王軍偉

尿液潛血檢查是尿液檢驗中一個必不可少的項目，常用的檢驗方法有尿液分析儀潛血反應(yīng)和尿液顯微鏡檢查紅細(xì)胞(鏡檢RBC)兩種。近年來隨著尿液分析儀的迅速普及，測量參數(shù)向著快速、簡便、準(zhǔn)確的方向發(fā)展，為臨床提供了更好的診斷依據(jù)。筆者對284例門診患者的隨機(jī)尿樣，用尿液分析儀潛血反應(yīng)和尿液顯微鏡檢查紅細(xì)胞兩種方法進(jìn)行檢驗，并對兩種方法的符合程度進(jìn)行比較。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 隨機(jī)選取本院門診和住院患者尿液檢查標(biāo)本284例，其中男127例，女157例。每例標(biāo)本均在15min內(nèi)分別進(jìn)行尿液化學(xué)分析儀檢查和顯微鏡檢查。

1.2 試劑和儀器 本檢驗室所用儀器為長春迪瑞實業(yè)有限公司H-500型尿液化學(xué)分析儀，所用試紙為長春萬成生物電子工程有限公司11 d(100人份/瓶)。電鏡顯微鏡為奧林巴斯CX21生物顯微鏡。

1.3 檢驗原理 尿液分析儀使用的是干化學(xué)試紙法，是根據(jù)多聯(lián)試帶上各模塊與尿液成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)后顏色變化的深淺來檢測尿液中的某化學(xué)物質(zhì)，如直接檢測紅細(xì)胞、白細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)涵物，問接推斷細(xì)胞的有無。尿液分析儀潛血反應(yīng)原理是:血紅蛋白(Hb)中亞鐵血紅素的過氧化物酶樣活性可使過氧化物分解釋放出新生態(tài)［O］，后者氧化底物鄰甲苯胺變成鄰聯(lián)甲苯胺發(fā)生上由黃色→草綠色→深藍(lán)色的顏色變化。尿液顯微鏡檢查則是通過顯微鏡的放大作用直接將細(xì)胞等有形成分直觀真實地呈現(xiàn)在鏡下，是對底物的真實反映。

1.4 檢驗方法

1.4.1 尿液分析儀檢測 于混勻的10ml新鮮尿液中浸入尿試紙條1 s后取出，上儀器進(jìn)行測定，自動打印結(jié)果。結(jié)果報告分為:-、+-、+、++、+++、++++。

1.4.2 顯微鏡檢測 取尿液10ml于試管中，在水平離心機(jī)1500 r/min條件下有效離心5min。棄去上清液，留沉淀0.2ml。充分混勻后，取出約20 ul于載玻片上，加蓋玻片(2.0 cm×2.0 cm)，然后用較弱的光線以低倍鏡觀察全貌，以免漏掉量少而有意義的物體，再轉(zhuǎn)用高倍鏡辨認(rèn)細(xì)胞，記錄10個視野的紅細(xì)胞數(shù)，并計算出平均值。結(jié)果報告為:個/高倍視野(HP)。

2 結(jié)果

在隨機(jī)選取的284例檢查標(biāo)本中，尿液分析儀潛血反應(yīng)呈陽性，顯微鏡檢查有紅細(xì)胞的有98例，鏡檢無紅細(xì)胞的有14例;尿液分析儀潛血反應(yīng)呈陰性，顯微鏡檢查有紅細(xì)胞的有8例，顯微鏡無紅細(xì)胞的有164例。兩種檢驗方法結(jié)果存在一定差異。

