張建軍，王景霞，李偉，歐麗娜，陳振振，葛陽

白芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall.的根，味苦、酸，性微寒，歸肝、脾經(jīng)。酸性收斂，有補血斂陰，柔肝緩急之功，因而白芍既能養(yǎng)肝血，又能柔肝體，最能順應肝之特性，為養(yǎng)血柔肝的代表[1]?！陡登嘀髋啤吩趹冒咨值?4證中，以白芍為君藥者12證，其病機以肝失條達，氣郁不舒為主。傅氏曾言: “病之在肝者，(白芍)尤不可不用?！备涡远嘤簦B(yǎng)血柔肝解郁，是白芍臨床應用的一個重要特色[2]。

白芍的主要成分為一組單萜苷類物質(zhì)，包括芍藥苷（Paeoniflorin，PF）、芍藥內(nèi)酯苷(albiflorin，AF)等，已有研究表明芍藥苷有多方面藥理活性[3～4]，而白芍另一主要成分芍藥內(nèi)酯苷藥理作用的報道尚不多見。據(jù)報道，白芍水煎劑、乙醇提取物、總單萜苷以及芍藥苷有抗抑郁作用[5～9]。本文根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論對白芍的認識，以及白芍的中醫(yī)臨床應用經(jīng)驗和現(xiàn)代研究報道，對芍藥內(nèi)酯苷進行抗抑郁作用的研究，以期進一步揭示白芍抗抑郁的有效成分。

1 實驗材料

1.1 實驗藥物

受試藥：芍藥內(nèi)酯苷，自制，純度大于96%；陽性藥：鹽酸氟西?。‵luoxetine, Prozac百憂解），禮來蘇州制藥有限公司，批號：A333341-070608。

1.2 實驗動物

ICR小鼠，雄性，體重18-22g。由維通利華動物實驗中心提供，合格證編號：SCXK（京）2007-0001。動物購入后，適應一周，常規(guī)飼養(yǎng)。

1.3 儀器

JZ100型100g張力換能器(高碑店市新航機電設備有限公司)，Medlab生物信號采集系統(tǒng)（南京易美科技有限公司），Sony數(shù)碼攝像機（上海索廣電子有限公司），XZC-1型小鼠自主活動儀（黑龍江省牡丹江市中華電器廠），秒表，玻璃缸。

2 實驗方法

2.1 分組和給藥

取正常小鼠100只，按隨機區(qū)組法分為5組，即空白組、百憂解組、芍藥內(nèi)酯苷14、7、3.5mg/kg劑量組。各組均按0.2ml/l0g體重灌胃，空白組給去離子水。以上各組連續(xù)7天給藥，于末次給藥1h后進行實驗。

2.2 小鼠懸尾實驗[10]

將小鼠尾端(距尾尖2cm處)用膠布固定在100g張力換能器的連線上，使其呈倒懸狀態(tài)，頭部離實驗臺約15cm，換能器連接到Medlab生物信號采集系統(tǒng)，適應2min后，記錄4min內(nèi)的不動時間(s)。

2.3 小鼠強迫游泳實驗[10]

將小鼠單個放入高20cm、直徑18cm、水深10cm、水溫23±2℃的水缸中，觀察6min，適應2min，記錄后4min內(nèi)累計不動時間(s)。

2.4 對小鼠自主活動的影響[10]

將小鼠放入小鼠光電計數(shù)儀活動箱，適應環(huán)境10min后，觀察5min內(nèi)小鼠的活動次數(shù)。每只小鼠測試完畢用濕布擦拭活動儀，清除糞便，繼用干布擦凈后再進行下一只小鼠的測試。

2.5 統(tǒng)計學處理

3 實驗結(jié)果

3.1 芍藥內(nèi)酯苷對小鼠懸尾不動時間的影響

結(jié)果表明，給予芍藥內(nèi)酯苷14，7mg/kg能明顯縮短小鼠懸尾不動時間，與空白組比較差異顯著（P<0.01，0.05）。見表1。

表1 芍藥內(nèi)酯苷對小鼠懸尾不動時間的影響（）

表1 芍藥內(nèi)酯苷對小鼠懸尾不動時間的影響（）

注：與空白組比較， ** P<0.01，* P<0.05

組別 劑量(mg/kg) n 不動時間（s）空白組 —— 20 64.92±54.620鹽酸氟西汀 3.5 20 30.15±44.888*芍藥內(nèi)酯苷 14 20 27.45±34.097**7 20 33.65±43.762*3.5 20 44.85±59.695

3.2 芍藥內(nèi)酯苷對小鼠強迫游泳不動時間的影響

結(jié)果顯示，芍藥內(nèi)酯苷14，7mg/kg均能明顯縮短小鼠游泳不動時間，與空白組比較差異顯著（P<0.05），結(jié)果見表2。

表2 芍藥內(nèi)酯苷對小鼠強迫游泳不動時間的影響（）

表2 芍藥內(nèi)酯苷對小鼠強迫游泳不動時間的影響（）

注：與空白組比較， * P<0.05

組別 劑量(mg/kg) n 不動時間（s）空白組 —— 20 89.115±35.391鹽酸氟西汀 3.5 20 56.725±31.340*芍藥內(nèi)酯苷 14 20 55.335±30.684*7 20 63.025±39.461*3.5 20 75.763±36.892

