摘要:在室內(nèi)用轉(zhuǎn)基因水稻Bt汕優(yōu)63及其親本雜交水稻汕優(yōu)63稻米制備的小鼠人工飼料,分別在喂飼昆明雌性小白鼠1、2、3、4和5周后測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)。結(jié)果表明,小鼠在取食轉(zhuǎn)基因稻米制備的飼料第1、2、3和5周后的相對(duì)生長(zhǎng)率(RGR)與取食常規(guī)稻米制備的飼料無顯著性差異(P>0.05),而在第4周時(shí)顯著低于常規(guī)稻米制備的飼料。同時(shí),小鼠的平均相對(duì)生長(zhǎng)率(MRGR)、毛轉(zhuǎn)化率(ECI)和凈轉(zhuǎn)化率(ECD)在分別累積喂飼兩種水稻稻米制備的飼料后不同時(shí)間無顯著差異(P>0.05)。上述結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)基因稻米制備的飼料除在個(gè)別喂飼周數(shù)對(duì)昆明雌性小白鼠相對(duì)生長(zhǎng)率、近似消化率和相對(duì)消耗率有影響外,對(duì)其他的營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)均無顯著影響,說明轉(zhuǎn)基因稻米飼料對(duì)昆明雌性小白鼠的取食利用效率無明顯副作用。
關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)Bt基因水稻;營(yíng)養(yǎng)效應(yīng);相對(duì)生長(zhǎng)率;生態(tài)風(fēng)險(xiǎn);昆明雌性小白鼠
中圖分類號(hào):S511;S865.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1007-273X(2011)12-0004-04
自1983年世界上首例轉(zhuǎn)基因煙草試種成功以來,以基因工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù)發(fā)展迅猛,轉(zhuǎn)基因植物的研究在世界范圍內(nèi)取得令人矚目的進(jìn)展。轉(zhuǎn)基因技術(shù)在緩解資源短缺、環(huán)境惡化、保障糧食安全及農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展等方面顯現(xiàn)出巨大的潛力。
水稻是人類的主要糧食作物,目前的研究主要集中在轉(zhuǎn)基因水稻對(duì)靶標(biāo)害蟲的抗性評(píng)價(jià)[1]、非靶標(biāo)害蟲個(gè)體和種群動(dòng)態(tài)[2]、天敵的適合度[3,4]以及安全性評(píng)價(jià)等方面[5]。Carmencita等[6]研究表明,Bt毒素并沒有影響褐飛虱及其天敵黑肩綠盲蝽的適合度。劉志誠(chéng)等[7]研究認(rèn)為,轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)稻田節(jié)肢動(dòng)物群落的影響明顯弱于化學(xué)殺蟲劑,利用轉(zhuǎn)Bt基因水稻防治水稻螟蟲和稻縱卷葉螟等鱗翅目害蟲比使用化學(xué)殺蟲劑更利于保持稻田節(jié)肢動(dòng)物群落的穩(wěn)定性和保護(hù)稻田中的害蟲天敵。轉(zhuǎn)Bt基因作物的抗蟲性源于Bt殺蟲蛋白基因編碼的伴孢晶體蛋白(ICPs),ICP為堿溶性蛋白,被敏感昆蟲取食后,在昆蟲消化道內(nèi)消化酶的作用下,蛋白被水解,釋放出的抗蛋白酶核心肽段作用于昆蟲中腸上皮細(xì)胞,與中腸道上皮細(xì)胞紋緣膜上的特異性受體結(jié)合,使細(xì)胞膜穿孔,消化道細(xì)胞的離子、滲透壓平衡遭到破壞,最終導(dǎo)致昆蟲死亡。ICP的殺蟲特異性受ICP的溶解性和昆蟲消化酶體系的影響[8]。由于Bt殺蟲蛋白只能特異地與靶標(biāo)昆蟲中腸上皮細(xì)胞的受體結(jié)合,在哺乳動(dòng)物組織中無此類特異性受體,且哺乳動(dòng)物的胃液呈酸性,因而不產(chǎn)生毒性[9]。正因?yàn)槿绱耍D(zhuǎn)Bt基因作物的支持者認(rèn)為轉(zhuǎn)Bt基因作物作為食品是完全可行的,人們可以放心食用。但是水稻作為人們的首選主糧,倘若在安全性上存在問題的話勢(shì)必給人類造成巨大的災(zāi)難。因此,對(duì)于轉(zhuǎn)Bt基因水稻的可食用性及其商業(yè)化推廣尤需謹(jǐn)慎,必須在前期開展小型哺乳動(dòng)物喂養(yǎng)試驗(yàn)來論證其安全性。
