陳新江 浙江省臨安市中醫(yī)院 臨安 311300陳丹菲 浙江省中醫(yī)藥研究所

泰安寧顆粒系由地黃、合歡皮、赤芍等中藥經(jīng)提取加工制成的顆粒劑，具有滋腎養(yǎng)陰、平肝寧心的功效，用于女性圍絕經(jīng)期綜合征。本文建立了高效液相色譜法測定顆粒中芍藥苷含量的方法，方法簡便快速，重現(xiàn)性及穩(wěn)定性均較好，為泰安寧顆粒制劑的質(zhì)量控制提供試驗數(shù)據(jù)。

1 儀器與試劑

Agilentl100高效液相色譜儀；色譜柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5μm，北京迪馬公司）；KQ—100DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲有限公司）；0.45μm微孔濾膜（上海醫(yī)藥工業(yè)研究院）；乙腈（色譜純），甲醇（分析純）、磷酸（分析純）；芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號0736-200116）；泰安寧顆粒（批號：100301、100505、100508、100511）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5m）；流動相：乙腈—0.01%磷酸溶液（15∶85）；檢測波長：230nm；流速：1mL/min；柱溫：40℃；保留時間：約12min；理論塔板數(shù)：不低于3 000。在此條件下，芍藥苷與其他組分達到基線分離，陰性無干擾。

2.2 對照品溶液制備 精密稱取真空干燥至恒重的芍藥苷對照品適量，加甲醇溶解，制成每1mL含50μg的溶液，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液制備 取本品裝量差異項下的內(nèi)容物，混勻，精密稱取0.5g，置50mL量瓶中，加甲醇約45mL，超聲提取20min，取出，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，靜置，用0.45μm的微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。

2.4 空白試驗 取缺赤芍陰性樣品0.5g，照樣品含量測定項下提取，按上述色譜條件分析。與對照品相應(yīng)的位置上，無明顯其它峰出現(xiàn)。結(jié)果證明陰性樣品對該試驗無干擾。

2.5 線性范圍考察 精密稱取芍藥苷對照品7.7mg，加甲醇適量溶解并定容至25mL，精密吸取上述溶液0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL，用甲醇稀釋至10mL，搖勻，每一濃度標樣進樣20μL，以峰面積積分值為縱坐標，芍藥苷對照品為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程為Y=939747x+43424，r=0.99998。結(jié)果表明芍藥苷在0.308～3.696μg之間呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗 取同一對照品溶液重復進樣測定5次，芍藥苷平均峰面積為1201989，RSD=0.74%（n=5），結(jié)果表明精密度良好。

2.7 重現(xiàn)性試驗 按2.3項下的方法對同一批樣品（100301）進行6次平行測定，結(jié)果芍藥苷平均含量為 3.614mg/g，RSD=1.26%（n=6）。

2.8 穩(wěn)定性試驗 取樣品（100301）適量，按2.3項下的方法制成供試品溶液，放置 0、2、4、8、12、24h，分別進行測定，結(jié)果芍藥苷平均含量為3.626mg/g，RSD=0.97%（n=6），表明樣品溶液放置24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 加樣回收率試驗 精密稱取已知含量的樣品（100301）6份，分別添加芍藥苷對照品（濃度為0.81mg/mL）1.0mL，按樣品測定方法制成供試品溶液，依法進行測定，計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 芍藥苷回收率試驗（n=6）

2.10 樣品含量測定 按2.2項下和2.3項下上述方法制備對照品溶液和供試品溶液，分別精密吸取20μL，依上述色譜條件測定，3批樣品中芍藥苷的含量測定結(jié)果見表2。

表2 三批樣品中芍藥苷的含量

3 小結(jié)

本文建立的高效液相色譜法測定泰安寧顆粒及赤芍藥材中的芍藥苷含量的方法，方法簡便快速，重現(xiàn)性及穩(wěn)定性均較好，可用于泰安寧顆粒制劑的質(zhì)量控制。

[1]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（2005年版一部）[S].北京：化學工業(yè)出版社，2005.