冷靜，鄧斌，李琦華，楊舒黎，茍瀟，毛華明

（云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明650201）

商品奶與原料奶中農(nóng)藥與亞硝酸鈉殘留分析

冷靜，鄧斌，李琦華，楊舒黎，茍瀟，毛華明

（云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明650201）

采用高效氣相色譜(GC)分析法對(duì)商品奶和原料奶中農(nóng)藥和亞硝酸鈉殘留進(jìn)行分析，并分析不同飼養(yǎng)模式對(duì)原料奶中農(nóng)藥殘留的影響。結(jié)果表明：在所測(cè)定的5種農(nóng)藥中，甲胺磷、敵敵畏和馬拉硫磷等3種農(nóng)藥殘留檢出率較高，商品奶為45.0%～67.5%，原料奶為46.8%～71.2%。商品奶和原料奶中甲胺磷、敵敵畏、敵百蟲(chóng)、馬拉硫磷和倍硫磷檢出率和殘留量差異不顯著(P﹥0.05)；而商品奶和原料奶中亞硝酸鈉檢出率和殘留量差異極顯著(P﹤0.01)。原料奶中5種農(nóng)藥加權(quán)平均檢出率、農(nóng)藥加權(quán)平均殘留量和加權(quán)殘留總量均為規(guī)?；曫B(yǎng)顯著低于農(nóng)戶(hù)散養(yǎng)和合作社飼養(yǎng)(P﹤0.05)，后兩者之間無(wú)顯著差異(P﹥0.05)。

氣相色譜法；商品奶；原料奶；農(nóng)藥；亞硝酸鈉；飼養(yǎng)模式

0 引言

云南昆明的奶源生產(chǎn)地主要種植蔬菜和花卉，因此，在這些地區(qū)的奶牛飼養(yǎng)中，規(guī)模化、合作社和農(nóng)戶(hù)都用蔬菜和花竿等作為主要的青綠飼料來(lái)源。據(jù)調(diào)查，在這些地區(qū)的蔬菜種植中存在農(nóng)藥用量過(guò)大，使用高殘留的禁用農(nóng)藥等現(xiàn)象。云南牛奶產(chǎn)業(yè)是否存在農(nóng)藥殘留污染情況？牛奶加工中是否會(huì)對(duì)農(nóng)藥和亞硝酸鈉殘留產(chǎn)生影響？飼養(yǎng)模式對(duì)原料奶中的農(nóng)藥殘留有何影響？這些都是我省牛奶安全生產(chǎn)中急需解決的問(wèn)題。

本研究對(duì)市售商品奶和生產(chǎn)基地中原料奶的農(nóng)藥和亞硝酸鈉殘留情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并監(jiān)測(cè)不同飼養(yǎng)模式對(duì)原料奶中農(nóng)藥殘留的情況。依據(jù)監(jiān)測(cè)分析結(jié)果，確立牛奶養(yǎng)殖模式、生產(chǎn)加工過(guò)程中農(nóng)藥污染及亞硝酸鈉殘留的關(guān)鍵因素，為云南乳業(yè)的健康發(fā)展提出理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2004年12 月至2005年3月，從云南省昆明市原料奶生產(chǎn)基地及奶牛合作社采集原料奶，共94個(gè)樣品。另從昆明市各大超市購(gòu)買(mǎi)原料奶生產(chǎn)基地奶源生產(chǎn)的袋裝和盒裝液態(tài)奶，共40份樣品。對(duì)所采集原料樣品與商品樣品進(jìn)行農(nóng)藥與亞硝酸鈉殘留量測(cè)定，并對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行分析比較，研究牛奶從奶牛產(chǎn)乳到牛奶上市過(guò)程中農(nóng)藥與亞硝酸鈉殘留變化情況。采集規(guī)?；曫B(yǎng)模式、合作社飼養(yǎng)模式和農(nóng)戶(hù)散養(yǎng)模式原料奶樣各40份，進(jìn)行農(nóng)藥殘留分析。

1.2 儀器與試劑

紫外分光光度計(jì)（HP8453），美國(guó)惠普公司；高效氣相色譜儀（HP5890），美國(guó)惠普公司；電子天平（AG245，PB303，PB5001），瑞士梅特勒公司，感應(yīng)量0.01 mg；超純水裝置（MiLLipore-S.A.67120），美國(guó)；CQX25-24超聲波清洗器，上海必能信超聲有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（RE-52A），上海亞榮生化儀器廠；微孔濾膜（0.45um），市售。

亞硝酸鈉(Sodium nitrite)，含量99.3%；敵百蟲(chóng)（Trichlorfon），含量97.8%；甲胺磷(Methamidophos),含量99.1%；敵敵畏(Dichlorvos),含量99.7%；馬拉硫磷(Malathion),含量97.3%；倍硫磷(Fenthion),含量97.7%；以上標(biāo)準(zhǔn)品均由Sigma公司提供；丙酮（色譜純）；亞鐵氰化鉀、鹽酸、乙酸鋅、無(wú)水對(duì)氨基苯磺酸、二鹽酸-1-萘乙二胺、乙腈、二氯甲烷、丙酮、正己烷、無(wú)水硫酸鈉和氯化鈉均為分析純。

