李凱 李明杰 鄭直 何濤 王勇 屈碧輝

·論著·

血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C含量對(duì)胰腺癌患者預(yù)后判斷的意義

李凱 李明杰 鄭直 何濤 王勇 屈碧輝

目的探討血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)含量對(duì)進(jìn)展期胰腺癌患者預(yù)后判斷的價(jià)值。方法選擇2006年8月至2008年2月間收治的35例進(jìn)展期胰腺癌患者，采用ELISA法檢測(cè)患者血清VEGF-C、CA19-9含量，行KPS評(píng)分，應(yīng)用Kaplan-Meier法計(jì)算生存率。log-rank法檢驗(yàn)不同變量間生存率的差異，Cox回歸模型進(jìn)行單因素和多因素分析。結(jié)果35例胰腺癌患者血清VEGF-C含量平均為(1309±542)pg/ml，顯著高于健康對(duì)照者的(278±115)pg/ml(P<0.01)。應(yīng)用Cox風(fēng)險(xiǎn)模型對(duì)影響進(jìn)展期胰腺癌患者預(yù)后因素行單因素分析， KPS評(píng)分、血清CA19-9及VEGF-C均為獨(dú)立影響因素(χ2=7.208、6.908、3.867，P=0.007、0.009、0.049)；行多因素分析， 血清VEGF-C和KPS評(píng)分為獨(dú)立影響因素(χ2=4.873，P=0.027；χ2=5.274，P=0.022)。以血清VEGF-C含量1280 pg/ml為分界點(diǎn)，≤1280 pg/ml患者的中位生存時(shí)間為10.0個(gè)月，平均生存時(shí)間為11.3個(gè)月， 1年累積生存率為50.0%；而>1280 pg/ml患者分別為6.0、6.3個(gè)月和5.9%。兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.400，P=0.002)。以KPS評(píng)分70為界，<70患者中位生存時(shí)間為6.0個(gè)月，平均生存時(shí)間為6.6個(gè)月，1年累積生存平均為21.4%；而≥70分者分別為9.0、10.1個(gè)月和33.3%，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.040，P=0.044)。血清CA19-9值≤200 U/ml與>200 U/ml的兩組患者的平均生存時(shí)間(10.0個(gè)月比7.8個(gè)月)、1年累積生存率(37.5%比21.1%)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.910，P=0.167)。結(jié)論血清VEGF-C含量可作為判斷進(jìn)展期胰腺癌患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素。

胰腺腫瘤； 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C； CA19-9； KPS評(píng)分； 預(yù)后

國(guó)內(nèi)外許多研究證實(shí)，1997年發(fā)現(xiàn)的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(vascular endothelial growth factor C，VEGF-C)通過腫瘤“淋巴管生成”機(jī)制促進(jìn)腫瘤細(xì)胞淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。Tamura等[1]及Mitsuhashi等[2]報(bào)道，宮頸癌和非小細(xì)胞性肺癌腫瘤患者血清VEGF-C含量與患者術(shù)后生存時(shí)間呈顯著負(fù)相關(guān)。近年的研究證實(shí)，胰腺癌組織內(nèi)VEGF-C的表達(dá)與其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)[3-4]。為此，本研究探討血清VEGF-C含量在進(jìn)展期胰腺癌患者預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用價(jià)值。

資料與方法

一、研究對(duì)象及一般情況

選擇本院2006年8月至2008年2月經(jīng)CT檢查證實(shí)的進(jìn)展期胰腺癌病例35例。其中男22例，女13例；年齡35～78歲，平均(61±11)歲。CT增強(qiáng)掃描顯示胰周主要血管(包括門靜脈主干及其屬支、腹腔干及其屬支、腸系膜上動(dòng)脈、下腔靜脈、腹主動(dòng)脈等)中斷、閉塞，癌灶半環(huán)形至環(huán)形包埋而未行手術(shù)切除[5]，也未接受正規(guī)放射或化學(xué)治療。所有患者均有完整病歷資料及隨訪記錄(隨訪時(shí)間1～16個(gè)月)，于入組時(shí)留取血清標(biāo)本。另選擇10例健康者血清作為對(duì)照。標(biāo)本置-70℃保存。