3.3 芍藥內(nèi)酯苷對小鼠自主活動的影響

結(jié)果顯示，各劑量芍藥內(nèi)酯苷對小鼠的自主活動無明顯影響( P > 0.01)，提示芍藥內(nèi)酯苷無中樞興奮或抑制作用，結(jié)果見表3。

表3 芍藥內(nèi)酯苷對小鼠自主活動的影響（）

表3 芍藥內(nèi)酯苷對小鼠自主活動的影響（）

組別 劑量(mg/kg) n 活動次數(shù)空白組 —— 20 125.00±32.78鹽酸氟西汀 3.5 20 101.87±33.47芍藥內(nèi)酯苷 14 20 101.27±43.43 7 20 102.20±34.48 3.5 20 107.13±20.55

4 討論

肝郁，中醫(yī)認為可引起情志疾病，與現(xiàn)代醫(yī)學的慢性心理應激（應激）一致，而應激可導致抑郁癥。應激損傷的病位主要在肝[11]?！案误w陰而用陽”，性剛而喜柔，肝之體以陰為養(yǎng)，以柔為生，藏血充足是疏泄正常的前提，因此，養(yǎng)血柔肝解郁至關重要。治肝大家王旭高體會“肝氣脹甚，疏之更甚者，當柔肝”。張山雷指出：“肝陰耗損之證，專事疏肝不獨無效，反增其燥傷陰血，柔可馭之?！比~天士云：“肝為剛臟，當濟之以柔藥”。解郁多用疏肝理氣法，但如果患者素秉陰虛之質(zhì)，或郁久化熱傷陰者，即不可再用疏理，以疏理之藥多香燥，往往出現(xiàn)愈疏愈郁，而柔肝解郁法即為有效良法，白芍即為中醫(yī)應用該法的首選藥物。

本實驗采用小鼠抑郁動物模型對芍藥內(nèi)酯苷進行研究，探討其抗抑郁作用。小鼠懸尾試驗和小鼠強迫游泳試驗為經(jīng)典的抗抑郁小鼠實驗，具有簡單、敏感和可靠性較強的特點[12]，因此本研究首先采用這兩個模型結(jié)合小鼠自主活動實驗進行初步研究，結(jié)果表明芍藥內(nèi)酯苷具有抗抑郁作用。

已有研究報道和本研究結(jié)果提示，白芍抗抑郁的主要有效成分可能是芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷，兩者是通過單獨的機制來發(fā)揮抗抑郁作用，還是具有協(xié)同作用，或是兩者兼具，還有待于進一步研究。本研究為深入研究白芍抗抑郁的有效成分和作用機制奠定了基礎。

[1] 高學敏.中藥學[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2007,463.

[2] 李秀玉.《傅青主女科》白芍應用辨析[J].北京中醫(yī),1999,3:16.

[3] 陳四平,張浩,李相坤,等.中藥白芍的研究進展[J].承德醫(yī)學院學報,2008,15(3):293.

[4] 孫麗榮,曹雄,侯鳳青.芍藥苷研究進展[J].中國中藥雜志,2008,33(18):2028.

[5] 邵繼紅,韓珍,楊艷,等.白芍抗抑郁作用的實驗研究[J].寧夏醫(yī)學雜志,2008,30(6):490.

[6] Mao Q ,Huang Z,IP S,et al.Antidepressant-like effect of ethanol extract from Paeonia lactiflora in mice [J].Phytother Res,2008,22(11):1496.

[7] 王景霞,張建軍,李偉,等.白芍提取物對慢性應激抑郁模型大鼠行為學及大腦皮質(zhì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志,2010,25(11):1895.

[8] Mao QQ, Ip SP, Ko KM, et al. Peony glycosides produce antidepressant-like action in mice exposed to chronic unpredictable mild stress:effects on hypothalamic-pituitaryadrenal function and brain-derived neurotrophic factor[J]. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry,2009, 33(7):1211.

[9] 崔廣智.芍藥苷抗抑郁作用的實驗研究[J].現(xiàn)代藥物與臨床,2009,24(4):231.

[10] 張均田.現(xiàn)代藥理實驗方法[M].北京:北京醫(yī)科大學中國協(xié)和醫(yī)科大學聯(lián)合出版社,1998,1061.

[11] 李峰,楊維益,梁嶸,等.從中醫(yī)學看肝臟調(diào)節(jié)應激反應的作用[J].北京中醫(yī)藥大學學報,1998,21(1):20.

[12] 呂俊華,鐘玲.實驗性抑郁癥動物模型的評價[J].中國病理生理雜志,2001,17(9):916.