昆明小鼠作為試驗(yàn)動(dòng)物用于生物醫(yī)學(xué)研究已有半個(gè)多世紀(jì)之久,被廣泛應(yīng)用生物學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)等領(lǐng)域的研究[10-12]。而轉(zhuǎn)基因水稻對(duì)?。笫笫欠癜踩壳伴_展的研究較少。劉雨芳等[13]用轉(zhuǎn)crylAc/sck雙價(jià)基因抗蟲稻MsA4大米不同劑量喂養(yǎng)大鼠,結(jié)果表明大鼠取食轉(zhuǎn)基因水稻后,其行為、呼吸、毛色均正常,轉(zhuǎn)crylAc/sck雙價(jià)基因抗蟲稻MSA4大米對(duì)大鼠表觀體征、臟器系數(shù)、血常規(guī)與血生化無明顯不良影響。王忠華等[14]以“克螟稻”米粉為材料進(jìn)行經(jīng)口急性毒理試驗(yàn)和大鼠90d喂養(yǎng)試驗(yàn),結(jié)果未見試驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)明顯中毒癥狀,大鼠解剖也未見異常病理改變。上述結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因水稻對(duì)鼠的行為及免疫系統(tǒng)沒有明顯影響,其主要原因由于Bt殺蟲蛋白只能特異地與靶標(biāo)昆蟲中腸上皮細(xì)胞的受體結(jié)合,在哺乳動(dòng)物組織中無此類特異性受體,一般不產(chǎn)生毒性。
本試驗(yàn)主要使用農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)的轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻Bt汕優(yōu)63為試驗(yàn)飼料材料,以中國(guó)昆明雌性小白鼠為試驗(yàn)對(duì)象,進(jìn)行室內(nèi)小鼠對(duì)Bt汕優(yōu)63飼料的喂飼試驗(yàn),以評(píng)價(jià)用轉(zhuǎn)Bt基因水稻制成的人工飼料對(duì)試驗(yàn)雌性小鼠取食及營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)的影響。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)小鼠
本試驗(yàn)中所使用的小鼠為出生后兩周(15日齡)昆明雌性小白鼠,由武漢生物制品研究所提供。
1.2 小鼠飼料的制備
本試驗(yàn)將收獲季節(jié)的轉(zhuǎn)基因水稻Bt汕優(yōu)63及其親本雜交水稻汕優(yōu)63稻米去殼并粉碎,并將兩種水稻稻米送往武漢工業(yè)學(xué)院加工制成小鼠人工飼料,常規(guī)水稻小鼠飼料具體配方為玉米27.0%、麩皮19.0%、魚粉15.3%、豆餅16.0%、磷酸氫鈣3.0%、鈣粉3.0%、食鹽0.5%、復(fù)合維生素0.1%、微量元素0.1%、常規(guī)稻米16.0%;轉(zhuǎn)Bt基因水稻小鼠飼料配方為轉(zhuǎn)Bt基因水稻稻米16.0%,其他成分和常規(guī)水稻小鼠飼料成分相同。
1.3 試驗(yàn)方法
試驗(yàn)共分2個(gè)處理,即用轉(zhuǎn)基因水稻Bt汕優(yōu)63和親本雜交水稻汕優(yōu)63配制的飼料在溫室內(nèi)分別喂飼昆明雌性小白鼠,小鼠飼養(yǎng)的溫室條件為溫度(25±1)℃,濕度60%±5%,每處理重復(fù)5次,每個(gè)重復(fù)5只小鼠。記錄每只小鼠的初始體重,每天更換飼料,并記錄每周飼料的投放量和小鼠體重。同時(shí)收集小鼠糞便和取食后的剩余飼料,用烘箱烘干(80 ℃,72 h)至恒重,稱量烘干后的重量。共計(jì)飼養(yǎng)和記錄5周直至本試驗(yàn)結(jié)束。
1.4 小鼠營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)
本試驗(yàn)采用6個(gè)營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo),即平均相對(duì)生長(zhǎng)率(Mean relative growth rate,MRGR),相對(duì)生長(zhǎng)率(Relative growth rate,RGR)、相對(duì)消耗率(Relative consumption rate,RCR)、毛轉(zhuǎn)化率(Efficiency of conversion of ingested food,ECI)、凈轉(zhuǎn)化率(Efficiency of conversion of digested food,ECD)和近似消化率(Approximate digestibility,AD)。
