劉艷梅，龐來(lái)祥，尋園，趙美峰

(1.陜西中醫(yī)學(xué)院，陜西 咸陽(yáng) 712046;2.解放軍第451醫(yī)院，陜西 西安 710054)

隨著核能的廣泛應(yīng)用，輻射愈來(lái)愈影響到人體的健康。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，輻射屬于外感熱毒邪毒，具有直中臟腑、陰傷和氣血不足的特點(diǎn)［1－2］。當(dāng)歸補(bǔ)血湯為經(jīng)典的氣血雙補(bǔ)方，具有補(bǔ)氣升血、填精益髓的功效。本研究觀察了不同濃度的當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)輻照后小鼠的影響，為抗輻射藥物的開發(fā)、利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 60Co輻射源(第四軍醫(yī)大學(xué)輻照中心提供);血球計(jì)數(shù)分析儀(深圳邁瑞電子)。

1.2 試藥 當(dāng)歸、黃芪以1∶5比例，常規(guī)水煎后制成0.3、0.6、1.2g/mL濃度的藥液冷藏備用;陽(yáng)性對(duì)照藥:紫芝多糖片(吉林省通化振國(guó)藥業(yè)有限公司)。

1.3 動(dòng)物 昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量(20±2)g，SPF級(jí)，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào):SCXK(陜)2007－001。

2 方法［3－4］

2.1 動(dòng)物分組與處理 小鼠適應(yīng)飼養(yǎng)2天，按體質(zhì)量隨機(jī)分成6組，分別為正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量(3、6、12g/kg)組，每組10只。正常對(duì)照組和模型組給予同等體積的蒸餾水。每天清晨灌胃給藥，給藥體積為10ml/kg，每日1次，連續(xù)給藥7天后，除正常對(duì)照組外，其余各組均以60Coγ射線進(jìn)行一次性全身照射，照射距離80cm，劑量率246.93cGy/min，照射總劑量為6.0Gy，照射后各組小鼠繼續(xù)每天1次灌胃，至完成各項(xiàng)測(cè)定。

2.2 指標(biāo)測(cè)定 1)稱取質(zhì)量:分別于購(gòu)回后、照射前1天、照射后第3天、照射后第7天、照射后第10天稱量小鼠體質(zhì)量;2)白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù):各組動(dòng)物分別于照射前1天、照射后第3天、第10天3次眼眶后靜脈叢采血20μl，稀釋后用血球計(jì)數(shù)分析儀進(jìn)行白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù);3)脾指數(shù)(SI)和胸腺指數(shù)(TI):照射后第10天稱體質(zhì)量，分離脾臟和胸腺，稱取質(zhì)量，計(jì)算脾指數(shù)和胸腺指數(shù)。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用兩樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果以(±s)表示。

3 結(jié)果

3.1 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)輻照小鼠體質(zhì)量的影響

從照射前體質(zhì)量可以看出，各試藥對(duì)正常小鼠體質(zhì)量無(wú)影響;照射后各給藥組和模型組小鼠體質(zhì)量顯著下降，與模型組比較，照后第7天與照后第10天，當(dāng)歸補(bǔ)血湯中、高劑量、陽(yáng)性藥能顯著改善小鼠體質(zhì)量減輕(P＜0.01)，當(dāng)歸補(bǔ)血湯低劑量與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)，結(jié)果見表1。

3.2 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)輻照小鼠WBC和PLT的影響

照射后第3天各照射組小鼠白細(xì)胞急劇下降，照后第10天與模型組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯中、高劑量以及陽(yáng)性藥能顯著促進(jìn)小鼠白細(xì)胞回升(P＜0.01);受照后，小鼠血小板數(shù)逐漸下降，當(dāng)歸補(bǔ)血湯和陽(yáng)性藥能明顯改善小鼠血小板降低的現(xiàn)象，陽(yáng)性對(duì)照組、中、高劑量組與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)。當(dāng)歸補(bǔ)血湯高劑量對(duì)小鼠WBC和PLT的改善均數(shù)均高于陽(yáng)性對(duì)照，結(jié)果見表2。

表1 對(duì)輻照小鼠體質(zhì)量的影響(±s，n=10)

表1 對(duì)輻照小鼠體質(zhì)量的影響(±s，n=10)

