羅一烽，王冬青，李月峰，殷瑞根，何 偉，朱 彥，宗海洋

(江蘇大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 鎮(zhèn)江 212000)

抑郁癥(MOD)是臨床常見(jiàn)精神疾患之一，以持續(xù)情緒低落為主要表現(xiàn)，其病因及發(fā)病機(jī)制尚不清楚。2010年5～8月，我們觀察了MOD大鼠腦脊液細(xì)胞因子 IL-2、IL-6及IL-10動(dòng)態(tài)變化，旨在探討MOD的發(fā)病機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料 健康SD大鼠40只，成年雄性，體質(zhì)量180～200 g，行為學(xué)評(píng)分得分相近，均由江蘇大學(xué)動(dòng)物中心提供。Etho Vision(Version2.3，荷蘭Noldus公司)，細(xì)胞因子試劑盒(上海依克賽生物制品公司，進(jìn)口分裝)。

1.2 MOD模型制備 將40只大鼠隨機(jī)分為抑郁組25只(每籠1只)和對(duì)照組15只(每籠5只)。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，兩組均進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，自由進(jìn)食水。抑郁組采用慢性不可預(yù)知刺激與孤養(yǎng)模式制作MOD模型:即每籠1只喂養(yǎng);大鼠隨機(jī)采用冰水游泳5 min，40℃環(huán)境3 min，禁水禁食24 h，夾尾1 min，懸吊1 min，行為限制120 min，電擊足底1 min、晝夜顛倒24 h及潮濕鼠籠24 h等9種不同刺激，持續(xù)共8周。對(duì)照組不進(jìn)行任何處理。體質(zhì)量及行為學(xué)指標(biāo)測(cè)定:①體質(zhì)量:每 2周末(制模 0、2、4、6、8周)上午8∶00喂食前測(cè)量。②糖水偏愛(ài)百分比:采取液體消耗試驗(yàn)［1］，每2周末上午9∶00禁水禁食后進(jìn)行，計(jì)算糖水偏愛(ài)百分比=(糖水消耗/總液體消耗)×100%。③空間立體記憶能力:采用Morris水迷宮試驗(yàn)［2］，測(cè)定平均潛伏期。

1.3 腦脊液IL-2、IL-6、IL-10水平測(cè)定 抑郁組建模第0、2、4、6、8周末分別選取5只，對(duì)照組3只。以1%戊巴比妥鈉、50 mg/kg腹腔麻醉，頭部固定于腦定位儀上，頸部切口，鈍性分離頸背部肌肉直至暴露寰枕筋膜，用微量進(jìn)樣器進(jìn)針至小腦延髓池，抽取腦脊液150～200 μl，-70℃低溫保存。采用ELISA法檢測(cè) IL-2、IL-6、IL-10水平，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Stata11.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α =0.05。

2 結(jié)果

2.1 體質(zhì)量及行為學(xué)指標(biāo) 見(jiàn)表1。

2.2 腦脊液IL-2、IL-6、IL-10水平 見(jiàn)表2。

3 討論

神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)存在密切聯(lián)系，它們是維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定的重要調(diào)節(jié)系統(tǒng)。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)MOD患者進(jìn)行了細(xì)胞因子方面的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其多存在免疫功能異常，但其往往針對(duì)疾病的某一時(shí)期，其改變的方向及程度不完全一致，且檢測(cè)多集中于血清［3］。本研究發(fā)現(xiàn)抑郁組制模后各項(xiàng)行為學(xué)指標(biāo)表明呈動(dòng)態(tài)變化，體質(zhì)量下降，糖水偏愛(ài)百分比降低，活動(dòng)減少、好奇探究能力及記憶力下降，與MOD的臨床癥狀相似性。

表1 兩組體質(zhì)量及行為學(xué)指標(biāo)比較()

表1 兩組體質(zhì)量及行為學(xué)指標(biāo)比較()

