宋春燕,王艷麗,周敏
(黑龍江中醫(yī)藥大學,黑龍江 哈爾濱 150040)
椎動脈型頸椎病是由于椎動脈的直接受壓和梗阻或椎動脈叢受刺激引起動脈管壁痙攣,導致椎-基底動脈供血不足而出現(xiàn)的一組臨床癥候群。近年來的研究顯示,IL-1β和TNF-α等細胞因子在椎動脈型頸椎病中有一定影響。本實驗通過觀察頸痛寧丸對椎動脈型頸椎病模型家兔血漿中IL-1β和TNF-α的影響,從而為探討頸痛寧丸治療椎動脈型頸椎病的作用機制奠定基礎。
1.1 造模方法 健康新西蘭大耳白家兔70只,雌雄各半,體質(zhì)量2.5~3.0kg,由黑龍江中醫(yī)藥大學動物實驗中心提供。去除各家兔枕后及頸部體毛,TCD檢測各家兔椎-基底動脈血流速度。然后抽取硬化劑消痔靈注射液(0.4g×10ml)10ml注射于兔左側C3~C5頸椎橫突側面,并于第2、4周重復注射。再次TCD檢測,選取雙側椎動脈、基底動脈血流速度均減小10cm/s以上者為成功模型。
1.2 分組及給藥 挑選成模家兔40只,隨機分為5組,每組8只。頸痛寧丸高、中、低劑量組每日分別給予頸痛寧丸 2g/kg(33.3%:6ml/kg)、1g/kg(25%:4ml/kg)、0.5g/kg(12.5%:4ml/kg);陽性對照組每日給予頸復康顆粒1g/kg(25%:4ml/kg);模型對照組給予等容積生理鹽水。另取8只健康家兔作為空白對照組,正常飼養(yǎng)。各家兔采取灌胃給藥方法,每日1次,給藥4周。
1.3 藥物制備 頸痛寧丸由丹參,當歸,川芎,桃仁,紅花,桑枝,葛根,穿山甲等組成,蜂蜜成丸,由黑龍江中醫(yī)藥大學藥理教研室提供。
1.4 儀器與試劑 離心機LDZ4-1.2(北京醫(yī)用離心機廠);恒溫水浴DGX-9143B-1(上海福碼實驗設備有限公司);自動酶標儀anthosHTⅡ型(奧地利);消痔靈注射液(吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司,批號0907253);頸復康顆粒(承德中藥集團有限公司,批號090124)。
1.5 指標檢測 末次藥后30min,各動物空腹取下腔靜脈血??鼓? 500rpm離心15min,分離血漿,-80℃保存。
1.6 統(tǒng)計學處理 統(tǒng)計軟件SPSS 13.0處理,以均數(shù)加減標準差(±s)表示,進行成組設計t檢驗。
表1 頸痛寧丸對椎動脈型頸椎病家兔血漿中IL-1β和TNF-α含量的影響(±s)
表1 頸痛寧丸對椎動脈型頸椎病家兔血漿中IL-1β和TNF-α含量的影響(±s)
注:與模型組比較,*P <0.05,**P <0.01。
組別 給藥量(g/kg)例數(shù)(n)IL-1β(pg/mL)TNF-α(pg/mL)高劑量組 2.0 8 22.80 ±2.63* 102.95 ±6.99**中劑量組 1.0 8 24.25 ±1.09* 105.17 ±5.49*低劑量組 0.5 8 25.34 ±2.32 109.31 ±8.22陽性對照組 1.0 8 23.04 ±1.92* 106.16 ±6.44*空白對照組 - 8 22.20±1.73**100.18±7.28**模型對照組 等容積生理鹽水8 29.39 ±6.50 115.55 ±8.41
由表1可見,頸痛寧丸高、中、低劑量組的IL-1β含量均低于模型對照組,其中頸痛寧丸高、中劑量組與模型對照組比較有顯著性差異(P<0.05);頸痛寧丸高、中、低劑量組的TNF-α含量均低于模型對照組,其中頸痛寧丸高劑量組、中劑量組與模型對照組比較有顯著性差異(P<0.01,P<0.05)。
IL-1β、TNF-α是重要的炎癥促進劑,可刺激炎癥細胞的聚集、激活和炎癥遞質(zhì)的釋放。IL-1β可以促進TNF-α、IL-2和IL-8等因子的合成,還可誘導大部分趨化因子和黏附分子的表達,參與缺血缺氧后腦組織的急性炎癥反應;還可以促使內(nèi)皮細胞產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)而收縮腦血管、促進血栓形成,加重腦缺血的程度。TNF-α在病理情況下既是一種有效的腫瘤殺傷因子,又是機體炎癥及免疫應答的重要的調(diào)節(jié)因子。其激活中性粒細胞和單核-巨噬細胞,促進炎癥反應;還能刺激血管內(nèi)皮細胞和纖維母細胞合成IL-1、集落刺激因子等,增加血管內(nèi)皮細胞對白細胞的粘附性等,與組織損傷密切相關。本實驗結果表明,頸痛寧丸可抑制椎動脈型頸椎病模型家兔體內(nèi)炎癥因子的釋放。