郭海玲

北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院腎內(nèi)科北京100078

(2010-11-25收稿 責(zé)任編輯 姜春霞)

自由基是一種能獨(dú)立存在的，含有一個(gè)或一個(gè)以上未成對電子的任何原子或原子團(tuán)，具有高度反應(yīng)活性的粒子［1］。正常情況下機(jī)體內(nèi)存在清除自由基的酶系統(tǒng)，如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶和谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶等以及非酶系統(tǒng)，如維生素E、維生素C、血漿銅藍(lán)蛋白和尿酸等，從而使體內(nèi)自由基處于不斷產(chǎn)生與清除的動(dòng)態(tài)平衡之中［2］。研究［3-4］表明體內(nèi)產(chǎn)生少量的自由基不會(huì)對機(jī)體造成威脅，但數(shù)量過多或清除能力降低時(shí)就會(huì)氧化生物分子，如核酸、蛋白質(zhì)和脂類等。已知多種疾病與生物大分子的氧化有關(guān)，如動(dòng)脈粥樣硬化、缺血性心臟病、高血壓、癌癥、糖尿病、炎癥及休克等。因此，尋找一種安全有效的能夠清除機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生多余自由基的保健食品具有重要意義。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)［5-6］表明葛根黃酮具有抗氧化活性。所以，作者以葛根提取物作為受試物探討其抗氧化活性，為其開發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品 葛根提取物由某保健品有限公司提供;人體推薦量為40 mg/(kg·d)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 48只清潔級(jí)雌性SD老齡大鼠(12個(gè)月齡)，由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證書:豫醫(yī)動(dòng)字第4104035號(hào)。環(huán)境溫度20～24℃，相對濕度40% ～70%，12 h光照/12 h黑暗。

1.3 試劑與儀器 丙二醛(MDA)試劑盒、SOD試劑盒和GSH-Px試劑盒均購自南京建成生物工程研究所;水浴鍋:江蘇金壇有限公司;SPACE全自動(dòng)生化分析儀:美國;低速臺(tái)式離心機(jī):北京醫(yī)用器械廠。

1.4 觀察指標(biāo)測定 按照衛(wèi)生部保健食品功能檢測與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范，大鼠適應(yīng)環(huán)境3 d。將動(dòng)物分為3 個(gè)劑量組(0.2、0.4 和1.2 g/kg)及1 個(gè)對照組，連續(xù)經(jīng)口給予不同劑量葛根提取物60 d，灌胃量為10 mL/kg。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)采血并分離血清，測定MDA含量、SOD和GSH-Px活性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 10.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，先對數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，采用單因素方差分析比較各組大鼠血清MDA水平、SOD和GSH-Px活性的差異，兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

各組大鼠血清MDA水平、SOD及GSH-Px活性比較見表1。

表1 各組大鼠血清MDA水平、SOD及GSH-Px活性比較(n=12)

3 討論

葛根為豆科植物野葛的根，主要活性成分為異黃酮類化合物如葛根素、大豆苷元及大豆苷等?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》記載:“葛根，味甘平，主消渴，身大熱，嘔吐，諸痹，起陰氣，解諸毒”;《中國藥學(xué)大辭典》記載:葛根具有升陽、解肌、生津、止渴等功能。胡琴等［5］報(bào)道葛根黃酮在一定濃度范圍內(nèi)，其抗氧化作用、清除羥自由基、超氧陰離子的能力及抑制過氧化脂質(zhì)產(chǎn)物MDA的作用均呈劑量效應(yīng)關(guān)系;朱慶磊等［7］報(bào)道葛根素能清除超氧陰離子和羥自由基，抑制過氧化氫引起的紅細(xì)胞溶血和脂質(zhì)過氧化生成。體內(nèi)研究［8］表明葛根提取物具有抗糖尿病大鼠氧化應(yīng)激作用，葛根素預(yù)處理對大鼠肝缺血再灌注氧化損傷具有保護(hù)作用［9］，葛根黃酮對亞急性衰老模型小鼠具有抗氧化作用［6］。該研究以正常老齡大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型探討葛根提取物的抗氧化作用，為保健食品的開發(fā)利用提供依據(jù)。

該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，老齡大鼠經(jīng)口連續(xù)60 d給予不同劑量的葛根提取物后，與對照組相比，1.2 g/kg劑量組大鼠血清 MDA含量明顯降低，而GSH-Px活性明顯升高;0.4和1.2 g/kg劑量組大鼠血清SOD活性較對照組升高。研究［10］表明，SOD廣泛存在于各種生物體內(nèi)，是清除超氧陰離子自由基的一種重要的酶，與GSH-Px有協(xié)同作用，它能催化超氧陰離子生成O2和H2O2，而H2O2再由GSH-Px催化轉(zhuǎn)變?yōu)镺2和H2O，從而使H2O2迅速清除，二者聯(lián)合作用可有效防止組織細(xì)胞受到過氧化損傷，能有效清除氧自由基，使細(xì)胞膜穩(wěn)定性增加［10］。該研究結(jié)果提示葛根提取物可能通過提高SOD和GSH-Px活性，淬滅自由基的生成，使脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA生成減少而起到抗氧化作用。但至于其在人群中的應(yīng)用還需要進(jìn)一步研究。

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