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        公豬精液的保存三法

        2011-08-15 00:44:06于長春
        中國豬業(yè) 2011年10期
        關鍵詞:保溫瓶超低溫棗莊市

        于長春 韓 慧 陳 芳

        (1山東省棗莊市臺兒莊區(qū)澗頭集鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合辦公室,山東省棗莊市 277415;2山東省棗莊市山亭區(qū)農(nóng)業(yè)局,山東省棗莊市 277200)

        公豬精液的保存三法

        于長春1韓 慧2陳 芳2

        (1山東省棗莊市臺兒莊區(qū)澗頭集鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合辦公室,山東省棗莊市 277415;2山東省棗莊市山亭區(qū)農(nóng)業(yè)局,山東省棗莊市 277200)

        公豬精液保存的原則是抑制精子活動,降低其代謝速度,以便達到延長精子存活時間的目的。本文分別闡述了保存精液的三種方法及其注意事項,對豬的人工授精工作具有較強的指導意義。

        公豬;精液;保存方法

        公豬精液的保存原則是抑制精子活動,降低其代謝速度,以便達到延長精子存活時間的目的。為了抑制精子活動,降低其代謝水平,普遍采用的保存方法是降溫,隨著溫度的降低,精子趨于靜止,其能量消耗也大為減少。精子降溫保存猶如動物的冬眠一樣,精子并未喪失生命力,一旦溫度升高,環(huán)境適宜,精子就會重新活動起來。保存精液的方法如果按溫度來分,可分為常溫保存、低溫保存和超低溫保存3種。從保存期限來看,前兩種保存期較短,為1~7天,后一種保存期較長,可達數(shù)月至數(shù)年。

        1 常溫保存

        1.1 保存溫度

        指精液稀釋后保存在一般溫度下,如室溫下、冷水中、保溫瓶中或地窖中。常溫保存的溫度一般在10~25℃之間。在這種溫度下,精子運動雖明顯減弱或消失,但其代謝過程并未停止,只是有所降低。因此,只能在一定限度內延長精子存活時間,一般可保存3天左右。此法因為不需要低溫設備,在實際生產(chǎn)中具有一定實用價值。在常溫下保存的精液,易孳生微生物,故在稀釋液中必須加入一定量的抗生素(稀釋液配方為葡萄糖6g、檸檬酸鈉0.35g、乙二胺四乙酸鈉0.37g、碳酸氫鈉0.12g、鏈霉素10萬單位、青霉素3萬單位、蒸餾水100mL),稀釋比例為精液︰稀釋液=1︰0.5)。

        1.2 冷水保存法

        在農(nóng)村沒有冷源條件時,可用冷水保存精液,常用的兩種方法為保溫瓶保存和水井保存。

        1.2.1 水井保存法

        將精液瓶用塑料袋裝好密封,放在底部穿孔的竹筒或竹籃等容器內,再把竹筒或竹籃連同精液瓶一起放到井底保存,用時從井下取出。

        1.2.2 保溫瓶保存法

        將新鮮的井水裝入廣口保溫瓶(也叫冰壺)內,精液瓶裝在塑料袋里,將塑料袋浸在冷水中,每天換水1次。

        2 低溫保存

        指在常溫下進一步降低溫度,使接近冰點,但使精液不致結冰。方法是把稀釋的精液(精液稀釋應在精液采出后盡快進行,而且精液與稀釋液的溫度必須調整到一致,一般是將精液與稀釋液置于同一溫度中進行稀釋,稀釋比例為精液︰稀釋液=1︰0.5。常用的豬精液稀釋液配方有葡檸稀釋液——葡萄糖5g、檸檬酸鈉 0.5g、蒸餾水100mL和葡檸乙液——葡萄糖5g、檸檬酸鈉0.3g、乙二胺四乙酸 0.1g、蒸餾水100mL)放在冰箱內或裝有冰塊的保溫瓶中,溫度一般控制在0~5℃之間(精液在低溫保存之前,需經(jīng)預冷平衡,從30℃降至 0~5℃大約需要 1~2小時完成降溫全過程,以每分鐘降溫0.2℃左右為宜)。在這種溫度下,精子運動完全停止,代謝顯著降低,故保存時間長于常溫保存(一般能保存6~8天)。精液使用前,要鏡檢精子的活力,活力低于0.6或死精多的不要使用。此方法在超低溫冷凍豬精液未應用于生產(chǎn)之前,在豬人工授精工作中起到了重要作用。

        3 超低溫保存

        此方法是目前最先進的保存方法,是將精液的溫度降到冰點以下,使精液凍結后保存。

        3.1 保存溫度

        超低溫保存的溫度一般為-196℃(液氮)。在此溫度下,精子的代謝完全停止,保存時間較長,經(jīng)數(shù)月甚至數(shù)年后仍可應用。冷凍精液使用最普遍的冷源是液氮。應用超低溫保存法,須保證冷源(液氮)的供應不能中斷。在應用液氮罐保存時,應隔一段時間加一次液氮。

        3.2 稀釋冷凍

        當精液采集后,在30~32℃的溫度條件下,靜置半小時,或對全份精液離心處理 10分鐘,轉速為1500~2000轉/分鐘,進行濃縮,除去精清。而后用1號稀釋液稀釋(1號稀釋液為等溫的脫脂乳,按精液︰稀釋液=1︰0.5的稀釋比例稀釋),經(jīng)1小時溫度降至15℃, 平均每 10分鐘下降 2.5~2.8℃;之后再用同溫的2號稀釋液進行第二次稀釋(2號稀釋液為蔗糖卵黃液,其配方是:12%的蔗糖液:卵黃液=75︰25,按原精液量1︰1的稀釋比例稀釋),再經(jīng)2~3小時,溫度降至8℃,平均每10分鐘下降0.47℃,最后再用3號稀釋液稀釋(3號稀釋液為等溫含甘油的蔗糖卵黃液,其配方是:12%的蔗糖液︰甘油︰卵黃液=75︰5︰20,按原精液量1︰1的稀釋比例稀釋),再靜置0.5~1.0小時,待溫度降至5℃時,按一定程序進行顆粒滴凍。滴凍的方法是,用5mL的注射器吸取稀釋好的精液,在盛有液氮的鋁盒內進行滴凍,每粒0.1mL。

        3.3 溫水解凍

        冷凍精液在使用時,需進行解凍。解凍時取1mL解凍液(解凍需要使用解凍液,同時也是精液再次稀釋的過程,解凍液常用的配方為:葡萄糖3.7g,二水檸檬酸鈉0.6g,乙二胺四乙酸0.125g,碳酸氫鈉0.125g,氧化鉀0.075g,青霉素10萬單位,鏈霉素0.1g,加蒸餾水至100mL),裝入小試管內,放在40~55℃的溫水中,使解凍液升溫,然后放1粒精液到解凍液中,由溫水中取出小試管,并不停的搖動,使之融化。解凍后的顆粒精液,經(jīng)顯微鏡檢查合格后,應立即給母豬輸精。

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