聶忠莉,王曉玲,李長生,唐雪楓,陳小寧

(1.成都大學生物產(chǎn)業(yè)學院,四川成都 610106;2.成都欣捷高新技術(shù)開發(fā)有限公司,四川成都 610041)

0 引 言

阿戈美拉汀(Agomelatine),化學名為N-[2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基]乙酰胺,是褪黑激素激動劑,兼有拮抗5HT2c受體作用,它是第一種褪黑激素類抗抑郁藥,能有效治療抑郁癥,改善睡眠參數(shù)和保持性等功能[1-2].阿戈美拉汀為白色或類白色結(jié)晶性粉末,幾乎不具吸濕性,它在甲醇中易溶,在乙醇、乙酸乙酯中溶解,在水中幾乎不溶,在熱水中極微溶解.我們在研制本藥過程中,無法從法定機構(gòu)購買獲得阿戈美拉汀對照品(USP[3]和 EP[4]均未銷售阿戈美拉汀對照品),故本研究將阿戈美拉汀精制作為工作對照品,并用經(jīng)典的非水電位滴定法對其標定,建立了阿戈美拉汀工作對照品含量測定的方法,利用本方法測定的含量結(jié)果與采用紫外檢測(HPLC-UV)、二極管陣列檢測(HPLC-DAD)及蒸發(fā)光檢測(HPLCELSD)方法測定的含量結(jié)果進行比對,結(jié)果一致.

1 儀器與方法

1.1 儀器與試藥

實驗所用儀器包括:PHS-3C型精密PH計(指示電極231-01型玻璃電極,參比電極為212-01型飽和甘汞電極,上海精密科學儀器有限公司);10 mL滴定管(精度為0.05 mL).Agilent 1100 G1311A泵G1314A檢測器;Waters996(DAD)Waters 600 Pump; Alltech elsd 2000 es;METT LER TOLEDO XS105電子天平(d=0.01 mg).

實驗所用試藥包括:阿戈美拉汀工作對照品(批號為100101、100201、100202、100203、100401、100402、100403,均由成都新恒創(chuàng)藥業(yè)有限公司提供);甲醇、乙腈為色譜純,氯仿、高氯酸、磷酸氫二鈉、磷酸、三氟醋酸為分析純,水為超純水.

1.2 試劑配制與標定

1.2.1 0.1 mol/L高氯酸滴定液配制[5].

取無水冰醋酸(按含水量計算,每1 g水加醋酐5.22 mL)750 mL,加入高氯酸(70%～72%)8.5 mL,搖勻,在室溫下緩緩滴加醋酐23 mL,邊加邊搖,加完后再振搖均勻,放冷,加無水冰醋酸適量至1 000 mL,搖勻,放置24 h,備用.

1.2.2 高氯酸滴定液標定[5].

取在105℃干燥至恒重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.16 g,精密稱定,加無水冰醋酸20 mL溶解,加結(jié)晶指示液1滴,用“1.2.1”項下配制的高氯酸滴定液緩緩滴定至藍色,并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正.每1 mL高氯酸滴定液(0.1 mol/L)相當于20.42 mg的鄰苯二甲酸氫鉀.根據(jù)本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量,計算出本液的濃度.

1.3 實驗方法

取阿戈美拉汀0.18 g,精密稱定,加氯仿30 mL溶解,再加入醋酐5 mL攪拌均勻,用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定,電位指示,以高氯酸滴定液消耗體積V-電位指示E的一階導數(shù)(△E/△V-V)曲線判斷終點,并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正[6].每1 mL高氯酸滴定液(0.1 mol/L)相當于 24.33 mg的C15H17NO2.

2 結(jié)果與討論

2.1 滴定劑及溶劑體系選擇

阿戈美拉汀為酰胺類化合物,在溶液中呈極微弱的堿性,是疏水性很強的弱極性化合物.在冰醋酸、醋酐、冰醋酸—醋酐、冰醋酸—苯、冰醋酸—氯仿[7]作溶劑時用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定均未獲得明顯的電位突躍;在氯仿—醋酐溶劑中,用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定時,當氯仿—醋酐(6∶1)做溶劑時獲得明顯的電位突躍.

2.2 滴定終點確定

采用指示劑和電位法聯(lián)合確定滴定終點,發(fā)現(xiàn)終點電位突躍時顏色變化(由藍色變?yōu)樗{綠色)不明顯,且不敏銳.因此,選擇電位法確定滴定終點.以高氯酸滴定液消耗體積 V-電位指示 E的一階導數(shù)(△E/△V-V)曲線判斷終點,并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正.

2.3 精密度(回收率)試驗

精密稱取阿戈美拉汀工作對照品(批號100101) 9份樣品,連續(xù)測定9次,測定結(jié)果的平均值為99.8%,相對標準偏差(RSD)為0.1%.試驗結(jié)果表明,采用本方法所得結(jié)果重現(xiàn)性好,精度高,符合含量測定的質(zhì)量控制要求.精密度(回收率)試驗見表1.

表1 精密度(回收率)試驗結(jié)果

2.4 線性試驗

分別精密稱取阿戈美拉汀工作對照品(批號, 100101)6份樣品,按“1.3”項下實驗方法進行測定.以各樣品稱樣量和相對應(yīng)消耗的高氯酸滴定液做相關(guān)線性方程及線性回歸.實驗結(jié)果顯示,線性方程為:Y=0.0391x+0.0276,相關(guān)系數(shù)r為1.0000,線性關(guān)系良好.線性試驗結(jié)果見表2和圖1.

表2 線性試驗結(jié)果

圖1 含量測定線性曲線

2.5 樣品分析

分別對7批阿戈美拉汀工作對照品采用非水電位滴定法進行含量測定,測定結(jié)果如表3所示.

表3 非水電位滴定法含量測定結(jié)果

2.6 不同分析方法結(jié)果比較

本研究采用了非水電位滴定法與二極管陣列檢測(HPLC-DAD)、紫外檢測(HPLC-UC)及蒸發(fā)光檢測(HPLC-ELSD)相結(jié)合的方法來定量阿戈美拉汀工作對照品的含量,其含量測定結(jié)果一致.試驗結(jié)果見表4和表5.

表4 不同分析方法結(jié)果比較

表5 不同分析方法結(jié)果比較

3 結(jié) 論

本研究認為,采用非水電位滴定法可測定阿戈美拉汀工作對照品的含量,該方法簡便快速,準確性高,相對標準偏差(RSD)為0.1%,完全符合工作對照品含量測定的質(zhì)量控制技術(shù)要求.

[1]景新.阿戈美拉汀對抑郁癥有振奮精神的優(yōu)點[J].國外藥訊,2006(5):20.

[2]劉英鑫.Servier公司新的抗抑郁劑[J].國外藥訊,2002 (11):16-17.

[3]美國藥典委員會.美國藥典(USP)[EB/OL].http://www. usp.org/U.S.Pharmacopeia/National Formulary.

[4]歐盟藥典委員會.歐洲藥典6.0[S].斯特拉斯堡:歐洲藥品質(zhì)量管理局,2008.

[5]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學工業(yè)出版社,2010.

[6]中國藥品生物制品檢定所.中國藥品檢驗標準操作規(guī)范[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.

[7]馬廣慈.藥物分析方法與應(yīng)用[M].北京:科學出版社, 2000.