其中,相對(duì)生長(zhǎng)率RGR=(W2-W1)/P,平均相對(duì)生長(zhǎng)率MRGR=(logW2-logW1)/t,相對(duì)消耗率RCR=Q/P,毛轉(zhuǎn)化率ECI=[(W2-W1)/Q)]×100%,凈轉(zhuǎn)化率ECD=[(W2-W1)/(Q-F)]×100%,近似消化率AD=[(Q-F)/Q]×100%。式中,W1為小鼠初體重(g);W2為小鼠終體重(g);t為小鼠取食飼料時(shí)間(d);P為小鼠不同喂飼時(shí)間平均重量(g);Q為小鼠不同喂飼時(shí)間取食量(g);F為小鼠不同喂飼時(shí)間排糞量(g)。
1.5 統(tǒng)計(jì)分析
用SAS6.12統(tǒng)計(jì)分析軟件分析處理間試驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異顯著性。單因素方差分析比較不同飼料同一喂飼時(shí)間及同一飼料不同喂飼時(shí)間對(duì)小鼠取食量、排糞量和營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)的差異。雙因素方差分析不同飼料和喂飼時(shí)間對(duì)小鼠取食量、排糞量和營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)的影響。處理間的差異顯著性采用LSD檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
2.1 不同飼料和喂飼時(shí)間對(duì)小鼠取食量、排糞量和營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)的影響
不同飼料和喂飼時(shí)間對(duì)小鼠取食量、排糞量和營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)的影響結(jié)果見表1。從表1可以看出,不同水稻稻米制成的飼料對(duì)小鼠取食量(P<0.001)、排糞量(P<0.001)、平均相對(duì)生長(zhǎng)率(MRGR)(P<0.05)及相對(duì)消耗率(RCR)(P<0.05)有顯著影響;不同喂飼周數(shù)對(duì)小鼠取食量、排糞量及所有的營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)均有顯著的影響(P<0.001);二者的交互作用對(duì)小鼠取食量(P<0.001)、排糞量(P<0.001)、相對(duì)消耗率(RCR)(P<0.01)和近似消化率(AD)(P<0.001)均有顯著的影響。
2.2 小鼠取食兩種水稻飼料不同時(shí)間其取食量和排糞量的差異
小鼠取食兩種水稻飼料不同時(shí)間其取食量和排糞量的差異見圖1。從圖1可以看出,小鼠的取食量在累積取食轉(zhuǎn)基因稻米制備的飼料第1、2、3、4、5周均顯著低于累積取食常規(guī)稻米制備的飼料(P<0.05)。小鼠的排糞量在累積取食轉(zhuǎn)基因稻米制備的飼料第3、4、5周時(shí)顯著低于取食常規(guī)稻米制備的飼料(P<0.05),而在第1和第2周無顯著的差異。
2.3 小鼠取食兩種水稻飼料不同時(shí)間其營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)的差異
2.3.1 MRGR和RGR 從圖2可以看出,昆明雌性小白鼠累積喂飼轉(zhuǎn)基因稻米制備的飼料第1周時(shí)的相對(duì)生長(zhǎng)率(RGR)顯著高于第2、3、4、5周(P<0.01);而小鼠在取食兩種稻米制備的飼料同一時(shí)間的平均相對(duì)生長(zhǎng)率(MRGR)無顯著差異。
昆明雌性小白鼠的相對(duì)生長(zhǎng)率(RGR)在累積喂飼兩種稻米制備的飼料第4周時(shí)存在顯著差異(P<0.05),小鼠在取食轉(zhuǎn)基因稻米制備的飼料第1、2、3和5周時(shí)的相對(duì)生長(zhǎng)率(RGR)與取食常規(guī)稻米制備的飼料無顯著差異。
2.3.2 RCR和ECI 從圖3可以看出,昆明雌性小白鼠累積喂飼兩種稻米制備的飼料第1周時(shí)的相對(duì)消耗率(RCR)顯著高于第2、3、4、5周(P<0.01);小鼠在累積取食轉(zhuǎn)基因稻米制備的飼料第3周時(shí)的相對(duì)消耗率顯著低于常規(guī)稻米制備的飼料(P<0.01),其他時(shí)間無顯著差異。