2.1 假陽性 即尿液分析儀潛血反應(yīng)陽性，鏡檢陰性，其常見原因有:①血紅蛋白(Hb)尿液分析儀潛血反應(yīng)既能與完整的RBC發(fā)生陽性反應(yīng)，也可與RBC溶解釋放的Hb發(fā)生陽性反應(yīng)，而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量極微，定性為陰性。疾病時，尿中Hb有兩個來源:一是發(fā)生血管內(nèi)溶血，血漿Hb超過了結(jié)合珠蛋白的結(jié)合能力，游離Hb從尿中排出。另一個是尿路(尤其是上尿路)出血，RBC在高滲或(和)低滲時破壞Hb逸出。此時，尿液分析儀潛血反應(yīng)陽性，但尿沉渣鏡檢不見RBC或僅見RBC碎片。②肌紅蛋白(Mb)分子中也含有血紅素基團(tuán)，具有過氧化物酶活性。Mb主要存在于心肌和骨骼肌組織中，正常人尿中含量甚微，不能檢出。當(dāng)心肌或骨骼肌發(fā)生嚴(yán)重?fù)p傷時，血漿Mb增高，經(jīng)腎臟排泄，使尿液Mb含量增高，故潛血反應(yīng)呈陽性，鏡檢RBC為陰性［1］。③某些患者尿液中含有對熱不穩(wěn)定酶，也可使試劑塊發(fā)生顏色改變，出現(xiàn)潛血反應(yīng)陽性，鏡檢為陰性。④某些氧化性污染物，例如次氯酸鹽會導(dǎo)致潛血反應(yīng)假陽性。⑤菌尿，在泌尿系感染中，大多數(shù)革蘭陰性菌和某些革蘭陽性菌可能釋放過氧化物酶活性物質(zhì)或本身為了代謝的需要，在繁殖過程中，合成觸酶、過氧化物酶和超氧化物歧化酶，這些物質(zhì)和酶在干化學(xué)法測定尿紅細(xì)胞時，都能使試帶中的過氧化氫茴香素或過氧化氫稀枯分解出游離氧，可造成假陽性結(jié)果。鏡檢RBC為陰性。⑥長時間存放及高溫實驗證明，標(biāo)本不新鮮，存放時間長或高溫存放，使?jié)撗磻?yīng)的陽性率相對增高，而RBC鏡檢相應(yīng)減少，測試結(jié)果極有可能出現(xiàn)假陽性。因此，建議尿液標(biāo)本存放時間不得超過4 h［2］。⑦尿試紙條的超期使用或被污染以及不妥善保存和操作方法的不正確，均可造成測試結(jié)果假陽性。⑧尿液分析儀靈敏度過高(0.2 mg/dl出現(xiàn)++)，“級差”范圍太大(0.8～50 mg/dl級為+++)，常會遇到儀器測試為++，而鏡檢測試紅細(xì)胞為陰性，臨床上又找不到任何導(dǎo)致血紅蛋白尿原因的情況。

2.2 假陰性 即顯微鏡檢查呈陽性，尿液分析儀潛血反應(yīng)呈陰性，其常見原因有:尿液標(biāo)本中存在大量的維生素C時，能競爭性奪取反應(yīng)產(chǎn)生的氧，從而引起假陰性反應(yīng)。高比重、高蛋白尿樣降低了試劑潛血反應(yīng)的靈敏度，使?jié)撗磻?yīng)呈假陰性。

2.3 離心對結(jié)果的影響 離心時，如速度過快，可使有形成分破壞;但速度過慢，當(dāng)每毫升尿液中的RBC在5000個以下時，沉渣中可能找不到RBC，以至把隱匿型腎小球腎炎漏掉，因而在對檢驗結(jié)果有懷疑時，可用潛血反應(yīng)證實。

3 討論

綜上所述，尿液標(biāo)本中紅細(xì)胞異常敏感，尿液分析儀檢測有時可能與顯微鏡檢測結(jié)果存在差異，我們要充分考慮影響檢測結(jié)果各種因素，并結(jié)合臨床癥狀進(jìn)行系統(tǒng)分析。

采用兩種不同檢測方法的目的，在于區(qū)分尿隱血陽性患者的血尿原因。當(dāng)紅細(xì)胞通過腎小球基底膜裂孔時，會使其大小和形態(tài)或血紅蛋白含量發(fā)生改變，如皺縮紅細(xì)胞、大紅細(xì)胞、胞質(zhì)有葫蘆狀外展、內(nèi)有細(xì)顆?；虬て屏鸭安糠职|(zhì)丟失畸形紅細(xì)胞。我們將之定義為腎小球性紅細(xì)胞，而由于腎小球以下部位和泌尿通路上的出血多因毛細(xì)血管破裂所致，紅細(xì)胞形態(tài)可完全正常。

尿液分析儀法檢測尿中紅細(xì)胞異常敏感，有時可與鏡檢結(jié)果存在差異，要充分考慮影響測定結(jié)果因素，并結(jié)合臨床進(jìn)行分析，原則上尿液分析儀潛血反應(yīng)陽性結(jié)果都應(yīng)以顯微鏡法復(fù)檢，這是做好尿液檢驗質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)和關(guān)鍵所在。對于尿液分析儀法測定的陰性結(jié)果與鏡檢不一致的也應(yīng)復(fù)查，以確保測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床診斷提供可靠的依據(jù)。

［1］何艷.尿液分析儀檢測尿隱血與鏡檢紅細(xì)胞對照.今日科技，2000，10:36.

［2］邊衛(wèi)萍.FA-100尿液分析儀檢測潛血與血尿測定的影響因素探討.Proceeding0TClinicalMedicine，2003，12(6):450.