一收載。為探索多葉越南槐藥材能否作為山豆根的代用品，為資源利用和臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。且多葉越南槐藥理基礎(chǔ)研究又未見(jiàn)報(bào)道，因此，筆者對(duì)多葉越南槐和山豆根進(jìn)行了藥理作用對(duì)比研究，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥物及試劑 多葉越南槐醇提物(4.25 g生藥/g膏)；山豆根醇提物(4.14 g生藥/g膏)，由廣西中醫(yī)藥研究院中藥化學(xué)研究所提供。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水研磨配制成藥液備用。阿司匹林腸溶片為武漢遠(yuǎn)大制藥集團(tuán)股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：081101。聯(lián)苯雙酯，為浙江萬(wàn)邦藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：100717。人參蜂王漿，為北京市東風(fēng)保健營(yíng)養(yǎng)品有限公司，批號(hào)：201011806。乳酸，為南京建成生物研究所產(chǎn)品，批號(hào)：20101229。尿素氮，為長(zhǎng)春匯力生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：201010。血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)試劑盒，均為長(zhǎng)春匯力生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)為2010021和2010048。

1.2 動(dòng)物 昆明種小鼠，體重18～22 g，部分12～14 g，雌雄各半。由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，清潔級(jí)，許可證號(hào)：SCXK桂2003—0003。小鼠分性別飼養(yǎng)于空調(diào)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，室溫：(22±2)℃，相對(duì)濕度：(60±2)%，喂顆粒標(biāo)準(zhǔn)飼料，自由飲水和攝食。

1.3 儀器 722型光柵分光光度計(jì)，上海分析儀器三廠產(chǎn)品。FA1004-型萬(wàn)分之一電子天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 對(duì)巴豆油所致小鼠耳廓腫脹的抑制作用[3]取小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，山豆根高、低劑量(3.6、1.8 g /kg)組，多葉越南槐高、低劑量(3.6、1.8 g/kg)組和陽(yáng)性藥阿斯匹林(0.2 g/kg)組，每組10只。用藥各組均灌胃給藥，空白對(duì)照組給予等量的蒸餾水，每天1次，連續(xù)7 d。于末次給藥30 min后，用微量注射器取0.05 mL 2%巴豆油溶液涂于小鼠右耳，待4 h后處死小鼠。立即用口徑為8 mm的打孔器，沿著小鼠左右耳廓相同部位打孔取材，然后在電子天平上分別稱重，以兩耳片重量(mg)的差值作為腫脹程度指標(biāo)，并求出百分抑制率(%)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 多葉越南槐和山豆根對(duì)巴豆油引起小鼠耳廓腫脹的影響 ±s ，n=10)

結(jié)果表明，與空白對(duì)照組比較，多葉越南槐和山豆根高、低劑量組及阿司匹林組均明顯降低小鼠耳廓腫脹度，提示多葉越南槐和山豆根均具有明顯的抗炎作用。相比較，多葉越南槐抗炎作用比山豆根稍強(qiáng)，但差異無(wú)顯著性意義。

2.2 對(duì)醋酸所致小鼠扭體次數(shù)的影響[3]分組及給藥同2.1。于末次給藥后1 h，每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只，立即觀察并記錄20 min內(nèi)各小鼠的扭體次數(shù)。比較給藥組與對(duì)照組之間的差異，評(píng)價(jià)受試藥物的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 多葉越南槐和山豆根對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響 ±s ，n=10)

結(jié)果表明，與空白對(duì)照組比較，多葉越南槐和山豆根高、低劑量組及阿司匹林組均明顯減少小鼠扭體次數(shù)，提示多葉越南槐和山豆根均具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，且2者作用強(qiáng)度相當(dāng)。

2.3 對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響[3]分組及給藥同2.1。末次給藥1 h后，用內(nèi)徑為1 mm的玻璃毛細(xì)管插入小鼠眥球后靜脈叢取血，至毛細(xì)玻璃管血柱達(dá)5 cm為止，每隔30 s 折斷毛細(xì)玻璃管一小段，同時(shí)用肉眼觀察血柱是否移動(dòng)，仔細(xì)檢查有無(wú)凝血絲出現(xiàn)，計(jì)算從毛細(xì)管采血到凝血絲出現(xiàn)的時(shí)間，進(jìn)行組間比較。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 多葉越南槐和山豆根對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響 ±s ，n=10)

結(jié)果表明，與空白對(duì)照組比較，多葉越南槐高劑量組及山豆根高、低劑量組均明顯延長(zhǎng)小鼠凝血時(shí)間。提示多葉越南槐和山豆根均具有一定的抗凝血作用，且2者作用相當(dāng)。

2.4 對(duì)四氯化碳(CCL4)所致肝損傷模型的影響[4]取小鼠70只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，模型組，聯(lián)苯雙酯(0.2 g/kg)組，山豆根高、低劑量(3.6、1.8 g/kg)組，多葉越南槐高、低劑量(3.6、1.8 g/kg)組，每組10只。給藥各組灌胃給藥，空白對(duì)照組給予同體積蒸餾水。動(dòng)物每天灌胃給藥1次，連續(xù)用藥7 d。末次給藥1 h后除正常對(duì)照組外，各組小鼠腹腔注射1%四氯化碳(CCL4)花生油溶液10 mL/kg(體重)。16 h后從小鼠眼眶靜脈叢取血，分離血清。然后取血清按臨床試劑盒方法，測(cè)定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 多葉越南槐和山豆根對(duì)CCL4引起急性肝損傷小鼠