昆明雌性小白鼠累積喂飼兩種稻米制備的飼料第1周時(shí)的毛轉(zhuǎn)化率(ECI)顯著高于第2、3、4、5周(P<0.01);而小鼠在取食兩種稻米制備的飼料同一時(shí)間的毛轉(zhuǎn)化率無顯著差異。
2.3.3 ECD和AD 從圖4可以看出,昆明雌性小白鼠累積喂飼兩種稻米制備的飼料第1周時(shí)的凈轉(zhuǎn)化率(ECD)顯著高于第2、3、4、5周(P<0.01);而小鼠在取食兩種稻米制備的飼料后同一時(shí)間其凈轉(zhuǎn)化率無顯著差異。
昆明雌性小白鼠在累積取食轉(zhuǎn)基因稻米制備的飼料第1周時(shí)的近似消化率(AD)顯著低于常規(guī)稻米制備的飼料(P<0.01),在第2周時(shí)的近似消化率與常規(guī)稻米制備的飼料無顯著差異,而在第3、4、5周時(shí)的近似消化率顯著高于常規(guī)稻米制備的飼料(P<0.05)。
3 討論
國(guó)內(nèi)大量學(xué)者利用鼠在轉(zhuǎn)基因水稻方面開展了大量的生物學(xué)、藥理學(xué)和毒理學(xué)等研究。王忠華等[14]利用大鼠急性中毒試驗(yàn)和喂養(yǎng)試驗(yàn)對(duì)Bt水稻稻米的動(dòng)物毒理性進(jìn)行了研究,未發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)明顯中毒癥狀,大鼠解剖也未見異常病理改變,對(duì)大鼠體重、進(jìn)食量、食物利用率、血常規(guī)、血生化及臟器無損害性影響。另外,利用轉(zhuǎn)Bt基因水稻[15]、轉(zhuǎn)Xa21水稻[16]和轉(zhuǎn)豇豆胰蛋白酶抑制劑(CpTI)稻米[17]對(duì)大鼠進(jìn)行的喂養(yǎng)試驗(yàn)的結(jié)果表明,大鼠除發(fā)現(xiàn)少數(shù)雌性的血液學(xué)指標(biāo)存在差異外,大部分生理指標(biāo)沒有顯著性差異,且所有指標(biāo)均在正常范圍內(nèi),因此得出轉(zhuǎn)基因水稻與親本水稻在營(yíng)養(yǎng)學(xué)與毒理學(xué)方面基本相似。李英華等[16]用轉(zhuǎn)Xa21基因水稻在對(duì)72只雌雄各半的大鼠進(jìn)行了為期28d的喂養(yǎng)后,對(duì)其進(jìn)食量、體重身長(zhǎng)、蛋白質(zhì)功效比、血常規(guī)、血生化、臟體比和骨密度等指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè)和比較,認(rèn)為轉(zhuǎn)基因大米對(duì)大鼠沒有明顯的毒副作用[18]。趙志輝等[19]將轉(zhuǎn)codA基因水稻及其親本按照30%的比例摻入大鼠飼料中,喂養(yǎng)30 d后,檢測(cè)大鼠體重增重以及血液中的各項(xiàng)激素指標(biāo),結(jié)果表明沒有顯著差異。
上述研究主要從營(yíng)養(yǎng)學(xué)、毒理學(xué)等方面研究了大鼠對(duì)不同轉(zhuǎn)基因水稻(如轉(zhuǎn)codA基因、轉(zhuǎn)Xa21基因、轉(zhuǎn)CpTI基因)的生物學(xué)和生理代謝響應(yīng),但目前很少有試驗(yàn)開展轉(zhuǎn)Bt基因水稻稻米對(duì)小鼠生物學(xué)特性和生理代謝方面的研究,由于我國(guó)農(nóng)業(yè)部已經(jīng)批準(zhǔn)發(fā)放了轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲水稻Bt汕優(yōu)63的生產(chǎn)應(yīng)用安全證書,這是我國(guó)首度為轉(zhuǎn)基因糧食作物頒發(fā)安全證書,后期面臨著轉(zhuǎn)Bt基因水稻生物的安全性評(píng)價(jià)和商業(yè)化推廣等環(huán)節(jié),因此,必須用整體動(dòng)物小鼠進(jìn)行轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲水稻Bt汕優(yōu)63的相關(guān)研究。中國(guó)昆明小鼠作為試驗(yàn)動(dòng)物用于生物醫(yī)學(xué)研究已有半個(gè)多世紀(jì)之久,一直是我國(guó)生產(chǎn)量、使用量最大的遠(yuǎn)交群(封閉群)小鼠,因此,利用昆明小鼠開展轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲水稻Bt汕優(yōu)63的相關(guān)試驗(yàn)可為轉(zhuǎn)Bt基因水稻安全性評(píng)價(jià)和商品化推廣提供重要的理論基礎(chǔ)。
