馬久太 單 娜 盧新義 王曉梅 劉 峰 南景一

(1陜西步長制藥有限公司，陜西咸陽，712000;2陜西省中藥制藥工程技術(shù)研究中心)

冠心舒通膠囊是以蒙醫(yī)理論為依據(jù)研制而成的一種新藥，由廣棗、天竺黃、丹參等5味藥制備而成，具有活血化瘀、通經(jīng)活絡(luò)、行氣止痛的功能，用于胸痹心血瘀阻導(dǎo)致的冠心病、心絞痛等疾病的治療［1］。為更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，本研究在其原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上，對(duì)君藥廣棗中的沒食子酸進(jìn)行含量測(cè)定，并對(duì)方法學(xué)進(jìn)行了研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

3400A型高效液相色譜儀;二極管陣列檢測(cè)器;AR1140電子天平;KQ·250TB超聲波清洗器;ΜPT－1－10高純水機(jī)。沒食子酸對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)831－9501);冠心舒通膠囊(陜西步長制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào) 090411、090621、090814、091011、091210、100321、100521、100812、101015、101215);甲醇為色譜純，水為高純水，其他均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)［2－3］以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(250mm×4.6mm，5μm);以甲醇－0.1%磷酸水(10∶90)為流動(dòng)相;流速1.0mL·min－1;檢測(cè)波長273nm;柱溫30℃。理論塔板數(shù)按沒食子酸峰計(jì)算不得低于3000。

2.2 供試品溶液制備 取本品內(nèi)容物適量，研細(xì)，約取2.0g，精密稱定，精密加入70%甲醇20mL，稱定重量，加熱回流30min，放冷，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3 對(duì)照品溶液制備 精密稱取沒食子酸對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含50.87μg的溶液，即得。

2.4 干擾性試驗(yàn) 依據(jù)處方制備不含廣棗的樣品，按照供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液，分別精密吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液與陰性對(duì)照溶液各10μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果在對(duì)照品相應(yīng)位置處，供試品有吸收峰，陰性沒有吸收峰，表明無干擾，且基線分離良好。

2.5 線性關(guān)系考察 精密吸取對(duì)照品溶液(50.87μg·mL－1)2、4、6、8、10μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積。以進(jìn)樣量(X)為橫坐標(biāo)，峰面積值(Y)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程式:Y=3 ×106X+14845，r=0.9999，結(jié)果表明，沒食子酸進(jìn)樣量在0.1017～0.5087μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。見圖1。

圖1 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.6 精密度試驗(yàn) 取冠心舒通膠囊(批號(hào)100521)，按上述供試品溶液制備方法制備供試品溶液，并按上述色譜條件操作，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積，結(jié)果見表1。結(jié)果沒食子酸峰面積積分值RSD為1.28%，表明本方法精密度良好。

表1 精密度試驗(yàn)結(jié)果

表2 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取冠心舒通膠囊(批號(hào)100521)供試品溶液，按上述色譜條件操作，分別在 0、1、2、4、8、12h進(jìn)樣，記錄峰面積，結(jié)果見表2。結(jié)果沒食子酸峰面積積分值RSD為0.79%，表明供試品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取冠心舒通膠囊(批號(hào)100521)樣品6份，按上述方法制備供試品溶液，并按上述色譜條件操作，記錄峰面積，計(jì)算，結(jié)果見表3。結(jié)果RSD為1.39%，沒食子酸含量為0.264mg·g－1，表明本方法重復(fù)性良好。

表3 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

2.9 加樣回收率試驗(yàn) 取冠心舒通膠囊(批號(hào)100521)6份，各約1.0g，精密稱定，加入一定量的沒食子酸對(duì)照溶液(100.87μg·mL－1)，按上述方法制備供試品溶液，并按上述色譜條件操作，記錄峰面積，計(jì)算回收率，結(jié)果見表4。結(jié)果平均回收率為99.44%，RSD為0.66%，表明回收率良好。

表4 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.10 樣品含量測(cè)定及限度確定 隨機(jī)抽取近2年內(nèi)生產(chǎn)的10個(gè)批次的冠心舒通膠囊，按照上述方法測(cè)定沒食子酸含量，結(jié)果見表5。結(jié)果10批樣品的含量測(cè)定數(shù)值在78.6～106.8μg/粒之間，平均值為92.5μg/粒，故擬定本品每粒含沒食子酸不得少于75μg。

表5 冠心舒通膠囊中沒食子酸含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

廣棗為蒙醫(yī)和藏醫(yī)習(xí)用藥材之一，臨床主要用于氣滯血瘀引起的胸痹作痛的治療，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明廣棗有明顯的抗心肌缺血的作用［4］，沒食子酸為其主要成分，因此我們對(duì)冠心舒通膠囊君藥廣棗中的沒食子酸進(jìn)行了含量測(cè)定。沒食子酸含量測(cè)定方法目前有比色法、薄層分光光度法、高效液相色譜法、反相高效液相色譜法等，本次試驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)冠心舒通膠囊進(jìn)行含量測(cè)定，平均回收率99.44%，RSD 0.66%，方法靈敏、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。試驗(yàn)研究［5－7］中曾考察了沒食子酸的不同提取方法，結(jié)果以回流提取法＞冷浸過夜法＞超聲提取法，說明溫度較高條件下沒食子酸容易提取;同時(shí)回流提取30min，能夠?qū)⒐谛氖嫱z囊中沒食子酸提取完全。

［1］國家藥典委員會(huì).冠心舒通膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［S］［標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS3－155(Z－025)－2005(Z)］.

［2］國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典2010年版一部［S］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社:41.

［3］龍海燕，彭飛成，姚蓉.高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方青果顆粒中沒食子酸含量.中南藥學(xué)，2010，8(6):416 －419.

［4］王平.民族藥廣棗有效部位藥代動(dòng)力學(xué)研究［D］.成都中醫(yī)藥大學(xué)，2004.

［5］冶平.HPLC測(cè)定藏藥五味麝香片中沒食子酸的含量.中國執(zhí)業(yè)藥師，2011，8(1):38 －39.

［6］蘇孝共，鄭國平，蔡進(jìn)章.高效液相色譜法測(cè)定泌淋膠囊中沒食子酸的含量.浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，34(2):273－274.

［7］戚重恒，倪觀鋒.高效液相法測(cè)定地稔中沒食子酸的含量.浙江中醫(yī)雜志，2010，45(3):220 －221.