傅建邦

南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校第一附屬醫(yī)院，河南南陽(yáng) 473058

ZTC1+1澄清劑在復(fù)方板藍(lán)根顆粒生產(chǎn)工藝中的應(yīng)用

傅建邦

南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校第一附屬醫(yī)院，河南南陽(yáng) 473058

目的探討使用天然澄清劑ZTC1+1精制法替代水提醇沉法，提高復(fù)方板藍(lán)根顆粒有效成分的提取率。方法通過(guò)澄清劑用量試驗(yàn)，選擇澄清劑最佳用量比例，以干浸膏收得率和含氮量評(píng)價(jià)澄清劑ZTC1+1的澄清精制效果。結(jié)果制備復(fù)方板藍(lán)根顆粒選用ZTC1+1澄清劑量以A劑0.15%、B劑0.30%的加入比為最佳，使用ZTC1+1澄清劑精制法干浸膏相對(duì)收得率為163.39%，相對(duì)含氮量174.41%。結(jié)論使用ZTC1+1澄清劑精制法明顯優(yōu)于水提醇沉再水沉法，且能縮短生產(chǎn)周期，降低能源及材料消耗。

復(fù)方板藍(lán)根顆粒；ZTC1+1澄清劑；生產(chǎn)工藝；應(yīng)用

在復(fù)方板藍(lán)根顆粒提取精制過(guò)程中，利用水提醇沉的方法除去提取液中大部分的蛋白質(zhì)、果膠、黏液質(zhì)、多糖、多肽、有機(jī)酸等大分子物質(zhì)。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)這些大分子物質(zhì)中，有機(jī)酸、多糖、多肽等具有一定治療價(jià)值，在精制過(guò)程中除去它們，不利于藥物療效的充分發(fā)揮[1]。鑒于此，采用天然澄清劑澄清精制法代替水提醇沉工藝，以降低多糖、氨基酸、有機(jī)酸等成分的損失。該方法在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中比老工藝更簡(jiǎn)單快速，費(fèi)用低廉，安全方便，對(duì)生產(chǎn)設(shè)備要求低，增加制劑穩(wěn)定性。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

ZTC1+1澄清劑（Ⅱ型）（天津振天成科技有限公司）；DL6M低速大容量離心機(jī)（湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司）；氫氧化鈉、硫酸鉀、硫酸銅、醋酸、硫酸、硼酸、鹽酸均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 水提取液的制備 取板藍(lán)板300 g、大青葉450 g，加純化水浸泡30 min，煎煮2次，第1次1.5 h，第2次1 h，合并2次水煎液，濃縮至1∶3，備用。

1.2.2 澄清劑評(píng)價(jià)指標(biāo) 藥液的含量和澄清度受ZTC1+1澄清劑用量的直接影響，所以ZTC1+1澄清劑的澄清效果用澄清劑用量、藥液干浸膏收得率、含氮量3項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)[2]。

1.2.3 澄清劑的配制 A劑：取A組份5 g，加入5 mL 1%醋酸溶液溶解并攪成糊狀，然后加入95 mL 1%醋酸，溶脹24 h，攪拌，配制成5%黏膠液。B劑：取B組份10 g，加入5 mL去純化水?dāng)嚦珊隣?，然后加?5 mL去純化水，溶脹24 h，攪拌，配制成10%黏膠液。用前搖勻。

1.2.4 澄清劑用量試驗(yàn) 取帶有刻度的試管6支，每支試管中加入1∶3水煎藥液100 mL，加熱至70～80℃，分別攪拌加入 B 劑 1、2、3、4、5、6 mL，每 30 分鐘攪拌 1 次。2 h后，使溫度保持在50～60℃加入同B劑體積相等的A劑，45min后攪拌。最后再加熱至80℃ 20 min，并保持試管垂直靜置8 h。結(jié)果顯示：試管①中沉淀物的高度最低，其次是試管⑥、試管③中沉淀物的高度最高。最后確定每100 mL水煎藥液（1∶3）加ZTC1+1澄清劑A劑和B劑各3 mL為最佳。

1.2.5 樣品浸膏的制備 取1∶3的水提取液1 000 mL，加ZTC1+1澄清劑B劑30 mL，使溫度保持在70～80℃，每30 分鐘攪拌1次，可見(jiàn)藥液明顯變混，或可見(jiàn)小的絮狀物。2 h后，加入A劑30 mL，使溫度保持在50～60 ℃，45 min后再攪拌一次，可見(jiàn)明顯的絮狀物，上清液透明，無(wú)乳光。澄清液離心后過(guò)濾，濾液再濃縮至每毫升浸膏中含原藥材1 g；同時(shí)按水提醇沉工藝制備同濃度浸膏，備用。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 干浸膏收得率的測(cè)定