注:與對(duì)照組同時(shí)點(diǎn)比較，*P ＜0.05，△P ＜0.01

組別 n 體質(zhì)量(g)糖水偏愛(ài)百分比(%)潛伏期(s)抑郁組50 周 203.35 ±19.30 78.79 ±6.78 41.37 ±5.022 周 254.76 ±20.06 67.32 ±6.08* 48.20 ±7.014 周 296.61 ±15.36△ 56.31 ±8.46△ 66.92 ±6.52△6 周 331.23 ±16.27△ 48.63 ±8.91△ 69.13 ±7.64△8 周 364.65 ±21.07△ 49.01 ±7.36△ 76.82 ±7.96△對(duì)照組 30 周 208.87 ±17.24 79.03 ±6.43 42.48 ±4.622 周 286.12 ±21.26 77.98 ±5.52 42.35 ±6.324 周 342.39 ±18.74 78.67 ±7.12 40.92 ±6.266 周 380.47 ±18.24 77.24 ±7.82 38.51 ±7.618周430.38 ±19.12 78.12 ±8.02 36.24 ±8.28

表2 兩組腦脊液IL-2、IL-6、IL-10水平比較(pg/ml，)

表2 兩組腦脊液IL-2、IL-6、IL-10水平比較(pg/ml，)

注:與對(duì)照組同時(shí)點(diǎn)比較，*P ＜0.05，△P ＜0.01

組別 n IL-6 IL-10 IL-2抑郁組50 周 20.21 ±3.20 10.38 ±1.13 13.46 ±2.042 周 26.37 ±3.23* 10.97 ±1.23 14.89 ±2.314 周 30.86 ±3.26△ 8.86 ±0.98* 17.99 ±2.22*6 周 32.05 ±3.34△ - 18.23 ±2.36*8 周 32.41 ±3.52△ - 18.89 ±2.56*對(duì)照組 30 周 20.33 ±3.24 10.27 ±1.09 13.54 ±2.122 周 20.43 ±3.16 10.25 ±1.03 13.68 ±2.384 周 20.61 ±3.31 10.66 ±1.04 13.77 ±2.086 周 20.74 ±3.34 10.37 ±1.13 13.65 ±2.318周20.26 ±3.74 10.43 ±0.96 13.75 ±2.28

IL-2可參與炎癥免疫反應(yīng)，還具有調(diào)節(jié)基因表達(dá)的作用，如可誘導(dǎo)下丘腦加壓素和催產(chǎn)素基因表達(dá)、誘導(dǎo)下丘腦釋放促皮質(zhì)激素釋放激素，以及誘導(dǎo)杏仁核和海馬釋放CRH和加壓素等。本研究抑郁組4、6、8周IL-2水平明顯高于對(duì)照組，分析IL-2水平逐漸升高導(dǎo)致了下丘腦—垂體—腎上腺(HPA)軸的亢進(jìn)，而HPA軸的中樞興奮將使神經(jīng)—內(nèi)分泌—免疫系統(tǒng)功能紊亂，下丘腦激素及血漿皮質(zhì)醇等的增高，最終導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生 MOD癥狀［4，5］。IL-6可通過(guò)受損的血腦屏障進(jìn)入腦脊液，其主要由小膠質(zhì)細(xì)胞和(或)星形膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生［6］，可促進(jìn)B細(xì)胞增殖和分泌抗體、增強(qiáng)NK細(xì)胞活性。本研究抑郁組2、4、6、8周IL-6水平明顯高于對(duì)照組，提示MOD存在明顯的免疫激活，并持續(xù)作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)。IL-10作為一種免疫抑制因子，有助于減輕MOD癥狀，促進(jìn)疾病的恢復(fù)。本研究抑郁組4周IL-10水平明顯低于對(duì)照組，提示IL-10不能有效抑制炎前細(xì)胞因子過(guò)度表達(dá)而產(chǎn)生的級(jí)聯(lián)效應(yīng)，可能使MOD的病理改變不斷放大，從而促進(jìn)抑郁的發(fā)生和發(fā)展。

綜上所述，隨著刺激的推進(jìn)、抑郁病情的發(fā)展，腦脊液中細(xì)胞因子呈動(dòng)態(tài)變化，并通過(guò)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)之間相互調(diào)節(jié)，影響MOD的發(fā)生發(fā)展。本研究結(jié)果為臨床應(yīng)用細(xì)胞因子治療MOD提供了依據(jù)。

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