滕彥玲

宮頸鱗癌宮頸癌的發(fā)生是一個由癌前病變演變?yōu)榘┑倪B續(xù)性病理過程。許多研究己經(jīng)提示，高危型人類乳頭瘤病毒(HPV)是導致宮頸癌的主要原因［1］。我們應用抑制基因蛋白(P16)來檢測不同的HPV感染性宮頸病變中，為提高早期診斷率尋找更為客觀、可靠的指標及監(jiān)測病變的進展。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院活檢或手術(shù)切除的子宮頸組織標本，分為2組:①實驗組:共105例，其中子宮頸鱗癌15例，子宮頸上皮內(nèi)瘤變89例CINⅠ組39例，CINⅡ組18例，CINⅢ組32例;②對照組:20例為非子宮頸病變手術(shù)切除正常子宮頸組織標本。

1.2 檢測方法

1.2.1 HPV檢測 石蠟常規(guī)包埋切片，水化，枸櫞酸鹽緩沖液微波修復抗原15 min，免疫組化。HPV陽性物質(zhì)定位于細胞膜和細胞質(zhì)，陽性標準以細胞膜和(或)細胞質(zhì)出現(xiàn)棕色顆粒為陽性表達，陽性細胞 ＞5%者為陽性。

1.2.2 P16檢測 所有標本均經(jīng)10%福爾馬林液固定，石蠟包埋，切片厚0.4 μm，常規(guī)HE染色，光鏡下行細胞形態(tài)學觀察，以確定病理診斷及分組。免疫組化染色采用S-P法，按說明書操作。陽性對照片為已知宮頸癌陽性片，PBS代替一抗為陰性對照片。免疫組化結(jié)果:P16蛋白陽性表達可見細胞質(zhì)和細胞核棕黃著色，連續(xù)觀察10個高倍視野，以免疫組化反應陽性細胞數(shù)超過25%作為陽性的診斷標準。

1.3 計數(shù)資料采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

表1 HPV與P16在宮頸上皮內(nèi)瘤病變中表達的相關(guān)性

2 結(jié)果

HPV與P16在宮頸上皮內(nèi)瘤病變中表達的相關(guān)性，HPV16、P16在頸上皮內(nèi)瘤病變和癌組織中均有較高表達，在HPV陽性表達的癌組織中，Ki267表達多在“++”以上，而12例HPV陰性癌組織中，P16亦為高表達。經(jīng)等級相關(guān)性分析，HPV和P16在頸上皮內(nèi)瘤病變和癌組織中的表達呈顯著正相關(guān)(χ2=20.11，P＜0.05)。見表1。

3 討論

人類腫瘤中的細胞增殖失控是發(fā)生惡性病變的重要原因，P16是近年來發(fā)現(xiàn)的與細胞周期調(diào)控密切相關(guān)的抑癌基因，它定位于人類染色體9P21，全長8.skb，由2個內(nèi)含子和3個外顯子組成。P16是細胞周期蛋白依賴激酶CDK4/6的抑制因子，P16基因轉(zhuǎn)錄抑制必然導致P16表達減少甚至消失，cyclin D失去競爭對象，大量與CDK4結(jié)合，激發(fā)Rb的磷酸化，細胞大量由G1期進入S期開始增殖，在無限制增殖過程中發(fā)生表型變化導致腫瘤形成。隨病變進展，P16蛋白以漿表達→漿核共表達→核表達依次推進，推測漿內(nèi)可能作為腫瘤抑制基因的靜止狀態(tài)存在，需要時進入核內(nèi)發(fā)揮作用。何慧儀等［2］發(fā)現(xiàn)，宮頸癌與癌前病變中P16的表達升高與HPV的感染有關(guān)，所以推測腫瘤細胞中P16的強陽性表達即意味著HPV在細胞中的整合。本研究發(fā)現(xiàn)P16的陽性率及陽性細胞的分布、著色強度在HPV感染的不同病變中均有不同，并隨著病變程度的加重P16陽性率明顯增高，陽性細胞的數(shù)量明顯增加，著色明顯增強。對于P16蛋白在宮頸鱗癌中高表達可能與Rb基因的失活有關(guān)［3］。Rb可抑制P16基因的表達，提示在Rb基因失活的腫瘤中，失活的Rb蛋白一方面失去對細胞周期的調(diào)節(jié)作用，使細胞生長失控，導致腫瘤發(fā)生;另一方面解除了對P16的抑制作用，使P16轉(zhuǎn)錄反饋性表達增強，導致P16蛋白表達升高［4］。綜上所述，P16缺失可能導致宮頸癌的發(fā)生，其抑制作用可能是通過抑制宮頸癌的細胞周期實現(xiàn)的。因此P16基因在宮頸癌的診治中發(fā)揮重要作用，可成為基因治療宮頸癌的靶基因。

［1］車雅敏，王家璧.HPV在宮頸癌發(fā)病中的作用機制研究.國外醫(yī)學·腫瘤學分冊，2004，31(4):306-309.

［2］何慧儀，盧麗娜，杜洪，等.Ki-67、Survivin、P16表達在宮頸癌和宮頸癌前病變診斷中的意義.中國婦幼保健，2006，21(13):1825-1827.

［3］董建新，韓萍，侯靈彤.宮頸上皮內(nèi)瘤變與基因表達.中國婦幼保健，2009，24(18):2591-2593.

［4］張亞靜，拉萊，蘇祖克，等.P16、Ki-67在子宮頸上皮內(nèi)瘤變及子宮頸鱗癌中的表達及意義.新疆醫(yī)科大學學報，2007，30(4):372-374.