分別精取上述2種方法制備的樣品浸膏約30 g，于105℃干燥至恒重，計(jì)算兩樣品干浸膏收得率和干浸膏相對(duì)收得率（以水提醇沉法干浸膏收得率為100%來(lái)計(jì)算）。結(jié)果表明，ZTC1+1澄清劑澄清法制得的水提取液的干浸膏相對(duì)收得率為163.39%。見(jiàn)表1。

表1 樣品浸膏干浸膏收得率和相對(duì)收得率（%）

2.2 含氮量檢測(cè)和結(jié)果[3]

分別精取上述2種方法制備的樣品浸膏3 mL，加入2支500 mL凱氏燒瓶中，按照2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄Ⅸ L氮測(cè)定法中的常量法進(jìn)行含氮量檢測(cè)，最后所得餾出液250 mL，用0.05 mol/L H2SO4滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙⒌味ǖ慕Y(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1毫升H2SO4液（0.05 mol/L）相當(dāng)于1.401 mg的氮。計(jì)算兩樣品含氮量和相對(duì)含氮量（以水提醇沉法樣品含氮量為100%來(lái)計(jì)算）。結(jié)果表明，ZTC1+1澄清劑澄清法制得的水提取液的相對(duì)含氮量為174.41%。見(jiàn)表2。

表2 樣品溶液含氮量和相對(duì)收得率（%）

3 討論

制備復(fù)方板藍(lán)根顆粒選用ZTC1+1澄清劑量以A劑0.15%、B劑0.3%的加入比為最佳。應(yīng)用ZTC1+1澄清劑澄清法制得的水提取液干浸膏收得率和含氮量明顯高于水提醇沉法。同時(shí)ZTC1+1澄清劑澄清法不需要使用乙醇等有機(jī)溶劑，不用進(jìn)行溶劑回收，能夠縮短生產(chǎn)周期，節(jié)省能源及材料。因此，澄清劑澄清法生產(chǎn)工藝較水提醇沉法更有應(yīng)用價(jià)值。

含氮量測(cè)定過(guò)程中，使用硫酸、過(guò)氧化氫（1∶4）混合溶液的目的是為了加速消解反應(yīng)，但必須要等樣品浸膏完全碳化后再加入。否則消解反應(yīng)過(guò)于激烈，產(chǎn)生大量氣泡，被消解的溶液容易溢出凱氏燒瓶，造成實(shí)驗(yàn)失敗。

復(fù)方板藍(lán)根顆粒的定性鑒別是以靛紅玉和精氨酸為鑒定物質(zhì)。靛玉紅、靛藍(lán)是板藍(lán)根和大青葉中主要化學(xué)成分，是脂溶性物質(zhì)，在水提醇沉過(guò)程中，已經(jīng)丟失大部分[2]，同時(shí)也會(huì)使氨基酸等成分丟失，給復(fù)方板藍(lán)根顆粒成品鑒別帶來(lái)困難。因此采用水提醇沉法生產(chǎn)的復(fù)方板藍(lán)根顆粒以靛玉紅、靛藍(lán)、精氨酸作為鑒定指標(biāo)不盡合理。同時(shí)水提醇沉法還會(huì)造成具有生物活性的非免疫源蛋白質(zhì)凝集素、有抗內(nèi)毒素作用的有機(jī)酸丟失。張曦等[4]對(duì)復(fù)方板藍(lán)根顆粒的提取工藝進(jìn)行了改進(jìn)，先用70%乙醇提取大青葉，然后再用水提取大青葉藥渣和板藍(lán)根，最后合并提取液，低溫濃縮至膏狀[4]。此法雖然較水煎煮提取法提高了靛玉紅、靛藍(lán)、凝集素等的提取率，但在最后精制仍然會(huì)使部分靛玉紅、靛藍(lán)丟失。所以，不管采用什么提取方法，在精制時(shí)加用澄清劑澄清都能提高產(chǎn)品收得率。

[1]顏紅.天然澄清劑在中藥水提液澄清工藝中的應(yīng)用[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2005，11（1）：80.

[2]張萍，吳月國(guó)，劉驊.ZTCl+1-Ⅱ澄清劑用于中藥水提液澄清[J].中國(guó)中藥雜志，2007，32（2）：113-115.

[3]傅強(qiáng).藥物分析實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：237.

[4]張曦，周志生.正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選復(fù)方板藍(lán)根沖劑的處方組成和提取工藝[J].海峽藥學(xué)，2004，16（4）：24.

R282.4

B

2095-0616（2011）19-142-01

2011-08-25）