本研究中,不同飼料和喂飼周數(shù)對(duì)小鼠取食量、排糞量和大部分營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)均有顯著的影響,其原因主要是昆明雌性小白鼠對(duì)飼料取食量及排糞量主要是以累計(jì)喂飼周數(shù)來計(jì)算,因此,隨著取食周數(shù)的延長(zhǎng),小鼠的累積取食量和排糞量必然大幅增加,造成小鼠的取食量和排糞量對(duì)兩種水稻飼料的喂飼時(shí)間(不同喂飼周數(shù))存在著極顯著的影響;昆明雌性小白鼠主要的營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)是建立在小鼠不同周數(shù)的累積取食量、排糞量,而小鼠的初始重量是恒定的,因此,數(shù)據(jù)分析結(jié)果表明,同種飼料不同喂飼時(shí)間對(duì)小鼠所有的營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)均有顯著的影響。另外,昆明雌性小白鼠在取食轉(zhuǎn)基因稻米制備的飼料第1、2、3、4、5周的取食量和第3、4、5周排糞量較取食常規(guī)稻米制備的飼料顯著降低,但同時(shí)我們也發(fā)現(xiàn),小鼠在累積喂飼兩種稻米制備的飼料同一時(shí)間其平均相對(duì)生長(zhǎng)率、毛轉(zhuǎn)化率和凈轉(zhuǎn)化率無顯著差異,說明轉(zhuǎn)基因水稻稻米制備的飼料雖可影響昆明雌性小白鼠的取食和排泄,但對(duì)昆明雌性小白鼠的生長(zhǎng)效率和最終飼料的轉(zhuǎn)化率無明顯影響,表明轉(zhuǎn)Bt基因水稻制備的飼料對(duì)小型哺乳動(dòng)物(如昆明雌性小白鼠)的食物利用效率無明顯副作用。當(dāng)然,轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)哺乳動(dòng)物的影響是一個(gè)綜合效應(yīng),本研究主要考慮的是轉(zhuǎn)Bt基因水稻制備的飼料對(duì)昆明雌性小白鼠營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo)的影響,結(jié)果表明,轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)昆明雌性小白鼠取食和食物利用效率是安全的。后期的試驗(yàn)應(yīng)該從小型哺乳動(dòng)物(如本試驗(yàn)中的昆明小白鼠)對(duì)轉(zhuǎn)Bt基因水稻的生理代謝響應(yīng)(如保護(hù)酶和解毒酶等酶活性)和繼代繁殖(如連續(xù)多代的飼養(yǎng))方面開展研究。
本試驗(yàn)通過室內(nèi)用轉(zhuǎn)基因水稻Bt汕優(yōu)63及其親本雜交水稻汕優(yōu)63稻米制備的小鼠人工飼料,分別在喂飼不同時(shí)間后測(cè)定昆明種雌性小白鼠的取食量、排糞量和營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)指標(biāo),數(shù)據(jù)表明轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)昆明雌性小白鼠取食和食物利用效率是安全的,從營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)方面的響應(yīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻Bt汕優(yōu)63進(jìn)行了安全性評(píng)價(jià),試驗(yàn)結(jié)果可為農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)發(fā)放的轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻Bt汕優(yōu)63商品化推廣提供重要的理論支持。
致謝:本研究得到了武漢理工大學(xué)碩士生覃銅城、本科生陳超、葉 侃、李 峰、宋雨林、王新葉、楊佳麗等的大力協(xié)助,在此一并致謝。
參考文獻(xiàn):
[1] 王忠華,舒慶堯,崔海瑞,等. Bt轉(zhuǎn)基因水稻“克螟稻”雜交后代二化螟抗性研究初報(bào)[J]. 作物學(xué)報(bào),2000,26(3):310-314.
