董 磊，吉品健，劉 娟，馬紅雨△，馮 戟，全首禎，朱美財(cái)

(1.中國(guó)人民解放軍空軍總醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心,北京 100142；2.大連醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院，遼寧大連 116044；3.中國(guó)人民解放軍空軍總醫(yī)院輸血科,北京 100142)

造血干細(xì)胞移植(hematopoietic stem cell transplant,HSCT)可以治療多種血液病、實(shí)體腫瘤、免疫缺陷病和重度急性放射病，而在移植后對(duì)造血功能恢復(fù)的監(jiān)測(cè)有利于病情的觀察及制訂治療方案，是判定移植成功與否的重要依據(jù)。

傳統(tǒng)監(jiān)測(cè)造血功能恢復(fù)的方法主要是外周血細(xì)胞的計(jì)數(shù)，如中性粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)(absolute neutrophil count,ANC)、PLT等，但受外界因素的影響較大。隨著流式細(xì)胞技術(shù)和熒光技術(shù)的發(fā)展，新型的血細(xì)胞分析儀可將網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte,RET)分成低熒光強(qiáng)度 RET(LFR)、中熒光強(qiáng)度RET(MFR)和高熒光強(qiáng)度RET(HFR)，未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞分?jǐn)?shù)(immature reticulocyte fraction，IRF)為MFR和HFR之和，表示幼稚細(xì)胞占總RET的百分比[1-2]。研究表明，重度骨髓抑制后造血功能恢復(fù)開始于紅細(xì)胞系統(tǒng)，紅細(xì)胞植入早于粒系系統(tǒng)的重建，IRF是造血系統(tǒng)抑制后造血系統(tǒng)恢復(fù)的較敏感指標(biāo)[3-5]。為探討IRF在HSCT中造血功能恢復(fù)的臨床意義，本研究使用Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀對(duì)空軍總醫(yī)院30例白血病患者HSCT后的IRF進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 空軍總醫(yī)院30例白血病HSCT患者，男21例，女9例；年齡3～48歲，中位24.5歲。其中，急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)10例，急性髓細(xì)胞白血病(AML)中M1、M4a、M4b、M5各1例，慢性粒細(xì)胞白血病(CML)3例，再生障礙性貧血(AA)7例，紅白血病2例，急性粒單核細(xì)胞白血病(M4)1例，急性單核細(xì)胞白血病(M5)1例，骨髓增生異常綜合征(MDS)1例，繼發(fā)性骨髓纖維化(SMF)1例。

1.2方法

1.2.1檢測(cè)方法 采用希森美康Sysmex XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、配套試劑及全血質(zhì)控物?；颊邚囊浦睬? d至監(jiān)測(cè)結(jié)束每天抽取靜脈血2 mL注入真空抗凝管(EDTA-K2)混勻，嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程對(duì)標(biāo)本進(jìn)行WBC、PLT、ANC、RET%及IRF等檢測(cè)，標(biāo)本檢測(cè)在1 h內(nèi)完成。

1.2.2造血功能恢復(fù)的指標(biāo)[6-7]從患者接受移植術(shù)開始，依據(jù)WBC>3.0×109/L、PLT>50×1012/L、ANC>0.5×109/L、RET%>0.5%、IRF>0.2分別作為造血功能恢復(fù)的指標(biāo)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，WBC、ANC、PLT、RET%及IRF兩兩比較用兩組獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

30例患者HSCT后WBC、PLT、ANC、RET%及IRF的恢復(fù)情況見表1。患者移植后WBC、PLT、ANC、RET%及IRF處于低值，其中ANC和IRF最低為0，隨著患者造血功能的逐步恢復(fù)，IRF在移植后16.5(7～24)d達(dá)到0.2，ANC于18.5(10～27)d達(dá)到0.5×109/L，RET%在19.0(11～30)d達(dá)到0.5%，WBC在21.0(12～30)d達(dá)到3.0×109/L，PLT在26.0(13～37)d達(dá)到50×1012/L。IRF達(dá)到恢復(fù)指標(biāo)天數(shù)短于WBC、PLT、ANC及RET%(P<0.05)，ANC及RET%達(dá)到造血功能恢復(fù)指標(biāo)的天數(shù)要低于WBC及PLT(P<0.05)，而ANC與RET%恢復(fù)時(shí)間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6.7%(2/30)的患者PLT首先升至恢復(fù)指標(biāo)，而有93.3%(28/30)的患者IRF最先升至恢復(fù)指標(biāo)。

表1 HSCT后WBC、PLT、ANC、RET%及IRF達(dá)到恢復(fù)指標(biāo)時(shí)間(d)

3 討 論

HSCT泛指將各種來源的正常造血干細(xì)胞在患者接受超劑量放、化療后，通過靜脈輸注移植入受體內(nèi)，以替代原有的病理性造血干細(xì)胞，最終實(shí)現(xiàn)造血重建和免疫重建。傳統(tǒng)的HSCT后造血系統(tǒng)的重建觀察指標(biāo)如ANC、PLT等受影響較大，作為移植后造血功能恢復(fù)的評(píng)價(jià)指標(biāo)有其局限性[8]。RET是晚幼紅細(xì)胞脫核后到成熟紅細(xì)胞之間的過渡細(xì)胞，因幼稚RET有大量RNA顯示較強(qiáng)的嗜色性和光散射性，顯示高熒光度值。當(dāng)移植患者造血受到刺激時(shí)，大量幼稚RET從骨髓釋放入外周血，IRF值相應(yīng)增高，因此IRF能夠反映骨髓紅系造血功能，是判斷貧血和相關(guān)疾病療效的重要指標(biāo)[9-11]。郭振濤等[12]研究表明，IRF能準(zhǔn)確、敏感地反映患者應(yīng)用重組人促紅細(xì)胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)以后骨髓的造血狀況，能夠成為腎性貧血患者應(yīng)用rHuEPO后早期療效監(jiān)測(cè)的有效指標(biāo)。

