支 爽, 鄭 幗, 劉 穎, 王景陽, 劉登科
(1. 天津工業(yè)大學(xué) a. 環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院; b. 天津市紡織纖維界面處理技術(shù)工程中心,天津 300160;2. 天津藥物研究院 天津市新藥設(shè)計(jì)與發(fā)現(xiàn)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300193)
血栓是由不同的病因和發(fā)病機(jī)制造成的血液異常凝固,其發(fā)病率逐年增高,嚴(yán)重危害人們的健康。在血栓的治療方面,噻吩并吡啶類血小板P2Y12二磷酸腺苷受體抑制劑類藥物取得了巨大的成功,噻氯匹定(Ⅰ,1978年)、氯吡格雷(Ⅱ, 1998年)、普拉格雷(Ⅲ, 2009年)先后上市,其中Ⅱ因其療效顯著、副作用小,2009年銷售額已達(dá)80億美元。Ⅲ的抗血栓活性比Ⅱ作用更強(qiáng),用藥個體差異小,起效也更為快速。但Ⅰ~Ⅲ均有明顯的不足:如Ⅰ可以引起中性粒細(xì)胞減少、骨髓抑制等副作用;Ⅱ用藥個體差異大,存在其抵抗性等[1];Ⅲ導(dǎo)致患者出血傾向嚴(yán)重[2]。故尋找更加安全、有效的該類藥物已成為抗血栓藥物研究的熱點(diǎn)。
CompabcdefghAr OO -OO - F3C- N-Cl -Cl SO O - N-F3CCl N-F3C
Scheme1
哌嗪環(huán)常常被引入許多藥物分子中,以調(diào)節(jié)脂水分配系數(shù),和藥物的pK值[3],從而改善藥物的生物利用度、提高藥效。本文在文獻(xiàn)[4~6]方法的基礎(chǔ)上,保留了Ⅰ~Ⅲ藥物共有的藥效基團(tuán)噻吩并四氫吡啶母核,同時,引入哌嗪類結(jié)構(gòu),通過生物電子等排及藥物代謝原理設(shè)計(jì)并合成了8個新型的含哌嗪的噻吩并四氫吡啶類衍生物(4a~4h, Scheme 1),并考察了它們對大鼠血小板聚集的抑制活性。
YRT-3型熔點(diǎn)儀(溫度未校正);BRUKER AV400型核磁共振(CDCl3或DMSO-d6為溶劑,TMS為內(nèi)標(biāo));VG ZAB-HS型質(zhì)譜;COMBI FLASH Rf200分離純化制備色譜;PAM-3型雙通道血小板聚集儀。所用試劑均為分析純。
(1) 4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶(1)的合成
在反應(yīng)瓶中加入4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶的鹽酸鹽17.57 g(0.1 mol)和蒸餾水100 mL,攪拌使其溶解;冰水浴冷卻,滴加氫氧化鈉溶液至pH 9,反應(yīng)1 h。用乙酸乙酯(3×100 mL)萃取,合并有機(jī)相,用無水硫酸鈉干燥,減壓除溶得黃色油狀液體1 13.2 g(無需純化,直接投料)。
(2) 4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶乙酰氯(2)的合成
在反應(yīng)瓶中加入1 13.9 g(0.1 mol),二氯甲烷70 mL和三乙胺15.17 g,攪拌使其溶解;于0 ℃~-10 ℃滴加氯乙酰氯16.94 g(150 mmol)的二氯甲烷(30 mL)溶液,滴畢,反應(yīng)3 h;于室溫反應(yīng)1 h。加入蒸餾水100 mL,分液,有機(jī)相用飽和食鹽水(3×50 mL)洗滌,無水硫酸鈉干燥,蒸除溶劑后經(jīng)硅膠柱層析[洗脫劑:A=V(乙酸乙酯) ∶V(石油醚)=1 ∶1]分離得淺黃色油狀液體2 16.17 g,產(chǎn)率75%。
(3) 4的合成(以4a為例)
在反應(yīng)瓶中加入2 21.5 g(0.1 mol)和乙腈100 mL,攪拌使其溶解;加入三乙胺15.17 g和4-(呋喃-2-羰基)哌嗪(3a)18.1 g(100 mmol),回流反應(yīng)至終點(diǎn)(TLC跟蹤)。蒸干溶劑,殘余物用二氯甲烷(100 mL)溶解,飽和食鹽水(3×50 mL)洗滌,無水硫酸鈉干燥,減壓蒸除溶劑后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑:A=3 ∶2)分離得黃色油狀液體1-{6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-基}-2-[4-(呋喃-2-羰基)哌嗪-1-基]乙酮(4a)。
用類似的方法合成4b~4h。4a~4h的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1,光譜數(shù)據(jù)見表2。
表1 4的實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 1 Experimental results of 4
表2 4的光譜數(shù)據(jù)Table 2 Spectra data of 4
*m/z: {[M+H]+}
在4的合成中,哌嗪N-取代基的吸電子能力越強(qiáng),越降低仲胺上的電子云密度,不利于反應(yīng)的進(jìn)行。由于3f中的磺?;^苯基、羰基、吡啶基的吸電子能力強(qiáng),所以合成4f需要在乙腈回流的條件下才能進(jìn)行。
取200 g~250 g的健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分組(設(shè)空白和Ⅰ對照組),灌胃給藥,劑量30 mg·kg-1。對照組給等量0.5%羧甲基纖維素-Na,給藥后2 h腹腔注射40 mg·kg-1戊巴比妥鈉(1 ml·kg-1)麻醉,腹主動脈采血,用3.8%枸櫞酸鈉抗凝,分別制備富血小板血漿(PRP)和貧血小板血漿(PPP),測定ADP(終濃度:1.08 μmol·L-1)誘導(dǎo)的血小板最大聚集百分率,計(jì)算抑制率(表3)。由表3可見,4a,4c,4d,4e,4g和4h均有明顯抗血小板聚集作用,其中4c和4e的活性較對照藥Ⅰ強(qiáng),抑制率分別為75.9%和67.4%。4c和4e都是鹵代苯取代的哌嗪衍生物,提示該類化合物值得進(jìn)一步研究,對構(gòu)效關(guān)系進(jìn)一步研究有積極意義。
表3 4的抗血小板活性Table 3 Anti-platelet activity of 4
與正常對照組比較;*P<0.01
設(shè)計(jì)并合成了8個新型的含哌嗪的噻吩并四氫吡啶類衍生物(4a~4h)。他們對大鼠體內(nèi)血小板聚集均有一定的抑制活性,其中含鹵代苯基的化合物,抑制活性強(qiáng)于目前藥物噻氯匹定。
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