[2] 王世貴,葉恭銀,胡 萃,等. 轉(zhuǎn)CrylAb基因水稻對(duì)二化螟幼蟲的致死和亞致死效應(yīng)[J]. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版),2003,29(6):639-643.
[3] 崔旭紅,焦曉國(guó),張國(guó)安,等. 轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)稻飛虱和蜘蛛種群數(shù)量的影響[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2002,21(4):356-358.
[4] 劉志誠(chéng),葉恭銀,傅 強(qiáng),等. CrylAb基因水稻對(duì)擬水狼蛛捕食作用間接影響的評(píng)價(jià)[J].中國(guó)水稻科學(xué),2003,17(2):175-178.
[5] TU J M,ZHANG G A,DATTA K,et al. Field performance of transgenic elite commercial hybrid rice expression Bacillus thuringiettsis 8-endotoxin[J].Nat Biotechnology,2000,18:1101-1104.
[6] CARMENCITA C B, REMEDIOS M A, MICHAEL B C. Effect of rice lines transformed with Bacillus thuringiensis toxin genes on the brown plant hopper and its predator Cyrtorhinus lividi pennies[J]. Entomologia Experimentalis et Applicata, 2002,102:21-28.
[7] 劉志誠(chéng),葉恭銀,胡 萃.抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻和化學(xué)殺蟲劑對(duì)稻田節(jié)肢動(dòng)物群落的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2004,15(12):2309-2314.
[8] 趙玉艷, 蔡磊明,王 捷. 轉(zhuǎn)蘇云金芽孢桿菌基因作物安全性研究[J]. 衛(wèi)生毒理學(xué)雜志,2004,18(1):54-57.
[9] 王麗冰,劉立軍,顏亨梅. 轉(zhuǎn)Bt抗蟲基因水稻的研究進(jìn)展和生物安全性及對(duì)策[J]. 生命科學(xué)研究,2009,13(2):56-57.
[10] 袁 柱, 站 雅,周玲仙,等. L-鹽酸賴氨酸對(duì)大白鼠生長(zhǎng)發(fā)育及肝、腎毒性作用的初步觀察[J]. 昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1990,11(3):19-23.
[11] 馬小明,朱風(fēng)華,呂 翠,等. ZEN染毒飼料中添加酯化葡甘露聚糖對(duì)小鼠生長(zhǎng)性能及免疫指標(biāo)的影響[J]. 畜牧與獸醫(yī),2010,42(1):67-72.
[12] 孫全文,杜建華,常 寶. 不同蛋白質(zhì)水平的日糧對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖性能的影響[J]. 張家口醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2003, 20(5):14-16.
[13] 劉雨芳,劉文海,李 雙,等. 轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻MSA4大米對(duì)大鼠臟器系數(shù)、血常規(guī)與血生化的影響[J]. 湘潭師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2007,29(4):112-116.
[14] 王忠華,王 茵,崔海瑞,等. Bt 水稻克螟稻稻米毒理性評(píng)價(jià)研究初報(bào)[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(12):1487-1492.
[15] WANG Z, WANG Y, CUI H, et al. Toxicological evaluation of transgenic rice flour with a synthetic crylAb gene from Bacillus thuringtensis[J]. Journal of Science Food and Agriculture,2002,82:738-744.
[16] 李英華,樸建華,陳小萍,等. 轉(zhuǎn)基因大米的免疫毒理學(xué)評(píng)價(jià)[J]. 中國(guó)公共衛(wèi)生,2004,20(4):404-406.
[17] 卓 勤,陳小萍,樸建華,等. 轉(zhuǎn)豇豆胰蛋白酶抑制劑大米90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)研究[J]. 衛(wèi)生研究,2004,33(2):176-179.
[18] 李英華,樸建華,陳小萍,等. Xa21轉(zhuǎn)基因大米的營(yíng)養(yǎng)學(xué)評(píng)價(jià)[J]. 衛(wèi)生研究,2004,33(3):303-306.
[19] 趙志輝,楊立桃,艾曉杰,等. 轉(zhuǎn)codA基因的耐鹽堿水稻對(duì)大鼠生理代謝的影響及外源基因的水平轉(zhuǎn)移[J]. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào),2005,13(3):341-346.