李珍瑤 龍華泉 陳銀仲

廣東省江門市新會(huì)區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東江門 529100

梅毒（syphilis）屬于一種性傳播疾病，病原體為蒼白密螺旋體（treponema pallidum，TP）蒼白亞種，又稱梅毒螺旋體，主要通過(guò)性接觸直接傳染，接吻、手術(shù)、哺乳、輸血、接觸污染物也可被傳染。患梅毒的孕婦可通過(guò)胎盤感染胎兒，早期可致胎兒流產(chǎn)、早產(chǎn)，晚期感染的成活胎兒可患先天梅毒。近幾年梅毒的檢測(cè)陽(yáng)性率有所增高，現(xiàn)在很多醫(yī)院都將梅毒作為住院患者的常規(guī)檢查項(xiàng)目，筆者所在醫(yī)院這幾年也加大了對(duì)門診及體檢中心的檢查患者的宣傳防治力度，很多體檢患者都會(huì)進(jìn)行梅毒的血清學(xué)檢測(cè)，住院手術(shù)患者也開展了輸血前全套檢查，其中就包括梅毒的血清學(xué)檢測(cè)，因此，如何找出一種靈敏性和特異性都高，同時(shí)操作快速簡(jiǎn)便的方法，是本研究的目的。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

2010年1月1 日～2010年12月31日期間筆者所在醫(yī)院進(jìn)行梅毒血清學(xué)試驗(yàn)的患者，包括住院患者、門診患者，沒(méi)有區(qū)分初診患者及復(fù)查患者，也沒(méi)有從臨床上對(duì)陽(yáng)性患者進(jìn)行病程（一期到三期）的區(qū)分，共15230例。

1.2 檢測(cè)參考品

各方法試劑盒內(nèi)附的陽(yáng)性對(duì)照品及陰性對(duì)照品。

1.3 試劑

梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)診斷試劑盒（TRUST）由上海榮盛生物藥業(yè)有限公司提供；梅毒螺旋體抗體診斷試劑（膠體金法）由英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司提供；梅毒螺旋體抗體診斷試劑（凝集法）（TPPA法）由FUJIREBIO INC（富士瑞必歐株式會(huì)社）提供，上述試劑全部在有效期內(nèi)使用。

1.4 方法

采用TRUST、膠體金法、TPPA法3種方法分別對(duì)15 230例標(biāo)本進(jìn)行平行檢測(cè)，各種試驗(yàn)操作步驟及判斷嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

用TRUST、膠體金法、TPPA法3種方法檢測(cè)15 230份血樣，比較各種方法檢測(cè)結(jié)果的符合率及特性，見(jiàn)表1、2。

表1 3種方法梅毒檢測(cè)結(jié)果比較表

表2 3種梅毒檢測(cè)方法的特性比較

由表1、2看出，TPPA法確認(rèn)陽(yáng)性的標(biāo)本中，TRUST法的陽(yáng)性檢測(cè)率不到20%，因?yàn)門RUST只在一期梅毒后期、二期梅毒的檢出率較高；而膠體金法得陽(yáng)性率達(dá)90%以上，不受梅毒病程的影響，只與血清中梅毒抗體的水平有關(guān)，且操作較簡(jiǎn)易。

3 討論

人體感染梅毒螺旋體后，可產(chǎn)生多種抗體，特異性抗梅毒螺旋體抗體主要有IgM、IgG兩類。IgM抗體持續(xù)時(shí)間短，IgG抗體可終生存在，但抗體濃度一般較低，不能預(yù)防再感染。非特異性抗體又稱反應(yīng)素，是人體受TP感染后，機(jī)體迅速作出免疫應(yīng)答，在3～4周左右，由螺旋體破壞的組織細(xì)胞所釋放的類脂樣物質(zhì)以及螺旋體自身的類脂和脂蛋白刺激機(jī)體產(chǎn)生的IgM和IgG類抗體。

梅毒的血清學(xué)檢測(cè)試驗(yàn)根據(jù)抗原不同分為以下兩類：

3.1 非特異性類脂質(zhì)抗原試驗(yàn)

試驗(yàn)使用的抗原由牛心肌中提取的心磷脂、膽固醇和淳化的磷脂酰膽堿（卵磷脂）組成，即類脂質(zhì)抗原，用于對(duì)梅毒的篩查。方法主要有性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（venereal disease research laboratory test，VDRL）、不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（unheated serum reagin test，USR）、甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（toluidine red unheated-serum test，TRUST）、快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（RPR）等。

3.2 梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)

使用的抗原是梅毒螺旋體的特異成分。這類試驗(yàn)有多種，國(guó)際上通用的試驗(yàn)是梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)（TPHA）和熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS），國(guó)內(nèi)使用較多的是密螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和金標(biāo)記免疫層析法。

檢測(cè)非特異性抗類脂抗體（反應(yīng)素）的方法目前國(guó)內(nèi)最常用的是RPR法和TRUST法，并且長(zhǎng)期以來(lái)作為國(guó)內(nèi)臨床疑似患者和血站獻(xiàn)血員篩檢的主要方法，但其靈敏性與特異性稍差。TRUST在一期梅毒后期、二期梅毒的檢出率較高；而在一期梅毒早期和三期梅毒、潛伏梅毒及治療后梅毒可呈陰性[3]，在一期潛伏期及三期梅毒中檢出率較低（58%～85%[4-5]）。而且有報(bào)道稱這種抗體也可在非梅毒螺旋體感染的孕婦血中及多種急、慢性疾病患者，尤其是老年人的血液中檢出。所以TRUST等方法更適合臨床梅毒確診患者的療效跟蹤觀察及各種研究，而不大適合臨床病房的輸血前全套檢查，因?yàn)榇嬖谝欢ǖ穆z率以及假陽(yáng)性率。

檢測(cè)抗密螺旋體抗體國(guó)際上通用的試驗(yàn)主要有TPHA法和TPPA法，但由于操作稍繁瑣費(fèi)時(shí)，不及TP-ELISA法及金標(biāo)法方便快捷，目前主要用于篩檢陽(yáng)性標(biāo)本的確診。金標(biāo)法與TPPA法、ELISA法比較，其檢測(cè)梅毒螺旋體抗體更快速，操作簡(jiǎn)單，不需特殊設(shè)備，可單人份檢測(cè)，適合急門診患者和基層醫(yī)院，同時(shí)也適合體檢人員的大批量篩查。雖然有報(bào)道稱其特異性和靈敏度比TP-ELISA法稍低，但可作為住院患者輸血前全套檢查的初篩試驗(yàn)，陽(yáng)性結(jié)果后再結(jié)合TPPA法做進(jìn)一步的確診試驗(yàn)及TRUST滴度記錄，這樣結(jié)合檢查既可減少向臨床反饋結(jié)果的時(shí)間，也可大大提高檢測(cè)準(zhǔn)確性，同時(shí)也可減輕實(shí)驗(yàn)室工作人員的工作負(fù)擔(dān)，提高檢測(cè)效率。

[1]曾志良，陳春梅，段逸群.一期梅毒治療后血清學(xué)追蹤檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)，2004，18（3）：15-17.

[2]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：101-108.

[3]趙辨. 臨床皮膚病學(xué)[M].南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2001：515.

[4]張卓然.臨床微生物學(xué)和微生物檢驗(yàn)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：287.

[5]陳春梅，曾志良.潛伏梅毒85例血清學(xué)檢測(cè)分析[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)，2004，18（5）：329-330.