結(jié)果表明，多葉越南槐和山豆根高、低劑量組對(duì)CCL4引起急性肝損傷小鼠血清ALT、AST活性升高有明顯抑制作用。提示多葉越南槐和山豆根均具有一定的保肝降酶作用，且作用強(qiáng)度相當(dāng)。

2.5 對(duì)幼年小鼠免疫器官重量的影響[5]取12～14 g幼年小鼠60只，雌雄各半。隨機(jī)分為空白對(duì)照組，陽(yáng)性藥人參蜂王漿(10 mL/kg)組，多葉越南槐高、低劑量(3.6、1.8 g/kg)組，山豆根高、低劑量(3.6、1.8 g/kg)組，每組10只。用藥各組分別每日灌胃給藥1次，連續(xù)10 d。于末次給藥后24 h，拉頸椎處死，稱體重，摘出胸腺及脾臟稱重，以胸腺或脾臟重量(mg)與體重(g)之比作為胸腺或脾臟指數(shù)。結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 多葉越南槐對(duì)小鼠免疫器官重量影響 ±s ,n=10)

結(jié)果表明，與空白對(duì)照組比較，陽(yáng)性藥人參蜂王漿，多葉越南槐和山豆根高、低劑量組均能增加小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，提示多葉越南槐和山豆根具有一定細(xì)胞免疫增強(qiáng)作用。且2者作用相當(dāng)。

2.6 對(duì)小鼠抗疲勞能力的影響[5]取小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，山豆根高、低劑量(3.6、1.8 g/kg)組，多葉越南槐高、低劑量(3.6、1.8 g/kg)組和陽(yáng)性藥人參蜂王漿(10 mL/kg)組，每組10只。分別每日灌胃給藥1次，連續(xù)10 d。末次給藥后1 h，給小鼠負(fù)重(約體重的10%保險(xiǎn)絲)，放入水溫30 ℃左右的水槽中游泳，并記錄小鼠開(kāi)始游泳至體力耗盡沉入水面下8 s不能浮出水面為止的時(shí)間，為體力耗竭時(shí)間。并在耗竭游泳實(shí)驗(yàn)后的各組小鼠立即從水中取出，讓小鼠休息30 min后，摘除眼球取血，按臨床試劑盒方法測(cè)定血液中乳酸(BLA)和尿素氮(BUN)的含量。結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 多葉越南槐和山豆根對(duì)小鼠抗疲勞能力的影響 ±s ,n=10)

結(jié)果表明，與空白對(duì)照組比較，多葉越南槐和山豆根高、低劑量組和陽(yáng)性藥人參蜂王漿組均能延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間，高劑量組明顯降低血中乳酸及尿素氮含量。提示多葉越南槐和山豆根具有一定的抗疲勞作用。相比較，兩者抗疲勞作用強(qiáng)度差異不大。

3 小結(jié)與討論

目前對(duì)越南槐的研究和利用主要集中在山豆根上，其它種類少有報(bào)道。加大對(duì)其它越南槐種類的研究，尋找新的藥源或發(fā)現(xiàn)新的有效成分，將會(huì)使越南槐的利用和開(kāi)發(fā)前景更加廣闊。根據(jù)越南槐的臨床功用及藥理作用研究報(bào)道，筆者對(duì)多葉越南槐和山豆根設(shè)計(jì)了抗凝、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗肝損、抗疲勞等藥理實(shí)驗(yàn)比較。結(jié)果表明，多葉越南槐和山豆根均能減輕小鼠耳廓腫脹；減少小鼠扭體次數(shù)；降低肝損傷小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶活性；延長(zhǎng)凝血時(shí)間；并延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間，具有一定的抗凝、抗炎、鎮(zhèn)痛、降轉(zhuǎn)氨酶和抗疲勞等藥理作用。相比較，多葉越南槐和山豆根的藥理作用強(qiáng)度差異不大。推測(cè)這些藥理作用可能與該植物共同所含的黃酮類、酚類、生物堿等化學(xué)物質(zhì)有關(guān)，本研究結(jié)果為擴(kuò)大多葉越南槐的科學(xué)應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，對(duì)于其他方面的藥理作用仍待進(jìn)一步研究。

[1]謝宗萬(wàn).中藥材品種論述[M].2版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1990：142～144.

[2]覃海寧，劉演.廣西植物名錄[M].北京：科學(xué)出版社，2010：209.

[3]鐘正賢，李燕婧，張穎，等.黑草水提物的藥理作用研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志，2010，31(10)：50.

[4]鐘正賢，李燕婧，陳學(xué)芬，等.相思子堿的藥理作用研究[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，15(1)：8.

[5]謝瑩，陳全斌，羅達(dá)偉，等.高純度甜茶苷抗疲勞及免疫調(diào)節(jié)功能研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21(6)：1412.