二、血清VEGF-C蛋白含量檢測(cè)

采用ELISA方法檢測(cè)。ELISA試劑盒購(gòu)自美國(guó)BIOSOURCE公司，檢測(cè)范圍94.0～6000 pg/ml。按試劑盒說明書操作。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品450 nm吸光度(A450)值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算對(duì)應(yīng)的濃度。

三、其他與預(yù)后相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)

患者入組時(shí)評(píng)定KPS評(píng)分(karnofsky performance scale score)；根據(jù)CT資料計(jì)算腫瘤最大直徑；蛋白質(zhì)芯片(數(shù)康生物科技有限公司)檢測(cè)血清CA19-9值(正常參考值界限為37 U/ml)。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、胰腺癌患者血清VEGF-C蛋白含量及生存率

35例胰腺癌患者血清VEGF-C蛋白含量為275～2316 pg/ml，平均為(1309±542)pg/ml。10例健康對(duì)照者血清VEGF-C含量平均為(278±115)pg/ml，胰腺癌患者顯著高于健康者。胰腺癌患者中位生存時(shí)間為8.0個(gè)月，平均生存時(shí)間為8.9個(gè)月(95%CI：7.35～10.44)；1年生存率為28.6%(圖1)。

圖1 35例胰腺癌患者生存曲線

二、胰腺癌患者預(yù)后因素分析

將35例胰腺癌患者的年齡、腫瘤最大直徑、腫瘤生長(zhǎng)部位、KPS評(píng)分、血清CA19-9及VEGF-C含量等指標(biāo)一起納入Cox風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行預(yù)后單因素分析，其中KPS評(píng)分、血清CA19-9及VEGF-C含量為影響進(jìn)展期胰腺癌患者預(yù)后的獨(dú)立因素(表1)。

對(duì)上述篩選變量進(jìn)行多因素Cox回歸模型分析，引入標(biāo)準(zhǔn)為0.10、刪除標(biāo)準(zhǔn)為0.11，采用后退法。最先退出模型的是CA19-9含量(χ2=3.738，P=0.053)，然后是VEGF-C含量(χ2=4.873，P=0.027)，最后是KPS評(píng)分(χ2=5.274，P=0.022)，KPS評(píng)分、血清VEGF-C含量為影響進(jìn)展期胰腺癌患者預(yù)后的獨(dú)立因素(表2)。

表135例胰腺癌患者相關(guān)變量Cox回歸模型單因素分析

變量回歸系數(shù)標(biāo)準(zhǔn)誤χ2值P值OR值(95%CI)年齡0.0510.0293.0820.0791.052(0.994～1.113)腫瘤部位0.9020.5862.3660.1242.464(0.781～7.777)腫瘤直徑0.3110.3140.9860.3211.365(0.738～2.525)KPS評(píng)分-0.0730.0277.2080.0070.929(0.881～0.980)CA19-90.0050.0026.9080.0091.005(1.001～1.008)VEGF-C0.0010.0003.8670.0491.001(1.000～1.002)

表235例胰腺癌患者相關(guān)變量Cox回歸模型多因素分析

變量回歸系數(shù)標(biāo)準(zhǔn)誤χ2值P值OR值(95%CI)KPS評(píng)分-0.0530.0235.2740.0220.948(0.906～0.992)VEGF-C0.0010.0004.8730.0271.001(1.000～1.002)CA19-90.0030.0023.7380.0531.003(1.000～1.006)

三、KPS評(píng)分、血清CA19-9值及VEGF-C值與胰腺癌預(yù)后的關(guān)系

全組患者KPS評(píng)分平均為(62.71±18.34)分，將KPS評(píng)分分為<70分與≥70分兩組。<70分14例，中位生存時(shí)間為6.0個(gè)月，平均生存時(shí)間為6.6個(gè)月， 95%CI為4.73～8.46，1年累積生存率為21.4%；≥70分21例，中位生存時(shí)間為9.0個(gè)月，平均生存時(shí)間為10.1個(gè)月， 95%CI為8.26～11.97，1年累積生存率為33.3%(圖2)。兩組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.040，P=0.044)。

