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        治糜靈凝膠劑對實(shí)驗(yàn)性宮頸糜爛大鼠宮頸陰道組織病理形態(tài)學(xué)的影響

        2011-09-17 10:14:08梁雪段鳳麗肖洪彬段富津
        中醫(yī)藥信息 2011年6期
        關(guān)鍵詞:滲出物粘膜上皮

        梁雪,段鳳麗,肖洪彬,段富津

        (黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150040)

        宮頸糜爛是慢性宮頸炎常見的一種病理改變。約有25%~51%或更多育齡婦女罹患此病,且易發(fā)生癌變。是婦科常見病、多發(fā)病,嚴(yán)重威脅著廣大婦女的身心健康。除了分娩、流產(chǎn)、手術(shù)操作等長期慢性機(jī)械性刺激與損傷會(huì)引起宮頸糜爛,也可因化學(xué)物質(zhì)、病原體、放射線等其他致病因子而發(fā)生。治療宮頸糜爛是作為宮頸癌的一級(jí)預(yù)防,是阻斷宮頸癌發(fā)生的重要手段。

        治糜靈凝膠劑主治宮頸糜爛、感染性陰道炎、滴蟲性陰道炎。由黃柏、苦參、枯礬、兒茶、冰片五味中藥組成,具有清熱燥濕,解毒殺菌,祛腐生肌的功效。臨床用治宮頸糜爛,總有效率在80%以上。為了提高療效,擬改為凝膠劑,為此通過對治糜靈栓劑及其凝膠劑對實(shí)驗(yàn)性宮頸糜爛大鼠宮頸陰道組織病理形態(tài)學(xué)影響的觀察,來驗(yàn)證其功效。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

        雌性未孕Wistar大白鼠,體質(zhì)量170~240g,由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心繁殖提供。

        1.2 藥物及試劑

        治糜靈凝膠劑、治糜靈栓劑均由哈爾濱世一堂制藥廠提供。

        1.3 儀器

        德國萊卡TP1020脫水機(jī);德國萊卡EG1150C組織包埋機(jī);德國萊卡RM2135輪轉(zhuǎn)切片機(jī);德國萊卡HI1210·HI1220裱·烤片機(jī);日本尼康E600生物顯微鏡。

        1.4 造模方法[1]

        將已制備好的25%苯酚膠漿藥液用1ml一次性注射器抽取,按每只大鼠0.1ml的劑量注入大鼠陰道內(nèi)深約1cm處(注意動(dòng)作需輕柔緩慢),1次/2天,共5次,造模過程中肉眼觀察大鼠陰道變化,造模4次后大部分大鼠陰道出現(xiàn)充血紅腫,并有白色分泌物滲出,提示造模成功,再繼續(xù)造模1次。

        1.5 分組及給藥

        于造模成功次日,取造模成功大鼠50只,隨機(jī)分為5組,每組10只,另取10只正常鼠作為正常對照組。即空白對照組:等量鹽水0.46ml/kg;模型對照組:等量鹽水0.46ml/kg;治糜靈凝膠劑高劑量組:1.84g/kg;治糜靈凝膠劑低劑量組:0.46g/kg;治糜靈栓組:0.28g/kg;基質(zhì)組:0.46g/kg。各組動(dòng)物用1ml注射器吸取藥液或基質(zhì)注入陰道深部,每日2次,間隔4h,連續(xù)給藥10天。

        1.6 取材

        明末意大利傳教士利瑪竇在《利瑪竇中國札記》一書中寫道,中國“各個(gè)城市都有千百名更夫在街上巡夜,按規(guī)定的間隔敲鑼,而且街道都有鐵柵并且上鎖。盡管如此,宅院被夜賊搶劫一空的事還常常發(fā)生,這或許因?yàn)楦虮救司褪潜I賊,或者是和盜賊合伙?!贝藭r(shí)中國之城市面貌,與兩宋時(shí)相比,不由令人嘆息。

