李大勇 賀永貴 劉麗萍 崔 勛,3

(1.延邊大學體育學院,吉林延吉 133002;2.延邊大學醫(yī)學部基礎(chǔ)醫(yī)學院生理學與病理生理學教研部,吉林延吉 133002;3.長白山生物資源與功能分子教育部重點實驗室,吉林延吉 133002)

黃芪水提取液對小鼠抗疲勞作用及ANP分泌的影響

李大勇1賀永貴2劉麗萍2崔 勛2,3

(1.延邊大學體育學院,吉林延吉 133002;2.延邊大學醫(yī)學部基礎(chǔ)醫(yī)學院生理學與病理生理學教研部,吉林延吉 133002;3.長白山生物資源與功能分子教育部重點實驗室,吉林延吉 133002)

觀察黃芪水提取液對小鼠的抗疲勞作用和對血清心房鈉尿肽(ANP)含量的影響。方法:將篩選出的24只昆明種小鼠隨機分成黃芪水提取液組和對照組,每組12只。黃芪水提取液組灌胃給藥劑量為24g/kg(相當于生藥量),對照組灌胃等量生理鹽水。分別灌胃3周,末次給藥1 h后觀察小鼠負重游泳力竭時間和檢測血清中的ANP含量、SOD活性、MDA含量。結(jié)果:灌胃黃芪水提取液組小鼠負重游泳力竭時間明顯延長(與對照組比較,P＜0.01),血清ANP含量顯著增加(與對照組比較,P＜0.01)、SOD活性明顯升高(與對照組比較,P＜0.01)、MDA含量顯著降低(與對照組比較,P＜0.05)。結(jié)論:黃芪水提取液提高小鼠的抗疲勞能力,其作用與增加ANP分泌和提高抗自由基能力有關(guān)。

黃芪;抗疲勞;心房鈉尿肽;超氧化物歧化酶;丙二醛

黃芪始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,別名有王孫、百藥錦、黃耆、箭芪等,位列補藥之長,其主要成分包括黃芪皂苷、黃芪多糖、黃酮類化合物等,味甘,微溫,具有益氣補中、補氣固表、利尿排毒、斂瘡生肌等作用[1],被臨床廣泛應用。近年來,運動醫(yī)學界開始重視借助中藥來消除體力性疲勞與提高機體運動能力的研究,并已取得顯著成果。有研究表明黃芪具有抗疲勞作用,能夠增加小鼠游泳后肝糖元的含量,降低血清乳酸的含量[2]。馬先英等報道黃芪能夠有效抑制脂質(zhì)過氧化反應,提高機體在不同功能狀態(tài)下的抗氧化能力,減輕心肌損傷,從而延長大鼠運動時間,推遲疲勞的發(fā)生[3]。但關(guān)于黃芪對血清心房鈉尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)方面的研究甚少。本研究利用小鼠負重游泳模型觀察黃芪水提液的抗疲勞作用,并探討其對血清ANP分泌及血清SOD、MDA含量的影響。

1 材料

1.1 黃芪水提取液黃芪,4-5年生,產(chǎn)于吉林省和龍市高產(chǎn)村。先將藥材浸泡24 h,然后煎煮3次,每次加入10倍黃芪量的水,每次煎煮120min,將三次濾液混勻,濃縮制得浸膏,用生理鹽水配制成濃度為1g/ml的溶液,4℃冰箱儲存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 動物昆明種小鼠30只,雄性,體重20-22g,由延邊大學醫(yī)學部實驗動物科提供(合格證號:SCXK(吉)2003-0005),飼養(yǎng)環(huán)境溫度為25℃,濕度為70%。

1.3 主要試劑ANP測試盒(批號:070420北京北方生物技術(shù)研究所);SOD測試盒(批號:20051019,購自南京建成生物技術(shù)研究所);MDA測試盒(批號:20051019,購于南京建成生物工程研究所)。

2 方法

2.1 昆明種小鼠分組及負重游泳力竭實驗對實驗小鼠進行習慣性游泳訓練,共游泳2次,兩次之間間隔3天,每次游泳30min。然后在小鼠尾部負重(體重的5%)測量游泳基礎(chǔ)時間,共測3次,每次之間間隔3天。計算3次游泳基礎(chǔ)時間平均值和標準差,選擇游泳基礎(chǔ)時間標準差＜10min的小鼠24只隨機分成給與黃芪水提取液組和對照組,每組12只。給與黃芪水提取液組灌胃給藥,其劑量為24g/kg(相當于生藥量),對照組灌胃等量生理鹽水。灌胃每日1次,持續(xù)3周。每次灌胃后,動物自由進食飲水。第21天灌胃1h后,在小鼠尾部負重(體重的10%)后記錄小鼠游泳力竭時間。游泳水槽的長×寬×高等于58×43×36cm3,水深22cm,水溫28±2℃。判定力竭標準:小鼠沉入水中10s不能浮出水面。

2.2 小鼠血清中 ANP、SOD、MDA含量的測定小鼠測定負重游泳力竭時間后立即脫頸、斷頭取血,離心制備血清后放于-80℃冰箱保存待測。SOD、MDA含量采用比色法進行測定,ANP含量采用放射免疫法進行測定。

2.3 統(tǒng)計學處理統(tǒng)計資料利用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行處理,所有實驗數(shù)據(jù)均用means±SD表示,采用兩樣本 t檢驗(two-Samples t t-test),P＜0.05時認為具有統(tǒng)計學意義。

3 結(jié)果

3.1 黃芪水提取液對小鼠負重游泳時間的影響

黃芪水提取液能夠明顯延長小鼠的游泳力竭時間,與對照組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.05,見表1)。

