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        不同炮制方法對黨參中黨參炔苷含量的影響

        2011-09-13 07:26:52莊志宏陳志峰何曉東曹艷楠毛克臣
        世界中醫(yī)藥 2011年4期
        關(guān)鍵詞:量瓶硫磺黨參

        黃 健 李 洋 莊志宏 陳志峰 何曉東 曹艷楠 毛克臣

        (1首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院,北京市東城區(qū)美術(shù)館后街23號,100010;2北京杏林藥業(yè)有限責(zé)任公司)

        黨參為桔梗科植物黨參Codonopsis pilosula(Franch)Nannf.素花黨參 Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta(Nannf)L.T.Shen或川黨參Codonopsis tangshen Oliv.的干燥根,始載于《本草從新》。黨參性味甘、平,歸脾、肺經(jīng),具有健脾益氣,養(yǎng)血生津的功能,用于脾肺氣虛,食少倦怠,咳嗽虛喘,氣血不足,面色萎黃,心悸氣短,津傷口渴,內(nèi)熱消渴[1]。黨參的化學(xué)成分主要有多糖,黨參苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,正己基-B-D-葡萄糖苷,a-D-果糖乙醇苷等。三萜類化合物木栓酮、蒲公英萜醇乙酸酯,蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、Ⅲ,丁香醛,香草酸等。我們在本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法(RP-HPLC)法,選取山西、甘肅、遼寧3個不同產(chǎn)地的黨參,對其中的定性成分黨參炔苷進(jìn)行含量測定[2]。考察黨參在加工過程中經(jīng)過硫磺熏蒸與未經(jīng)過硫磺熏蒸黨參炔苷的含量變化,以了解硫磺熏蒸對黨參中黨參炔苷含量的影響。

        1 儀器與試藥

        1.1 儀器 Agilent 1200高效液相色譜儀,包括Agilent G1311A四元泵(Quatpump),Agilent G1322A真空在線脫氣機(jī)(Degasser),Agilent G1329A自動進(jìn)樣器(ALS),Agilent G1315D DAD 檢測器,Agilent 1200化學(xué)工作站,Agilent G1316A(TCC)柱溫箱,色譜柱Agilent Eclipse XDB -C18(150mm ×4.6mm,5μm),AL204型電子天平(METTLER TOLEDO)。

        1.2 試藥 黨參炔苷對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號111732-200904),乙腈、甲醇為色譜純,其余試劑為分析純。黨參為山西黨參、遼寧黨參、甘肅黨參。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 色譜條件 色譜柱:Agilent Eclipse XDB-C18(150mm ×4.6mm,5μm);流動相:乙腈 - 水(28∶72),流速:1.0mL/min;柱溫:室溫;檢測波長:267nm。進(jìn)樣量為10μL。色譜柱的理論板塔數(shù)不低于5000nm。按黨參炔苷峰計(jì)算為在此條件下,黨參炔苷與其他組分均能達(dá)到基線分離。

        2.2 對照品溶液制備 精密稱取黨參炔苷對照品5.0mg,置于10mL量瓶中,加無水乙醇溶液并稀釋至刻度,搖勻得到0.5mg·mL-1對照品儲備液。用微量注射器精密吸取對照品儲備液100μL,置1mL量瓶中,加無水乙醇稀釋至刻度,搖勻得到0.05mg·mL-1對照品溶液。

        2.3 供試品溶液的制備 取黨參對照藥材適量,搗碎,過40目篩,粉末于40℃干燥5h,置于干燥器中備用。精密稱取已干燥的黨參粉末0.5g,置量瓶中,加無水乙醇10mL,超聲25min,濾過量瓶中殘?jiān)偌訜o水乙醇8mL,超聲15min,濾過,殘?jiān)偌訜o水乙醇8mL,超聲10min,濾過,合并3次濾液。濾液置水浴上揮去無水醇近干后,殘?jiān)蛹状既芤?,并轉(zhuǎn)移至5mL量瓶內(nèi),加甲醇至刻度,搖勻,用0.45μm微孔過濾,棄去初濾液,收集。

        2.4 線性關(guān)系考察 分別吸取以配好的0.05mg·mL-1黨參炔苷對照品溶液 0.1、0.3、0.5、1、2、3mL 進(jìn)樣,以峰面積(Y)對進(jìn)樣量(X)做工作曲線,得黨參炔苷的回歸方程為r=0.9985,y=316.14x+8.724。

        圖1 黨參炔苷標(biāo)準(zhǔn)曲線

        2.5 精密度和穩(wěn)定性考察 精密吸取同一樣品溶液10μL進(jìn)樣,連續(xù)5次,測得峰面積,計(jì)算 RSD值為0.04%。

        2.6 重復(fù)性考察 精密稱取同一樣品5份,每份0.5g,按“2.3”項(xiàng)下方法操作制得樣品溶液,吸取10μL進(jìn)樣,色譜條件同上,RSD=1.83%。

        2.7 回收率試驗(yàn) 采用加樣回收,精密稱取以測定含量的同一樣品 6 份各0.2567、0.2549、0.2543、0.2579、0.2524、0.2518分別加黨參炔苷對照品,按供試液的制備方法制備供試液,進(jìn)樣,記錄色譜,計(jì)算回收率。平均回收率為87.76﹪,RSD=0.09%,結(jié)果見表1。

        表1 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=6)

        2.8 樣品測定 分別精密吸取對照品溶液與供試品(樣品1~6)溶液各10μL,注入液相色譜儀,按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定,樣品含量按干燥品計(jì)算,結(jié)果見表2。

        表2 黨參炔苷含量測定結(jié)果

        3 討論

        通過實(shí)驗(yàn)觀察,在黨參加工過程中,經(jīng)過硫磺熏蒸的黨參中黨參炔苷的含量為 7.67%、0.892%、1.814%,未經(jīng)過硫磺熏蒸的黨參中黨參炔苷含量為10.62%、2.249%、2.489%。實(shí)驗(yàn)證明:未經(jīng)過硫磺熏蒸的黨參中黨參炔苷含量高。

        在藥材加工過程中,使用硫磺熏蒸既可以使藥材保鮮、防蟲、防霉變,又易于切制、干燥,且飲片成品的形狀整齊、顏色美觀。但是經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明硫磺熏蒸方法對黨參中黨參炔苷的含量影響較大。熏藥材所用的天然硫磺主含98.0%以上的單質(zhì)硫,尚有少量鈣、鐵、鋁、鎂、鉛、砷等近二十種元素[3]。在熏蒸過程中藥材容易被污染,藥材或飲片中的重金屬殘留物對人體是有害的,尤其是肝腎功能不全的患者更為嚴(yán)重。因此在加工生產(chǎn)中,禁止使用硫磺熏蒸藥材。

        同時(shí)作為中藥學(xué)專業(yè)技術(shù)人員,要提高對硫磺熏蒸過藥材或飲片的鑒別能力,不使用硫磺熏蒸過的品種。在飲片質(zhì)量評價(jià)層面上,不能僅憑借外觀去評價(jià)藥材或飲片的優(yōu)劣,更要注重藥品的內(nèi)在品質(zhì)。

        [1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部).北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:264-265.

        [2]王潤生,劉養(yǎng)清.山西黨參藥材中黨參炔苷的含量分析.藥物分析雜志,2007,27(8).

        [3]張貴軍.現(xiàn)代中藥材商品通鑒.北京:中國中醫(yī)藥出版社,2001:887-9083.

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