本研究結(jié)果表明30例患者HSCT后最先升高并達(dá)到恢復(fù)指標(biāo)的為IRF，時(shí)間要早于WBC、PLT、ANC及RET%，且有93.3%的患者IRF最早達(dá)到造血功能恢復(fù)的指標(biāo)；ANC及RET%達(dá)到造血功能恢復(fù)指標(biāo)的時(shí)間要低于WBC及PLT，而ANC與RET%達(dá)到恢復(fù)指標(biāo)的時(shí)間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。研究結(jié)果說明，患者移植后造血功能得到增強(qiáng)，骨髓生成RET的能力顯著提高，較為幼稚的RET顯著增多，而幼稚RET水平的改變一般比移植患者的WBC、PLT、ANC、RET%及臨床癥狀的改變要提早出現(xiàn)。本研究結(jié)果可以看出，WBC及PLT作為造血功能恢復(fù)的監(jiān)測(cè)指標(biāo)并不適宜，而IRF是較為敏感的能夠反映患者機(jī)體造血功能恢復(fù)情況的指標(biāo)。Testa等[13]觀察骨髓移植和外周血HSCT患者的HRF變化，發(fā)現(xiàn)在ANC上升前2～7 d，HRF就已增加，與本研究結(jié)果相一致。Molina等[14]認(rèn)為IRF可作為可靠的異體HSCT后造血功能的預(yù)測(cè)因子。雖然ANC及RET%在反映機(jī)體造血功能恢復(fù)的時(shí)間上較IRF略有滯后，但作為目前常用的監(jiān)測(cè)移植患者造血功能恢復(fù)的指標(biāo)，它們?nèi)跃哂兄匾膮⒖純r(jià)值。有研究表明把IRF和ANC聯(lián)合起來作為觀察HSCT后造血功能恢復(fù)的指標(biāo)將更有效，其符合率也將提高至90%以上[15]。

綜上所述，在HSCT后， IRF的變化均明顯早于WBC、PLT、ANC及RET%，是觀察HSCT后造血功能恢復(fù)的敏感指標(biāo)，對(duì)于HSCT后造血功能恢復(fù)的監(jiān)測(cè)、病情觀察及指導(dǎo)臨床治療有重要的應(yīng)用價(jià)值。

[1]Mast AE,Blinder MA,Lu Q,et al.Clinical utility of the rericulocyte hemoglobin content in the diagnosis of iron deficiency[J].Blood,2002,99(4):1489-1491.

[2]陳則清.網(wǎng)織RBC四項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的正常參考值調(diào)查[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè),2001,22(6):122.

[3]Antonio T,Joaquin S,Didieer L,et al.Assessment of hematologic progenitor engraftment by complete reticulocyte maturation parameters after autologous and allogenetic hematopoietic stem cell transplantation[J].Haematologica,2001,86(1):24-29.

[4]Noronha JF,DeSouza CA,Vigorito AC,et al.Immuature reticulocytes as an early predictor of engraftment in autologous and allogenetic bone marrow transplantation[J].Clin Lab Haematol,2003,25(1):47-54.

[5]樂家新,叢玉隆,蘭亞婷,等.腫瘤患者化療過程中網(wǎng)織紅細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化的觀察[J].白求恩軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2003,1(2):82-84.

[6]虞秀蘭,何友華,王雪明.未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)在骨髓移植中的應(yīng)用[J].中國(guó)血液流變學(xué)雜志,2005,15(4):668-670.

[7]孫致信,陳琳軍.自體造血干細(xì)胞移植治療惡性血液病和惡性實(shí)體腫瘤[J].癌癥,2001,20(4):399-402.

[8]Gon?alo AP,Barbosa IL,Campilho F,et al.Predictive value of immature reticulocyte and platelet fractions in hematopoietic recovery of allograft patients[J].Transplant Proc,2011,43(1):241-243.

[9]林靜華,焦曉陽,吳清花,等.HLR%和IRF在缺鐵性貧血患者療效觀察中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué),2009,9(2):300-301.

[10]李玉芹,楊明清,鐘亞玲,等.RET/IRF和MCV/RDW及骨髓檢查聯(lián)合檢測(cè)在貧血診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2008,12(7):879-880.

[11]黃少瑩,陳梅,盧淮武.地中海貧血患者

網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)檢測(cè)的臨床意義[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2007,14(4):1403-1404.

[12]郭振濤,肖青,李香玲,等.大劑量rHuEPO對(duì)腎性貧血患者血液和骨髓紅系作用的研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2009,18(6):15-17.

[13]Testa U,Rutella S,Martucci R,et al.Autologous stemcell transplantation evluation of erythropoietic reconstitution by highly fluorescent reticulocyte couts erthropoietic soluble transferring receptors,ferrin TIBC and iron dosages[J].Br J Haematol,1997,96(4):762-775.

[14]Molina JR,Sanchez-Garcia J,Torres A,et al.Reticulocyte maturation parameters are reliable early predictors of hematopoieticengraftment after allogeneic stem cell transplantation[J].Biol Blood Marrow Transplant,2007,13(2):172-182.

[15]Dalal BI,Slockford GK,Naiman SC,et al.Criteria for marrow engraftment:comparision of reticulocyte maturity index with conventional parameters[J].Bone Marrow Transplantation,1996,17(1):91-92.