以血清CA19-9值200 U/ml為界?！?00 U/ml16例，中位生存時(shí)間為10.0個(gè)月，平均生存時(shí)間為10.0個(gè)月， 95%CI為7.66～12.31，1年累積生存率為37.5%；>200 U/ml 19例，中位生存時(shí)間為7.0個(gè)月，平均生存時(shí)間為7.8個(gè)月， 95%CI為5.96～9.56，1年累積生存率為21.1%。兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.910，P=0.167)。

圖2 KPS評(píng)分<70分與≥70分的兩組病例生存分析

以血清VEGF-C含量1280 pg/ml為分界點(diǎn)[1-2]，≤1280 pg/ml 19例，中位生存時(shí)間為10.0個(gè)月，平均生存時(shí)間為11.3個(gè)月， 95%CI為9.08～13.45，1年累積生存率為50.0%；>1280 pg/ml17例，中位生存時(shí)間為6.0個(gè)月，平均生存時(shí)間為6.3個(gè)月，95%CI為5.03～7.55，1年累積生存率為5.9%。兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.400，P=0.002)。

討 論

VEGF-C是特異性的腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移促進(jìn)因子。Tamura等[1]采用ELISA法檢測(cè)78例非小細(xì)胞性肺癌患者血清中VEGF-C含量，其對(duì)腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)敏感性高達(dá)85%、特異性達(dá)68%，其預(yù)測(cè)能力明顯高于另2種腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)因子VEGF與MMP-9。Mitsuhashi等[2]對(duì)78例婦科惡性腫瘤的檢測(cè)結(jié)果顯示，患者血清中VEGF-C含量與患者預(yù)后呈明顯正相關(guān)。我們以往的研究[3]證實(shí)，胰腺癌組織VEGF-C的表達(dá)與其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。Hiroshi等[6]報(bào)道，胰腺癌組織VEGF-C高表達(dá)與低表達(dá)者的5年生存率分別為7.7%和30.3%，相差非常顯著。本結(jié)果顯示，胰腺癌患者血清VEGF-C蛋白含量較正常健康者顯著升高，經(jīng)Cox回歸模型單因素及多因素分析，均為影響胰腺癌患者預(yù)后的獨(dú)立因素。以血清VEGF-C 1280 pg/ml為界，≤1280 pg/ml組患者的平均生存時(shí)間、1年累積生存率均顯著高于>1280 pg/ml組患者。同樣，KPS評(píng)分也是影響胰腺癌患者預(yù)后的獨(dú)立因素。但它是體質(zhì)狀況評(píng)分，屬保護(hù)性因素。

Berger等[7]的研究結(jié)果顯示，CA19-9值>200 U/ml的胰腺癌患者預(yù)后明顯差，具有一定的預(yù)后判斷價(jià)值。本結(jié)果顯示，血清CA19-9含量在單因素分析中是影響胰腺癌預(yù)后的因素，但在多因素分析時(shí)被剔除，且血清CA19-9含量≤200 U/ml與>200 U/ml的兩組患者平均生存時(shí)間、1年累積生存率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本結(jié)果與Berger等的結(jié)果存在一定的差別，可能與本組病例排除根治術(shù)后及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等類型的病例有關(guān)。

目前，國(guó)內(nèi)外以最常使用的腫瘤標(biāo)志物CA19-9作為判斷胰腺癌預(yù)后的輔助指標(biāo)。本結(jié)果顯示，血清VEGF-C較CA19-9對(duì)胰腺癌患者尤其是無法切除的進(jìn)展期胰腺癌患者的預(yù)后評(píng)估更具有一定的應(yīng)用價(jià)值。當(dāng)然，尚需通過大樣本、多分期的病例進(jìn)行更深入地研究和驗(yàn)證。

[1] Tamura M,Oda M,Matsumoto I,et al.The combination assay with circulating vascular endothelial growth factor (VEGF)-C,matrix metalloproteinase-9,and VEGF for diagnosing lymph node metastasis in patients with non-small cell lung cancer.Ann Surg Oncol,2004,11:928-933.

