斯偉宏
(義烏市中心醫(yī)院 普外一科, 浙江 金華 322000)
硫化氫(H2S)是繼NO和CO之后的第三氣體信號分子,由關(guān)鍵酶CSE和CBS催化L-半胱氨酸代謝產(chǎn)生[1-2],在心血管疾病[1]、腸缺血-再灌注損傷大鼠腸黏膜屏障、肝臟功能障礙中起保護作用[3-4],具有抑制[1-5]、促進[6-7]炎癥反應(yīng)效應(yīng)。H2S在急性腹膜炎患者血漿中的表達水平及其意義,國內(nèi)外文獻鮮見報道。故我們加以探討,現(xiàn)闡述如下。
1.1 一般資料 選擇本院2010年1月到2010年12間急性腹膜炎患者50例(設(shè)為A組),其中男30例,女20例,年齡37~60歲,平均(45.5±8.8)歲;體質(zhì)量45~67 kg,平均(57.12±9.46)kg;病程9~23 h,平均(15.48±6.23)h。急性胃潰瘍穿孔11例,急性十二指腸潰瘍穿孔7例,外傷性結(jié)腸破裂25例,絞窄性腸梗阻、腸壞死7例。均無高血壓、慢性阻塞性肺疾病、冠心病、糖尿病等基礎(chǔ)疾病。選擇同期健康體檢者50例為正常對照(設(shè)為B組),其中男28例,女22例,年齡34~58歲,平均(43.3±10.2)歲;體質(zhì)量48~72 kg,平均(60.34±10.27)kg。兩組對象的性別、年齡、體質(zhì)量比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 主要試劑和儀器:敏感硫電極和PXS-270離子計購于上海雷磁儀器廠,TNF-α、IL-6、NO、CRP、內(nèi)毒素試劑盒購自南京建成生物工程研究所,ELx800酶標(biāo)儀為美國Bio-TEK公司產(chǎn)品;5417R低溫高速離心機為德國Eppendorf公司產(chǎn)品。
1.2.2 標(biāo)本采集:B組禁食12 h、A組入院時抽肘靜脈血6 mL,室溫靜止30 min后以3000 r/min離心15 min,分離血漿,取3 mL置于-80 ℃冰箱冷凍待測,所有血漿統(tǒng)一編號保存,各項指標(biāo)均統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),一批完成檢測。
1.2.3 檢測指標(biāo)及方法:酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定血漿中TNF-α、IL-6、CRP表達,敏感硫電極法[8]測定血漿H2S濃度;用動態(tài)濁度法檢測血漿中內(nèi)毒素的含量,化學(xué)法測定血漿NO含量。
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理方法 用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計處理。計量資料以±s表示,內(nèi)毒素檢測結(jié)果呈偏態(tài)分布,取對數(shù)處理后呈正態(tài)分布,采用兩獨立樣本均數(shù)t檢驗,相關(guān)性采用直線相關(guān)分析。
2.1 兩組對象血漿TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內(nèi)毒素及H2S的檢測結(jié)果 A組TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內(nèi)毒素及H2S均顯著高于B組,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。具體見表1。
2.2 各檢測指標(biāo)間的相關(guān)性 H2S與TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內(nèi)毒素呈正相關(guān)(r=0.735、0.683、0.837、0.748、0.842、0.872、0.764,P< 0.01);NO與 TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、內(nèi)毒素呈正相關(guān)(r=0.893、0.712、0.698、0.647、0.709、0.723,P<0.01)。
表1 兩組血漿TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內(nèi)毒素及H2S的水平變化比較(n=50±s)
表1 兩組血漿TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、內(nèi)毒素及H2S的水平變化比較(n=50±s)
與B組比:aP<0.01
組別 TNF-α IL-6 CRP 內(nèi)毒素 WBC N NO H2S(ng/L) (ng/L) (mg/L) (EU/L) (×109/L) (×109/L) (μmol/L) (μmol/L)A 49.02±2.62a 437.08±18.43a 66.99±4.86a 1.71±1.02a 16.88±0.94a 10.50±1.17a 119.19±9.93a 42.57±7.18a B 4.08±0.94 227.97±12.92 12.48±1.74 0.06±0.04 6.18±0.86 3.65±0.75 48.43±7.63 24.38±2.69
H2S氣體信號分子在人體內(nèi)存在形式:1/3為氣體H2S,2/3為NaHS,主要通過形成硫酸鹽或硫代硫酸鹽而最終排出體外[1-4]。Zhang等[6]研究結(jié)果表明內(nèi)源性的H2S激活白細胞,介導(dǎo)炎癥因子的釋放,在盲腸穿孔膿毒血癥中起促進炎癥反應(yīng)作用。本研究發(fā)現(xiàn),A組患者血漿中內(nèi)毒素、CRP、WBC、N均顯著高于B組(P<0.01),提示機體存在著膿毒血癥;A組H2S顯著高于B組(P<0.01),與Zhang等[6]研究結(jié)果一致,提示內(nèi)源性H2S在急性腹膜炎所致的膿毒血癥中起重要作用。
TNF-α、IL-6、NO是炎癥因子[6-7]。內(nèi)源性NO可通過抑制血小板和白細胞聚集,清除氧自由基、抑制脂質(zhì)過氧化和改善微循環(huán)等多個環(huán)節(jié)發(fā)揮對腸黏膜屏障的保護作用[3]。過度表達的NO與O2-結(jié)合生成過
氧亞硝酸基,誘導(dǎo)細胞凋亡[9]。TNF家族成員及TNF死亡受體-核轉(zhuǎn)錄因子-кB信號通路在膿毒血癥中起重要作用[10]。本研究結(jié)果顯示A組患者血漿中TNF-α、IL-6、NO水平均顯著高于B組(P<0.01),與Zhang等[6]研究結(jié)果一致;H2S與TNF-α、IL-6、NO、CRP、WBC、N、內(nèi)毒素呈正相關(guān),提示內(nèi)源性的H2S可能也是一種炎癥因子,在急性腹膜炎所致的膿毒血癥中起重要作用。有研究表明H2S在心血管疾病[1]、腸缺血-再灌注損傷大鼠腸黏膜屏障、肝臟功能障礙中起保護作用[3-4],具有抑制[1-5]、促進[6-7]炎癥反應(yīng)效應(yīng)。提示H2S氣體信號分子的生物活性效應(yīng)及其機制可能具有細胞和疾病特異性。但內(nèi)源性H2S在急性腹膜炎所致的膿毒血癥中是否起促進炎癥反應(yīng)作用,尚待進一步研究明確。
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