        末次給藥次日,立即處死大鼠取陰道至子宮分角處組織,將病變組織放入10%的甲醛溶液浸泡固定24h,隨即采用取材,脫水,石蠟包埋,切片(5um),HE染色常規(guī)病理組織學(xué)檢查。光學(xué)顯微鏡下,觀察陰道及子宮組織病理形態(tài)學(xué)改變。

        1.7 病理組織評分標(biāo)準(zhǔn)

        黏膜病變評分標(biāo)準(zhǔn)為:0分:未見明顯變性壞死、脫落及潰瘍;1分:可見輕度變性壞死、脫落及糜爛;2分:可見明顯變性壞死、脫落及潰瘍;3分:可見大量變性壞死、脫落及糜爛。

        黏膜下層血管擴(kuò)張充血病變評分標(biāo)準(zhǔn)為:0分:黏膜下層未見明顯擴(kuò)張血管;1分:黏膜下層可見輕度擴(kuò)張血管;2分:黏膜下層可見明顯擴(kuò)張血管;3分:黏膜下層較多增生血管擴(kuò)張。

        黏膜下層炎細(xì)胞浸潤病變評分標(biāo)準(zhǔn)為:0分:未見明顯炎細(xì)胞浸潤;1分:可見輕度炎細(xì)胞浸潤;2分:可見明顯炎細(xì)胞浸潤;3分:可見大量炎細(xì)胞浸潤;黏膜下病變評分標(biāo)準(zhǔn)為:0分:有膿腫存在;1分:無膿腫形成。

        2 結(jié)果

        2.1 病理改變評價(jià) 見表1。

        表1 治糜靈凝膠劑對苯酚膠漿引起的大鼠宮頸糜爛病理的影響

        2.2 光鏡觀察

        正常組大鼠陰道及宮頸:陰道粘膜有許多橫行皺襞,表面為非角化的復(fù)層扁平上皮。固有層為較致密的結(jié)締組織,含有彈性纖維。肌層為平滑肌,排列較疏松。正常大鼠宮頸-陰道交界處子宮內(nèi)膜皺襞多,之間的上皮形成許多腺樣隱窩。內(nèi)膜表面為單層柱狀上皮,多為粘液性分泌細(xì)胞,也有少量纖毛細(xì)胞。宮頸與陰道交界處單層柱狀上皮移行為復(fù)層扁平上皮(圖1,圖2)。

        圖1 正常對照組大鼠宮頸組織

        圖2 正常對照組大鼠陰道組織

        模型組:陰道粘膜上皮增生,上皮細(xì)胞缺損、脫落,可見炎細(xì)胞浸潤;腔內(nèi)有炎性滲出物及脫落組織;宮頸粘膜上皮細(xì)胞部分增生、變性及壞死脫落,表面形成乳頭狀突起,腺體減少;粘膜下層及固有層血管增多,擴(kuò)張充血水腫,間質(zhì)有纖維組織增生及炎細(xì)胞浸潤;腔內(nèi)可見炎性滲出物及壞死組織(圖3,圖4)。

        圖3 模型對照組大鼠宮頸組織

        圖4 模型對照組大鼠陰道組織

        高劑量組:陰道上皮粘膜基本完整,略有增厚,固有層內(nèi)并未見大量的炎細(xì)胞浸潤。宮頸粘膜僅為較正常的單層柱狀上皮覆蓋,外觀平坦,粘膜下組織并無明顯充血、水腫、炎性細(xì)胞浸潤。宮頸大部分壞死粘膜及固有層均有不同程度的肉芽增生,宮頸粘膜基本趨于正常,并未發(fā)現(xiàn)顯著的病理形態(tài)學(xué)改變(圖5,圖6)。