1.3 牛奶樣品制備

測(cè)定亞硝酸鈉奶樣：吸取牛奶10.0 mL于25 mL容量瓶中，加約10 mL 50℃左右的蒸餾水搖勻，慢慢加入亞鐵氰化鉀溶液0.5 mL搖勻，再加入0.5 mL乙酸鋅溶液以沉淀蛋白質(zhì)，加水至刻度，混勻。放置30 min，過(guò)濾，棄去初濾液5 mL，濾液備用。

測(cè)定農(nóng)藥奶樣：取10 mL牛奶，加入丙酮-二氯甲烷（1+1，V+V）40 mL超聲波提取30 min,重復(fù)提取1次，合并兩次提取液，過(guò)濾后加入30 mL飽和氯化鈉水溶液分配，取出下層溶液，上層溶液再分別用30 mL和20 mL二氯甲烷分配兩次，合并3次分配液，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后，濾入雞形瓶中。在55℃溫度下減壓濃縮至干,揮干后的殘留物用15 mL正己烷溶解，溶解液分別以20，15，10 mL乙腈分配3次，合并3次分配液，再次以55℃溫度下減壓濃縮至干，揮干后的殘留物用1 mL色譜純丙酮溶解過(guò)濾膜后上機(jī)測(cè)定。

1.4 測(cè)定方法

亞硝酸鈉的測(cè)定方法見(jiàn)劉蓮芳[1]和曾壽瀛[2]方法。5種含磷農(nóng)藥用丙酮-二氯甲烷（1+1，V+V）提取牛奶中有機(jī)磷農(nóng)藥，測(cè)定步驟參見(jiàn)王兆基[3]和Masatake,Toyoda[4]方法。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

用SAS(6.12)統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 農(nóng)藥與亞硝酸鈉殘留分析

對(duì)所采集的商品奶40個(gè)樣品和原料奶94個(gè)樣品測(cè)定了6個(gè)殘留指標(biāo)。測(cè)定結(jié)果如表1所示。

由表1可以看出，商品奶和原料奶中農(nóng)藥與亞硝酸鈉殘留現(xiàn)狀不容樂(lè)觀。商品奶和原料奶中甲胺磷、敵敵畏和馬拉硫磷檢出率范圍在45.0%～71.2%之間，敵百蟲(chóng)和倍硫磷檢出率在18.0%～25.0%之間。其中商品奶中亞硝酸鈉的檢出率達(dá)92.5%，而原料奶為65.9%。商品奶和原料奶中甲胺磷和敵敵畏平均殘留量較高，范圍在0.068～0.081 mg/kg之間，敵百蟲(chóng)和倍硫磷平均殘留量較低，在0.005 mg/kg以下。商品奶中亞硝酸鈉的平均殘留量高達(dá)0.127 mg/kg，而原料奶僅為0.027 mg/kg。從檢出率和平均殘留量綜合分析，商品奶和原料奶應(yīng)該重點(diǎn)控制亞硝酸鈉和農(nóng)藥中的甲胺磷、敵敵畏和馬拉硫磷，而敵百蟲(chóng)和倍硫磷殘留較小，可以不必考慮殘留控制。從亞硝酸鈉的綜合數(shù)據(jù)說(shuō)明亞硝酸鈉在牛奶生產(chǎn)加工過(guò)程中控制不嚴(yán)格。

2.2 殘留指標(biāo)差異顯著性比較

對(duì)商品奶與原料奶中各農(nóng)藥的檢出率和平均殘留量的差異顯著性檢驗(yàn)結(jié)果如表2所示。

由表2可以看出，商品奶和原料奶中5種農(nóng)藥的檢出率和殘留量差異不顯著(P﹥0.05)；而商品奶和原料奶中亞硝酸鈉檢出率和殘留量差異極顯著(P﹤0.01)。奶牛產(chǎn)乳到牛奶上市過(guò)程中，五種農(nóng)藥殘留指標(biāo)無(wú)顯著變化，而亞硝酸鈉殘留指標(biāo)顯著增高。由此，可以得出以下結(jié)論：牛奶加工過(guò)程沒(méi)有造成農(nóng)藥污染，但牛奶加工過(guò)程中有亞硝酸鈉污染。

2.3 不同飼養(yǎng)模式對(duì)原料奶中農(nóng)藥殘留影響分析

對(duì)規(guī)?；?、合作社和農(nóng)戶(hù)3種不同飼養(yǎng)模式下，原料奶中5種農(nóng)藥殘留的加權(quán)平均檢出率、加權(quán)平均殘留量和加權(quán)殘留總量進(jìn)行差異顯著性分析（表3）。由表3可見(jiàn)，原料奶中5種農(nóng)藥加權(quán)平均檢出率、農(nóng)藥加權(quán)平均殘留量均為規(guī)模化飼養(yǎng)模式顯著低于農(nóng)戶(hù)散養(yǎng)和合作社飼養(yǎng)模式(P﹤0.05)，后兩者之間無(wú)顯著差異(P﹥0.05)。

