王小杰，焦海濤，宋鶯春，牛嗣云

(1.承德醫(yī)學院，河北承德 067000;2.承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院麻醉科;3.河北大學)

衰老是一種正常而復雜的生物學過程，英國學者Harman于1956年在分子生物學的基礎上提出了衰老的自由基學說。人體內存在清除自由基的防御系統(tǒng)，包括超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px）及維生素、氨基酸、金屬蛋白等。隨著年齡的增長，機體抗氧化防御物質合成和活性下降，清除自由基能力降低，導致自由基代謝產(chǎn)物丙二醛(MDA）等大量堆積，加速機體的衰老[1-2]。當前，傳統(tǒng)中藥已經(jīng)成為抗衰老研究領域的熱點。本研究對補腎中藥何首烏飲的抗衰老作用進行了初步研究，觀察了何首烏飲對亞急性衰老大鼠血清MDA含量，GSH-Px和SOD活性以及總抗氧化能力(T-AOC）的影響。

1 材料與方法

1.1 試劑 D-半乳糖，北京化學試劑公司，用生理鹽水配成6%的溶液;SOD、MDA、GSH-Px、T-AOC試劑盒，南京建成生物工程研究所。何首烏飲由何首烏、懷牛膝、肉從蓉、淫羊藿、丹參、茯苓組成，熬制后含生藥4.8g/ml,按0.06ml/kg灌胃給藥。

1.2 實驗動物分組及衰老動物模型的建立 清潔級8周齡雄性SD大鼠30只,體重180-220g(由河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供）。隨機分為正常組、模型組、何首烏飲預防組(預防飲組），每組10只大鼠。模型組、預防飲組大鼠連續(xù)腹腔注射D-半乳糖(300mg/kg/d，60d）建立亞急性衰老的動物模型，正常組大鼠腹腔注射同等劑量的生理鹽水。預防飲組大鼠在腹腔注射D-半乳糖的同時，灌胃何首烏飲，每天2次，連續(xù)60d;正常組、模型組大鼠灌胃等量生理鹽水，每天1次，時間同預防飲組。

1.3 取材及檢測 各組大鼠用藥結束后4%水合氯醛腹腔注射麻醉，經(jīng)內眥取血,離心取上清，采用TBA法檢測MDA含量，比色法檢測GSH-Px活性，黃嘌呤氧化酶法檢測SOD活性，鐵還原法檢測T-AOC。

2 結果

與正常組比較，模型組大鼠MDA含量明顯升高，GSHPx活性、SOD活性、T-AOC明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01，P＜0.05）;何首烏飲可預防性抑制衰老大鼠MDA含量的升高，GSH-Px活性、SOD活性、T-AOC的降低，預防飲組與模型組比較差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01）。見附表。

附表 大鼠各指標檢測結果(±s，n=10）

附表 大鼠各指標檢測結果(±s，n=10）

與模型組比較:*P＜0.01，**P＜0.05

組別 MDA(nmol/ml pr） GSH-Px(U/ml)SOD(U/ml)T-AOC(U/ml)正常組 2.21±0.83* 1862.7±717.5** 191.77±15.04** 12.35±3.04*模型組 4.57±1.20 1301.8±452.4 156.48±13.58 4.51±2.71預防飲組 2.43±0.83* 2386.0±543.5* 216.35±29.79* 9.15±2.31*

3 討論

MDA是機體在衰老過程中產(chǎn)生的過量超氧陰離子自由基與脂質發(fā)生過氧化反應的終產(chǎn)物[3]。有報道表明，MDA的含量可代表脂質過氧化產(chǎn)物的濃度,間接反映組織的損傷程度[4]。GSH-Px是機體內廣泛存在的一種重要的過氧化物分解酶，它的主要生理功能是催化谷胱甘肽(GSH）參與過氧化反應，清除細胞在呼吸代謝過程中產(chǎn)生的過氧化物和羥自由基，從而減輕不飽和脂肪酸的過氧化作用。研究發(fā)現(xiàn)，當生物體的年齡增加到一定程度時,機體氧化還原平衡逐漸被打破,過氧化產(chǎn)物不斷積累、抗氧化物質的含量明顯下降,導致機體衰老。因此，GSH-Px活性變化與機體的衰老密切相關[5]。SOD可消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的自由基等有害物質，對機體的氧化與抗氧化平衡起著重要作用,是機體抗自由基損傷的重要防御因素[6]。大量研究表明,SOD活性隨增齡下降[7]。T-AOC代表體內酶性和非酶性抗氧化物的總體水平，血清T-AOC是一個可全面反映機體抗氧化能力的指標。

何首烏飲由何首烏、肉蓯蓉、懷牛膝、淫羊藿、丹參、茯苓組成，能填精補髓、烏發(fā)延年，補腎壯陽強筋骨、活血化淤通心脈、健脾利濕寧心神。本研究發(fā)現(xiàn)，D-半乳糖致模型模型大鼠血清MDA含量明顯升高，SOD活性、GSH-Px活性、T-AOC明顯降低，說明衰老大鼠抗氧化能力明顯降低，機體因此不能及時、有效地清除代謝過程中產(chǎn)生的自由基等有毒物質。另外，本研究發(fā)現(xiàn)，預防性何首烏飲灌胃可明顯抑制衰老大鼠血清MDA含量的升高，SOD活性、GSH-Px活性、T-AOC的降低;表明何首烏飲可通過抑制衰老大鼠抗氧化能力的下降，預防自由基等有毒物質對機體的損害，因此具有一定延緩衰老的作用。

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