歐紅萍，楊海涵，陳元坤

（成都農(nóng)業(yè)科技職業(yè)學(xué)院，四川溫江 611130）

1 材料

選取臨床健康無生殖器官疾病的未孕加利福尼亞母兔25只，體重2.0～2.5kg，患子宮內(nèi)膜炎奶牛的子宮分泌物，導(dǎo)尿管，灌胃管；清宮藥：由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)奶?？祻?fù)中心提供（主要由紅花、當(dāng)歸、黃連、川芎、桃仁、益母草、淫羊藿、赤勺等組成）。

2 方法

2.1 預(yù)試驗

無菌采取患子宮內(nèi)膜炎奶牛分泌物置于4℃冰箱保存?zhèn)溆茫x取健康、未孕、無生殖系統(tǒng)疾病家兔2只，將分泌物用導(dǎo)尿管注入家兔子宮，每次5 mL，每天1次，連續(xù)灌注4d，觀察家兔臨床癥狀、體溫、子宮分泌物狀態(tài)等變化，實驗成功后視為正式模型的建立［1］。

2.2 模型的建立

在預(yù)試基礎(chǔ)上取家兔25只，其中試驗組20只，對照組5只。采用患子宮內(nèi)膜炎奶牛的子宮分泌物，試驗組每只家兔每天用犬導(dǎo)尿管子宮灌注分泌物5 mL，連續(xù)灌注4 d；對照組按照正常飼養(yǎng)，不做任何處理。觀察指標(biāo)：臨床癥狀、體溫反應(yīng)、子宮分泌物檢查、白細(xì)胞分類計數(shù)、剖解變化等，造模成功后備用。

2.3 治療方案

造模成功的家兔，灌服清宮藥水煎濃縮液2 mL/次，隔天1次，連續(xù)4次，觀察給藥前后家兔精神、飲食、陰門、陰道、子宮分泌物的變化［2］。在末次用藥后第3天剖解各組家兔，觀察子宮外形和宮腔內(nèi)變化；切取子宮角中段，用Bouin液固定24～48 h，制備常規(guī)石蠟切片，HE染色，顯微觀察子宮內(nèi)膜結(jié)構(gòu)的變化。

3 試驗?zāi)Ｐ徒?/h2>

3.1 臨床癥狀

造模前，所有家兔均體溫正常、食欲旺盛、飲水正常、精神良好、被毛整齊光潔；造模后，試驗組家兔精神變差、采食量減少，灌注分泌物8h后體溫升高0.5～0.8℃。

3.2 白細(xì)胞分類計數(shù)變化

造模中期和后期中性粒細(xì)胞計數(shù)、百分比均極顯著高于造模前（P＜0.01），造模后期中性粒細(xì)胞百分比雖然低于造模中期，但差異不顯著（P＞0.05）；造模中期和后期淋巴細(xì)胞百分比均極顯著低于造模前（P＜0.01），造模后期雖然高于造模中期，但差異不顯著（P＞0.05）；中性粒細(xì)胞增加和淋巴細(xì)胞減少，表明造模后存在炎癥反應(yīng)。見表1。

表1 造模期間白細(xì)胞分類計數(shù)

3.3 剖解變化

與對照組家兔正常子宮相比，造模組子宮顯著腫大，宮腔內(nèi)充滿黏性分泌物，可見內(nèi)膜潰瘍和出血。對照組和造模組其他器官無明顯變化。

3.4 子宮內(nèi)膜組織學(xué)變化

健康對照組子宮內(nèi)膜上皮完整，固有膜結(jié)構(gòu)正常，無充血和出血現(xiàn)象。與對照組健康家兔正常子宮內(nèi)膜結(jié)構(gòu)相比，造模組子宮內(nèi)膜的固有膜大量出血、充血，部分區(qū)域有輕微出血現(xiàn)象，有時可見出血，內(nèi)膜層出血、瘀血和水腫［3］（見圖1～3）。治療組子宮內(nèi)膜與對照組健康子宮內(nèi)膜無明顯差別，證明清宮藥有活血化瘀、抗菌消炎的作用。

圖1 健康組子宮內(nèi)膜照片（HE×100）

圖2 模型組子宮內(nèi)膜照片（HE×100）

圖3 治療組子宮內(nèi)膜照片（HE×400）

4 討論

臨床上，家畜子宮內(nèi)膜炎可分為急性和慢性兩種。一般來說，急性型多發(fā)于產(chǎn)后，根據(jù)臨床癥狀及陰門中排出的分泌物即可做出臨床診斷。但如果病變輕微，一般很難確診，尤其是在患隱性子宮內(nèi)膜炎時更是如此。慢性子宮內(nèi)膜炎可根據(jù)臨床癥狀、發(fā)情時分泌物的性狀、陰道檢查、直腸檢查和實驗室檢查的結(jié)果進(jìn)行診斷［4］。本研究利用子宮灌注患牛分泌物的方法制備家兔急性實驗性子宮內(nèi)膜炎，從臨床癥狀、體溫反應(yīng)、白細(xì)胞分類計數(shù)、子宮分泌物涂片鏡檢、病理解剖學(xué)、病理組織學(xué)進(jìn)行診斷。造模后試驗組家兔精神變差、采食量減少，體重下降0.18～0.34 kg，每次灌注細(xì)菌后家兔體溫均輕度升高；實驗性子宮內(nèi)膜炎早期病理變化以急性卡他性子宮內(nèi)膜炎為主，子宮黏膜充血；中性粒細(xì)胞增加和淋巴細(xì)胞減少；子宮分泌物中存在大量的白細(xì)胞、少量脫落的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞；子宮顯著腫大，宮腔內(nèi)充滿黏性分泌物，有時可見內(nèi)膜潰瘍和出血［5］；子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞變性、壞死，宮腔內(nèi)充滿分泌物，有時可見出血，內(nèi)膜層出血、瘀血和水腫，有大量中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤，表明造模成功。

本研究結(jié)果表明，子宮內(nèi)膜炎是以局部病理變化為主的全身性疾病。早期病理變化以子宮內(nèi)膜的急性卡他性炎癥為主，清宮藥對實驗性急性家兔子宮內(nèi)膜炎有較好的治療作用。

［1］陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.2 版.北京：農(nóng)業(yè)出版社，1987：568-569.

［2］宋友文.產(chǎn)后康復(fù)寧對家兔子宮的影響及臨床效果察［J］.中國獸醫(yī)雜志，2007，21（12）:36-37.

［3］肖定漢，李蘭華，張興全，等.奶牛子宮炎的臨床分析［J］.中國奶牛，1999（6）：39-40.

［4］成章瑞.活血化瘀治療的實驗研究［J］.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2008（2）：1-4.

［5］王迪潯.病理生理學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版杜，2009：109.