表3 不同飼養(yǎng)模式對(duì)原料奶中農(nóng)藥殘留的影響

3 結(jié)束語(yǔ)

商品奶和原料奶中農(nóng)藥殘留和亞硝酸鈉殘留均不太低，加工過(guò)程對(duì)農(nóng)藥殘留無(wú)影響，但對(duì)亞硝酸鈉殘留有顯著影響。規(guī)?；曫B(yǎng)模式中原料奶農(nóng)藥殘留量顯著低于農(nóng)戶(hù)和合作社飼養(yǎng)模式。

牛奶生產(chǎn)地不同，農(nóng)藥殘留也不同，控制農(nóng)殘要因地制宜。根據(jù)上述結(jié)果，可以確定云南昆明地區(qū)牛奶中應(yīng)該重點(diǎn)控制甲胺磷、敵敵畏和馬拉硫磷等3種農(nóng)藥殘留。在牛奶加工過(guò)程中要重點(diǎn)控制亞硝酸鈉再次污染，根據(jù)這一情況，需要建立亞硝酸鈉的控制措施，嚴(yán)格控制原料奶加工用水中亞硝酸鈉殘留，嚴(yán)格控制各個(gè)加工環(huán)節(jié)，避免亞硝酸鈉污染?？偠灾?，選擇合格的奶牛飼料原料，嚴(yán)格控制牛奶加工過(guò)程是控制牛奶中農(nóng)藥和亞硝酸鈉殘留的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

云南省原料奶生產(chǎn)模式有規(guī)模化生產(chǎn)、合作社和農(nóng)戶(hù)散養(yǎng)3種模式，規(guī)?；曫B(yǎng)模式中原料奶農(nóng)藥殘留量顯著低于農(nóng)戶(hù)和合作社飼養(yǎng)模式。合作社和農(nóng)戶(hù)飼養(yǎng)模式都為農(nóng)戶(hù)各自飼養(yǎng)管理奶牛，各農(nóng)戶(hù)飼喂奶牛的飼料原料來(lái)源各不相同，奶牛飼料結(jié)構(gòu)也不相同，因此不可能統(tǒng)一控制奶牛進(jìn)食飼料的農(nóng)藥污染。而規(guī)?；a(chǎn)模式由于奶牛飼養(yǎng)量大，飼料原料進(jìn)貨量多且渠道穩(wěn)定，奶牛飼料結(jié)構(gòu)一致，易于對(duì)飼料農(nóng)殘進(jìn)行監(jiān)測(cè)。在原料奶生產(chǎn)過(guò)程中，生產(chǎn)企業(yè)不能一味追求低成本，而放松原料質(zhì)量檢測(cè)與控制，加強(qiáng)飼料原料質(zhì)量控制是保證飼料中農(nóng)藥殘留不超標(biāo)的另一關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

[1] 劉蓮芳.食品添加劑分析檢驗(yàn)手冊(cè)[M].北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社,1999:145-146.

[2] 曾壽瀛.現(xiàn)代乳與乳制品加工技術(shù)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2003:340-341.

[3] 王兆基.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定牛奶中有機(jī)氯和有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量[J].分析化學(xué),1998(2):158-161.

[4] TOYODA M.牛奶中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量簡(jiǎn)便分析法[J].農(nóng)藥叢譯,1992(2):49-51.

Analysis of pesticide residues and sodium nitrite in commercial milk and raw milk

LENG Jing,DENG Bin,LI Qi-hua,YANG Shu-li,GOU Xiao,MAO Hua-ming
(College of Animal Science and Technology,Yunnan Agricultural University,Yunnan Provincial Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed Science,Kunming 650201，China)

The gas chromatograph(GC)method was used for analysis of pesticide residues and sodium nitrite residues in commercial milk and raw milk,and also analysis the effect of feeding pattern on pesticide residues in raw milk.The results showed that:Among five pesticides,Methamidophos,Dichlorvos and Malathion had high detection rate of pesticide residue,45.0%～67.5%with commercial milk,and 46.8%～71.2%with raw milk.The detection rate and the residual quantity of Methamidophos,Dichlorvos,Trichlorfon,Malathion and Fenthion were no significant difference between commercial milk and raw milk(P﹥0.05);but the detection rate and the residual quantity of sodium nitrite had significant difference between commercial milk and raw milk(P﹤0.01).weighted average of detection rate,weighted average residual quantity and weighted total residual quantity of five pesticides were all large-scale farmers significantly lower than backyard farmers and cooperative breeding farmers(P﹤0.05),and the were no significant difference between the later two feeding pattern(P﹥0.05).

gas chromatograph；commercial milk；raw milk；pesticide residues；sodium nitrite；feeding pattern

TS252.7

A

1001-2230（2011）01-0050-03

2010-09-14

云南省重大科技攻關(guān)項(xiàng)目(2004NG04)；科技部科技人員服務(wù)企業(yè)項(xiàng)目（2009GJF30034）；云南省科技強(qiáng)省創(chuàng)新項(xiàng)目(2008LA008)。

冷靜（1972-），女，副教授，研究方向?yàn)榉雌c動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)。

毛華明