注:與模型組比較，#P＜0.05，*P＜0.01。

組別 劑量(g/kg)體質(zhì)量(g)購(gòu)回后 照射前1天 照射后3天 照射后7天 照射后10天正常對(duì)照組 － 20.05±1.93 26.31±1.16 28.16±1.91 29.65±2.21 29.76 ±2.60模型組 － 20.30±1.69 25.92±3.36 25.04±2.81 22.81 ±2.32 20.34±2.13紫芝多糖片組 1.35 19.84 ±1.61 26.19 ±2.37 25.87 ±1.64 27.05 ±2.77* 25.02 ±2.24*當(dāng)歸補(bǔ)血湯組 3 20.10 ±1.88 26.14 ±2.46 25.43 ±1.51 26.13 ±3.78# 23.29 ±2.98#6 19.73 ±2.02 26.54 ±2.50 25.65 ±2.15 26.43 ±2.58* 24.31 ±3.67*12 19.84 ±1.58 26.32 ±1.92 25.96 ±1.60 27.02 ±2.81* 25.09 ±3.02*

表2 對(duì)輻照小鼠WBC和PLT的影響(±s，n=10)

表2 對(duì)輻照小鼠WBC和PLT的影響(±s，n=10)

注:與模型組比較，#P ＜0.05，*P ＜0.01。

組別 劑量(g/kg)WBC(×109/L)PLT(×109/L)照射前1天 照射后3天 照射后10天 照射前1天 照射后3天 照射后10天正常對(duì)照組 － 6.45±0.92 5.42±0.91 6.15±1.48 727.7±79.81759.5 ±79.62 846.1 ±96.62模型組 － 6.87 ±1.51 0.50 ±0.22 0.54 ±0.30 710.89 ±100.42 469.22 ±37.91 181.0 ±35.76紫芝多糖片組 1.35 6.75 ±1.69 0.66 ±0.23 0.93 ±0.28* 731.87 ±83.51 537.5 ±57.68# 241.62 ±47.22#當(dāng)歸補(bǔ)血湯 3 6.34 ±0.70 0.59 ±0.20 0.77 ±0.18 679.9 ±103.70 492.0 ±69.54 194.7 ±48.27 6 6.67 ±0.94 0.65 ±0.27 0.93 ±0.25* 703.22 ±143.07 523.67 ±63.65# 223.0 ±33.77#12 7.01 ±1.10 0.78 ±0.30# 1.05 ±0.27* 782.5 ±82.22 589.5 ±67.48* 257.0 ±45.50*

表3 對(duì)輻照小鼠TI、SI的影響(±s，n=10)

表3 對(duì)輻照小鼠TI、SI的影響(±s，n=10)

注:與模型組比較，#P ＜0.05，*P ＜0.01。

組別 劑量(g/kg) 胸腺指數(shù)(mg/g) 脾臟指數(shù)(mg/g)－ 3.19 ±0.80 2.89 ±0.68模型組 － 1.51±0.71 0.82±0.30紫芝多糖片組 1.35 2.36 ±0.68# 1.29 ±0.31#當(dāng)歸補(bǔ)血湯組 3 2.03 ±1.05 0.96 ±0.26 6 2.14 ±0.19# 1.10 ±0.17#12 2.46 ±0.23* 1.36 ±0.43正常對(duì)照組#

3.3 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)輻照小鼠胸腺、脾臟指數(shù)的影響

與正常對(duì)照組比較，各照射組胸腺、脾臟指數(shù)均有明顯減少，當(dāng)歸補(bǔ)血湯中、高劑量及紫芝多糖片對(duì)照射后小鼠胸腺、脾臟減少的程度均有顯著減緩，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)，結(jié)果見表3。

4 討論

血液系統(tǒng)對(duì)輻射甚為敏感，一定劑量射線作用后，即可引起外周血象的變化;免疫系統(tǒng)是機(jī)體輻射損傷另一敏感組織，胸腺、脾臟指數(shù)可代表機(jī)體免疫系統(tǒng)受損的狀況。因此本實(shí)驗(yàn)以白細(xì)胞、血小板數(shù)、胸腺、脾臟指數(shù)及小鼠的整體水平(體質(zhì)量變化)為評(píng)價(jià)指標(biāo)。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，當(dāng)歸、黃芪均有不同程度的抗輻射作用［5－7］，本研究觀察了由二者組成的傳統(tǒng)方當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)輻射損傷小鼠的影響。結(jié)果表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯能顯著改善受照后小鼠體質(zhì)量減輕、血小板減少、胸腺、脾臟萎縮、促進(jìn)白細(xì)胞回升，具有良好的抗輻射作用，當(dāng)歸補(bǔ)血湯在抗輻射保健品的研究開發(fā)方面具有深遠(yuǎn)的應(yīng)用前景。

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