房紹鵬

吉林省食品藥品審評(píng)中心，吉林長(zhǎng)春 130062

伊曲康唑系三唑類抗真菌藥，具有抗菌活性強(qiáng)、抗菌譜廣、不良反應(yīng)少等特點(diǎn)，尤其是對(duì)深部真菌感染療效較好[1]。食物特別是油脂類食物會(huì)促進(jìn)伊曲康唑的腸道吸收[2]，所以選擇餐后給藥。通過研究探討伊曲康唑的藥代動(dòng)力學(xué)特征，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀（日本島津，LC-2010A），包括自動(dòng)進(jìn)樣器、四元低壓梯度泵、紫外檢測(cè)器和N2000工作站。伊曲康唑?qū)φ掌罚ㄏ愀蹅ッ裰扑帍S有限公司）；洛伐他定（中國藥品生物制品檢定所）。進(jìn)口膠囊（意大利Janssen-Cilag股份有限公司）；國產(chǎn)膠囊（偉民制藥廠有限公司）。乙腈為色譜純，剩下試劑為分析純。

1.2 受試對(duì)象

20名健康男性受試者，平均年齡為（24.1±1.5）歲，體重（61.5±4.0） kg，身高（170.3±4.2） cm，血壓、心臟、肝腎功能、血尿常規(guī)各指標(biāo)檢查均正常，試驗(yàn)期間禁服其它藥物和咖啡、煙、酒、茶等，試驗(yàn)前14 d未用任何藥物。所有受試者均簽署知情同意書，試驗(yàn)方案經(jīng)筆者所在醫(yī)院倫理委員會(huì)審批同意。

1.3 試驗(yàn)方法

受試者隨機(jī)雙周期交叉單劑量口服受試制劑或參比制劑100 mg，清洗期為12 d。受試者提前1晚禁食，第2天早晨7：00統(tǒng)一進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)早餐，進(jìn)餐時(shí)間為40 min，后用200 mL溫開水送服試驗(yàn)藥物，服藥2 h后方可飲水，服藥后4 h和10 h統(tǒng)一進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)中、晚餐。分別于服藥前和服藥后0.5、1、2、3、4、5、6、8、10、12、24、48 和 72 h 依次抽取靜脈血 5 mL， 置于肝素化抗凝試管中，分離血漿后于-40 ℃冷凍貯存，備用。

1.3.1 色譜條件 迪馬C18柱（ 4.6 mm×250 mm，5μm），流動(dòng)相為水∶乙腈（35∶65，V/V），柱溫40℃，流速1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)263 nm，進(jìn)樣量20 μL。

1.3.2 貯備液的配置 對(duì)照品貯備液（精密稱取伊曲康唑?qū)φ掌芳s5 mg，置50 mL量瓶中，用萬能溶劑（DMF）溶解并稀釋至刻度，得伊曲康唑?qū)φ掌焚A備液）。4 ℃冰箱避光貯存，測(cè)定時(shí)用甲醇稀釋至所需濃度。內(nèi)標(biāo)貯備液（精密稱取洛伐他定適量，用甲醇溶解并稀釋至20 μg/mL）。

1.3.3 血漿樣品的處理方法 取血漿0.2 mL，置10 mL離心管內(nèi)，加內(nèi)標(biāo)貯備液20μL，渦旋混勻5 min后，加入乙醚5 mL，渦旋振蕩 5 min，離心（4 200×g）10 min，取上清液于 40 ℃下氮?dú)獯蹈?，剩余物用流?dòng)相100 μL復(fù)溶，待測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 專屬性考察

將受試者空白血漿的色譜圖和血漿中加入樣品伊曲康唑和內(nèi)標(biāo)洛伐他定得到的色譜圖進(jìn)行對(duì)照比較，證明血漿中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾其測(cè)定。其中伊曲康唑和內(nèi)標(biāo)洛伐他定的保留時(shí)間分別為10.5min、8.6 min。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定

取空白血漿，精密加入伊曲康唑?qū)φ掌焚A備液適量，制得伊曲康唑濃度分別為 5、10、25、50、100、200 和 500 μg/L 的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。按“1.3.3”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)樣測(cè)定，記錄其色譜圖。以待測(cè)物伊曲康唑的濃度為橫坐標(biāo)，以待測(cè)物伊曲康唑與內(nèi)標(biāo)物洛伐他定的峰面積比值為縱坐標(biāo)，用加權(quán)最小二乘法進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：R=2.096×10-2C–0.009 8，r=0.994 5。表明伊曲康唑在5～500 μg/L濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。最低定量限為5μg/L，配制該濃度的血漿樣本6份，進(jìn)樣分析，得偏差均小于15%，RSD為8.9%。

2.3 方法的精密度和準(zhǔn)確度的確證

制備伊曲康唑低、中、高（10、50、400μg/L）3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品各6份，持續(xù)測(cè)定4d，計(jì)算求得本法的精密度與準(zhǔn)確度。伊曲康唑3個(gè)濃度水平的批內(nèi)和批間的精密度和準(zhǔn)確度的RSD均＜15%，方法回收率為97.0%～99.1%。

2.4 穩(wěn)定性測(cè)定

本試驗(yàn)分別考察了血漿樣品經(jīng)提取后在室溫放置24、48 h和反復(fù)凍融3次后的穩(wěn)定性，結(jié)果顯示伊曲康唑的血漿樣品在本研究的試驗(yàn)條件下是穩(wěn)定的，方法回收率為96.2%～98.8%。

2.5 參比制劑與受試制劑主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

Ke（/h）分別為（0.011±0.008）和（0.012±0.004）：t1/2（h）分 別 為（22.1±5.2）和（21.3±2.6）：tmax（h）為（4.7±1.3）和（4.2±0.9）：Cmax（μg/L）為（2 112.4±821.0）和（135.6±47.2）：AUC 0-324 [μg / （L·h） ]為（2 112 .4±821.0）和（2 089.8 ±798.1）：AUC 0-∞ [μg /（ L·h） ]為（2 430.4±899.0）和（2 360.5±821.9）：CL/F（L/h）為（89±21）和（82±15）。

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)雙單側(cè)t檢驗(yàn)及90%置信區(qū)間法評(píng)價(jià)，受試制劑的相對(duì)生物利用度為（99.7±9.2）%，由此確定兩種制劑生物等效。本研究采用的高效液相內(nèi)標(biāo)法測(cè)定伊曲康唑血漿濃度[3]，經(jīng)方法驗(yàn)證，定量為5.0 μg/L，結(jié)果較為理想，乙醚干擾少，與主藥內(nèi)標(biāo)分離良好，所以選用乙醚作為提取溶劑處理血漿樣品[4]。20 名健康受試者進(jìn)食高脂食物后單劑量口服伊曲康唑膠囊100 mg，血藥濃度達(dá)峰時(shí)間約為4.2 h，在體內(nèi)的消除半衰期約為21.3 h。伊曲康唑脂溶性較強(qiáng)但水溶性弱，尤其是高脂類食物可能會(huì)增加其腸道內(nèi)的消化能力，從而使其有效吸收[5-6]。本試驗(yàn)考察了高脂飲食后兩種制劑的藥動(dòng)學(xué)特征、藥動(dòng)參數(shù)及生物等效性，為臨床合理用藥提供了依據(jù)。

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