[2] Mitsuhashi A,Suzuka K,Yamazawa K,et al.Serum vascular endothelial growth factor (VEGF) and VEGF-C levels as tumor markers in patients with cervical carcinoma.Cancer，2005,103:724-730.

[3] 李凱,李明杰,何濤,等.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C在胰腺癌中的表達(dá)及其對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響.中華醫(yī)學(xué)雜志,2009,89:2386-2390.

[4] Duff SE,Li C,Jeziorska M,et al.Vascular endothelial growth factors C and D and lymphangiogenesis in gastrointestinal tract malignancy.Br J Cancer,2003,89:426-430.

[5] 徐王磊,李寧,金法.超聲內(nèi)鏡對(duì)胰腺癌可切除性評(píng)估的價(jià)值分析.實(shí)用腫瘤雜志,2007,22:311-313.

[6] Hiroshi K,Sonshin T,Kousei M,et al.Impact of vascular endothelial growth factor-C and -D expression in human pancreatic cancer:Its relationship to lymph node metastasis.Clin Cancer Res,2004,10:8413-8420.

[7] Berger AC,Meszoely IM,Ross EA,et al.Undetectable preoperative levels of serum CA 19-9 correlate with improved survival for patients with resectable pancreatic adenocarcinoma.Ann Surg Oncol,2004,11:644-649.

2010-06-24)

(本文編輯：呂芳萍)

ValueofserumconcentrationofVEGF-Cintheprognosisofadvancedpancreaticcancer

LIKai,LIMing-jie,ZHENGZhi,HETao,WANGYong,QUBi-hui.

DepartmentofHepatobliaryPancreaticSurgery,MunicipalCentralHospitalofWuhan,Wuhan430014,China

Correspondingauthor:LIMing-jie,Email:likaiyd@yahoo.com.cn

ObjectiveTo investigate the value of serum concentration of VEGF-C in the prognosis of advanced pancreatic cancer.MethodsThirty-five patients with advanced pancreatic cancer were selected from Aug. 2006 to Feb. 2008. ELISA method was used to detect the serum level of VEGF-C, CA19-9 and KPS score was calculated, and survival was analyzed by Kaplan Meier method. The survival difference was calculated by log rank. Cox regression model was used to perform univariate and multivariate analysis.ResultsThe mean serum concentration of VEGF-C was (1309±542) pg/ml in patients with advanced pancreatic cancer, which were significantly higher than that those in normal control [(278±115) pg/ml,P<0.01]. In Cox regression, KPS score, serum CA19-9 and VEGF-C were independent factors (χ2=7.208, 6.908, 3.867,P=0.007, 0.009, 0.049). In multivariate analysis, serum VEGF-C and KPS score were independent factors (χ2=4.873,P=0.027, χ2=5.274,P=0.022). Using serum concentration of VEGF-C at 1280 pg/ml as the cut-off point, the mean survival of patients with VEGF-C ≤1280 pg/ml was 10.0 months, and the median survival was 11.3 months, 1 year cumulative survival was 50.0%; while they were 6.0 months, 6.3 months and 5.9% in patients with VEGF-C>1280 pg/ml, and the difference was statistically significant (χ2=9.400,P=0.002). Using KPS score 70 as the cut-off point, the mean survival of patients with KPS <70was 6.0 months, and the median survival was 6.6 months, 1 year cumulative survival was 21.4%; while they were 9.0 months, 10.1 months, 33.3% in patients with KPS score≥70,and the difference was statistically significant (χ2=4.040,P=0.044). The difference of the median survival, 1 year cumulative survival in patients with CA19-9 ≤200 U/ml or >200 U/ml was not statistically significant (10.0 monthsvs. 7.8 months, 37.5%vs. 21.1%; χ2=1.910,P=0.167).ConclusionsSerum concentration of VEGF-C can used as an independent factor for predication of prognosis of patients with advanced pancreatic cancer.

Pancreatic neoplasms; Vascular endothelial growth factor C; CA19-9; Karnofsky performance scale score; Prognosis

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2011.03.003

430014 武漢，武漢市中心醫(yī)院肝膽胰外科

李明杰，Email:likaiyd@yahoo.com.cn