表1 黃芪水提液對小鼠負重游泳力竭時間的影響

3.2 黃芪水提取液對小鼠血清中 ANP、SOD、MDA含量的影響

黃芪水提取液能夠使小鼠血清中的ANP和SOD含量顯著增加,與對照組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);MDA含量顯著降低,與對照組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

表2 黃芪水提取液對小鼠血清ANP、SOD、MDA含量的影響

4 討論

本實驗結(jié)果表明,黃芪水提取液能夠明顯延長小鼠的負重游泳力竭時間,這與呂紅等人[4]報道的復方黃芪提取液能夠延長小鼠游泳時間的實驗結(jié)果相吻合。

疲勞發(fā)生的原因和發(fā)生機制至今尚不明確,但是氧自由基和脂質(zhì)過氧化過程參與了疲勞的發(fā)生發(fā)展過程已經(jīng)是一個不爭的事實。在機體內(nèi)SOD是抗氧化系統(tǒng)中重要的酶,在清除自由基方面起到非常關(guān)鍵的作用[5]。本實驗結(jié)果顯示,黃芪水提取液能夠使小鼠血清中的SOD含量增加,MDA含量降低。表明SOD能清除脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物,并阻止脂質(zhì)過氧反應,這是黃芪水提液使小鼠血清中MDA水平降低的主要原因。提示抗自由基途徑是黃芪水提取液發(fā)揮抗疲勞作用的途徑之一。

另外,本實驗還發(fā)現(xiàn)黃芪水提液能使力竭游泳小鼠血清中ANP含量顯著增加。ANP是心房肌細胞生成和分泌的鈉尿肽家族激素中的第一個成員。心房肌細胞生成ANP以后,以ANP前激素原形式儲存于心房肌細胞的特異性分泌顆粒中,當受到相應刺激時釋放出來,并經(jīng)過蛋白水解等加工過程,最終以具有24-28個氨基酸的肽類激素形式參與血液循環(huán)。Shono等[6]研究表明,ANP能夠減輕氧化應激反應。提示黃芪水提取液通過增加心房ANP的分泌,調(diào)節(jié)抗氧化反應亦是其發(fā)揮抗疲勞作用的有效途徑之一。

綜上所述,黃芪水提取液增強小鼠的抗疲勞能力,其作用可能與增加心房ANP分泌及提高抗自由基作用有關(guān)。當然其具體作用機制有待于進一步深入研究。

[1]趙厚熙.中藥黃芪在防治心血管疾病方面的作用研究[J].當代醫(yī)藥衛(wèi)生.2005,2(8):39-40.

[2]朱華野,樸龍.黃芪提取物抗炎、鎮(zhèn)痛、耐缺氧及抗疲勞作用的研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2007,18(5):1156-1157.

[3]馬先英,孔喜良.黃芪生藥對運動大鼠心肌自由基損傷的研究[J].中國體育科技,2007,43(5):132-135.

[4]呂紅,郭偉東,楊潔,等.復方黃芪提取液抗運動性疲勞的實驗研究[J].山東體育學院學報,2004,20(5):48-50.

[5]Gutteridge JM,Halliwell B.Free radicals and antioxidants in the year 2000:A historical look to the future.Ann N YAcad Sci,2000,899:136-147.

[6]Shono M,Y oshimura M,Nakayama M,Yamamuro M,Abe K,Suzuki S,Mizuno Y,Sugiyama S,Saito Y,Nakao K,Yasue H,Ogawa H.Predominant Effect of A-Type Natriuretic Peptide on Reduction of Oxidative Stress During the Treatment of Patients With Heart Failure.Circ J,2007,71:1040-1046.

Anti-fatigue Effects and Changes of Serumal ANP Levels of Radix Astragali in Mice

Li Dayong1,He Yonggui2,Liu Liping2,Cui Xun2,3
(1.Physical Education College Yanbian University,Yanji,133002,Jilin,China;2.Department of Physiology and Pathophysiology,College of Medicine,Yanbian University Yanji,133002,Jilin,China;3.Key Laboratory of Natural Resources of Changbai Mountain&Functional Molecular,Yanbian University,Yanji,133002,Jilin,China)

T o investigate the effects of Radix Astragali aqueous extract on ANP secretion and its function in exhaustive swimming mice.Methods:24 mice will be selected from30 mice then random divided into two groups(control group,Radix Astragali aqueous extract group),and it is twelve in every group.The dose of Radix Astragali aqueous extract will be intragastric administration according to correspondent crude drug(24g/kg).The control group will be administrated by physiological saline.The loading swimming time will be determined after intragastric administration one hour in 21day.Then,the blood were obtained by extirpating eyeball in mice.SOD and MDA were determined by centrifuging the blood.Results Water extract of Radix astragali(24g/Kg)significantly extended the period of to reched exhaustion(P＜0.01 vs control)and increased serumal SOD activity in weight loading swimming mice(P＜0.01 vs control)after intragastric administration for 3 weeks.But the levels of MDA in serum was obviously decreased by Radix astragali treatment(P＜0.05 vs control).Conclusion Radix astragali aqueous extract plays an important role in anti-fatigue.It’s possible that Radix Astragali via enhancing anti-free radical and increased serumal ANP level to achieving anti-fatigue effects.

radix astragali;anti-fatigue;ANP;SOD;MDA

G804.2

A

1672-1365(2011)02-0077-02

2010-08-13;

2010-10-12

吉林省教育廳項目,吉教科合字(2008)第4號與吉林省體育局項目(10D14)共同資助。

李大勇(1979-),男,吉林松原人,碩士,講師,研究方向:運動生理及體育教育訓練學。