        圖5 治糜靈凝膠劑高劑量組大鼠宮頸組織

        圖6 治糜靈凝膠劑高劑量組大鼠陰道組織

        低劑量組:陰道表面上皮基本完整,略有增厚,腔內(nèi)有少許脫落上皮細(xì)胞 ;固有層內(nèi)有明顯的炎細(xì)胞,腔內(nèi)未見滲出物及壞死組織。宮頸部分壞死粘膜處有肉芽組織增生,固有層增生,粘膜上皮殘有少量腺體,腔內(nèi)未見大量炎性滲出物,部分宮頸粘膜接近正常,未見明顯改變(圖7,圖8)。

        圖7 治糜靈凝膠劑低劑量組大鼠宮頸組織

        圖8 治糜靈凝膠劑低劑量組大鼠陰道組織

        基質(zhì)組:陰道上皮粘膜脫落,有明顯炎細(xì)胞浸潤,腔內(nèi)見有炎性滲出物。宮頸內(nèi)部分粘膜有粘膜脫落;腺體不完整,腔內(nèi)見大量炎細(xì)胞及滲出物(圖9,圖10)。

        圖9 治糜靈凝膠劑基質(zhì)組大鼠宮頸組織

        圖10 治糜靈凝膠劑基質(zhì)組大鼠陰道組織

        原劑型組:陰道上皮粘膜稍有增厚,固有層內(nèi)及其腔內(nèi)只見少量炎性滲出物及壞死組織。宮頸粘膜及粘膜下壞死組織有肉芽增生,固有層內(nèi)殘存部分腺體并伴有增生,腔內(nèi)充血,上皮尚未完全增生修復(fù),腔內(nèi)無大量炎性滲出物;部分宮頸粘膜接近正常,未見明顯病理改變(圖11,圖12)。

        圖11 治糜靈栓劑組大鼠宮頸組織

        圖12 治糜靈栓劑大鼠陰道組織

        3 討論

        宮頸糜爛多由急性宮頸炎轉(zhuǎn)變而來,常因急性宮頸炎治療不徹底,病原體隱藏于宮頸粘膜內(nèi)形成慢性炎癥,多見于分娩、流產(chǎn)或手術(shù)損傷宮頸后,病原體侵入而引起感染。宮頸糜爛主要為炎性糜爛。根據(jù)病理組織形態(tài)學(xué)的觀察,應(yīng)用25%苯酚膠漿制作的宮頸糜爛陰道炎模型,類似于炎癥性糜爛。光學(xué)顯微鏡下陰道被覆上皮損傷,細(xì)胞變性、脫落壞死,腔內(nèi)及固有層內(nèi)可見充血水腫以及大量中性粒細(xì)胞浸潤,炎性滲出物和部分壞死組織。宮頸粘膜上皮缺損,粘膜上皮細(xì)胞變性、壞死脫落,部分腺體被破壞或消失,粘膜層充血水腫亦有大量炎細(xì)胞浸潤,壞死組織與膿性滲出物廣泛分布于腔內(nèi)。經(jīng)治糜靈凝膠劑各劑量組以及原劑型治療后,對陰道上皮及宮頸粘膜均有不同程度的修復(fù),粘膜以下各層充血水腫減輕,炎性滲出物減少,鏡下只見少量炎細(xì)胞浸潤,并以高劑量組療效最為顯著。提示治糜靈凝膠劑與治糜靈栓劑對25%苯酚膠漿所致大鼠宮頸糜爛陰道炎具有良好的治療效果,兩者均能夠加速修復(fù)陰道及宮頸損傷的粘膜上皮,使各層組織炎細(xì)胞浸潤和炎性滲出減少,充血水腫減輕。目前,凝膠劑是一種具有廣闊發(fā)展前景的陰道給藥制劑[2],上述病理表現(xiàn)為臨床應(yīng)用治糜靈凝膠劑治療宮頸糜爛提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

        [1] 田振坤,馬英麗,王文姌.治糜靈泡騰膠囊栓對苯酚致大鼠宮頸糜爛模型的治療作用[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2010,39(4):44 -46.

        [2] 劉玠,翟春梅,楮利娟.中藥凝膠劑在宮頸炎中的應(yīng)用進(jìn)展[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2010,39(5):88 -90.

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