杜貴勝 王金亭 趙誠(chéng) 王明陽

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocyte growth factor，HGF)是一種內(nèi)皮細(xì)胞特異性生長(zhǎng)因子，不僅可促進(jìn)血管再生、組織修復(fù)、抑制細(xì)胞凋亡、殺傷腫瘤細(xì)胞、抗纖維化，作為一種新的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，還對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的生長(zhǎng)、發(fā)育發(fā)揮重要作用，被認(rèn)為是目前在細(xì)胞培養(yǎng)中最強(qiáng)的DNA合成刺激物［1］。HGF mRNA在腦中分布很廣，包括大腦皮質(zhì)、嗅球、主嗅覺皮質(zhì)、海馬CA1區(qū)和小腦的神經(jīng)元等［2］。研究發(fā)現(xiàn)急性腦梗死的梗死灶周圍可見HGF表達(dá)上調(diào)［3］，從而推斷HGF可能參與了腦梗死的發(fā)生發(fā)展。本研究以2010年1月至2010年12月入住我院的ACI患者為研究對(duì)象，通過檢測(cè)患者血清HGF水平，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 ACI組：2010年1月至2010年12月在我院神經(jīng)外科住院的ACI患者30例，男28例，女2例;年齡46～79歲，平均(58.2±7.6)歲;均符合全國(guó)第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］;并經(jīng)頭顱CT或MRI證實(shí)，發(fā)病時(shí)間≤24 h，均為首次發(fā)病。對(duì)急性腦梗死患者根據(jù)臨床神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［4］;按病情輕重分為輕度組(0～15分，11例)、中度組(16～30分，11例)和重度組(31～45分，8例)。所有患者均行血常規(guī)、尿常規(guī)、凝血常規(guī)、生化等檢查，排除腦出血、嚴(yán)重心肺疾病、顱內(nèi)及全身腫瘤、自身免疫疾病、血液系統(tǒng)疾病、近期感染、輸血、嚴(yán)重肝腎功能不全，無近期使用免疫抑制劑治療等。健康對(duì)照組：均為我院同期健康體檢者，30例，男27例，女3例;年齡41～78歲，平均(57.6±8.1)歲，神經(jīng)系統(tǒng)檢查及頭顱CT檢查無異常。兩組一般情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 檢測(cè)方法 ACI組分別于發(fā)病后1、7、14、21、30 d各采血1次;對(duì)照組采血1次，均采取清晨抽空腹肘靜脈血6 ml，經(jīng)3000r/min離心10 min，取上清液，置于-20℃冰箱保存待測(cè)。所有標(biāo)本在2個(gè)月內(nèi)采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定HGF，全部標(biāo)本均為平行雙孔實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按說明書要求進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，檢測(cè)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，應(yīng)用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者不同時(shí)期血清HGF比較 與正常對(duì)照組相比，腦梗死組在病程1、7、14、21 d血清HGF濃度均顯著增高(P＜0.05)。腦梗死組恢復(fù)期前各時(shí)間點(diǎn)之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)，(見表1)。

2.2 ACI組不同神經(jīng)功能缺損程度血清中HGF水平的比較不同程度神經(jīng)功能缺損腦梗死患者，急性期神經(jīng)功能缺損程度越重，血清HGF水平越高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。(見表2)。

表1 兩組患者不同時(shí)期血清HGF水平(±s)

表1 兩組患者不同時(shí)期血清HGF水平(±s)

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05。

0.19±0.11對(duì)照組1 d 7 d 14 d 21 d 30 d ACI組 30 0.84±0.17* 0.66±0.16* 0.57±0.16* 0.49±0.15*組別例數(shù) HGF水平(μg/L)0.16±0.08 30

表2 ACI患者不同神經(jīng)功能缺損程度血清中HGF水平(±s)

表2 ACI患者不同神經(jīng)功能缺損程度血清中HGF水平(±s)

注：與相鄰的上一組比較，*P＜0.05。

1 d 30 d輕度組組別例數(shù) HGF水平(ug/L)11 0.36±0.15 0.19±0.10中度組 11 0.89±0.18* 0.20±0.10重度組 8 1.44±0.61*0.21±0.11

3 討論

急性腦梗死時(shí)由于局部腦血流減少或供血中斷，腦組織缺血缺氧，出現(xiàn)神經(jīng)元死亡，被認(rèn)為是腦梗死病理改變的主要病變過程。Tsuzuki等［5］研究發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)HGF陽性細(xì)胞為能分泌多種營(yíng)養(yǎng)因子的反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞，因此HGF作為神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子可能在腦缺血后的修復(fù)和重塑中起重要作用。我們的研究結(jié)果顯示腦梗死組急性期HGF水平較正常組顯著升高，在病情進(jìn)入恢復(fù)期后逐漸恢復(fù)正常水平，也提示HGF可能作為腦梗死血管內(nèi)皮損傷后的一種保護(hù)機(jī)制代償性升高，參與腦梗死的發(fā)病與修復(fù)過程。尤志珺等［6］將人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因直接轉(zhuǎn)染至大腦中動(dòng)脈閉塞模型大鼠腦缺血半暗帶區(qū)探討人HGF對(duì)腦梗死后學(xué)習(xí)記憶功能恢復(fù)的機(jī)制，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染質(zhì)粒組的半暗帶區(qū)HGF蛋白表達(dá)水平和血管計(jì)數(shù)顯著高于轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組和假手術(shù)組，而轉(zhuǎn)染質(zhì)粒組的梗死面積顯著小于轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組，同時(shí)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒組的梗死后學(xué)習(xí)和記憶功能明顯提高，說明人HGF基因蛋白能夠在缺血半暗帶區(qū)表達(dá)，通過增加梗死區(qū)的血管數(shù)量，明顯縮小腦梗死體積，對(duì)腦梗死有良好的治療作用，同時(shí)對(duì)腦梗死后學(xué)習(xí)和記憶功能的恢復(fù)也有較好作用。這一方法為基因治療缺血性腦血管病及血管性癡呆探索新的途徑。

［1］Honda S，Kagoshima M，Wanaka A，et al.Localization and functional coupling of HGF and c-Met/HGF receptor in rat brain：implication as neurotrophic factor.Mol Brain Res，1995，32(2)：197.

［2］Nagayama T，Nagayama M，Kohara S，et al.Post-ischemic delayed expression of hepatocyte growth factor and c-Met inmouse brain following focal cerebral ischemia.Brain Res，2004，999：155.

［3］Nagayama T，Nagayama M，Kohara S，et al.post-ischemic delayed expression of hepatocyte growth factor and c-Met in mouse brain following focal cerebral ischemia.Brain Res，2004，5(2)：155.

［4］中華神經(jīng)科學(xué)會(huì).各類腦血管疾病診斷要點(diǎn).中華神經(jīng)科雜志，1996，29(6)：379.

［5］Tsuzuki N，Miyazawa T，Matsumoto K，et al.Hepatocyte growth factor reduces the infarct volume after transient focal cerebral ischemia in rats.Neurol Res，2001，23(4)：417.

［6］尤志珺，劉勇.人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因轉(zhuǎn)染治療腦梗死的實(shí)驗(yàn)研究.中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2010，27(12)：1064.