陳新江 浙江省臨安市中醫(yī)院 臨安 311300陳丹菲 浙江省中醫(yī)藥研究所

泰安寧顆粒系由地黃、合歡皮、赤芍等中藥經(jīng)提取加工制成的顆粒劑，具有滋腎養(yǎng)陰、平肝寧心的功效，用于女性圍絕經(jīng)期綜合征。本文建立了高效液相色譜法測(cè)定顆粒中芍藥苷含量的方法，方法簡(jiǎn)便快速，重現(xiàn)性及穩(wěn)定性均較好，為泰安寧顆粒制劑的質(zhì)量控制提供試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 儀器與試劑

Agilentl100高效液相色譜儀；色譜柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5μm，北京迪馬公司）；KQ—100DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲有限公司）；0.45μm微孔濾膜（上海醫(yī)藥工業(yè)研究院）；乙腈（色譜純），甲醇（分析純）、磷酸（分析純）；芍藥苷對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)0736-200116）；泰安寧顆粒（批號(hào)：100301、100505、100508、100511）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5m）；流動(dòng)相：乙腈—0.01%磷酸溶液（15∶85）；檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm；流速：1mL/min；柱溫：40℃；保留時(shí)間：約12min；理論塔板數(shù)：不低于3 000。在此條件下，芍藥苷與其他組分達(dá)到基線分離，陰性無干擾。

2.2 對(duì)照品溶液制備 精密稱取真空干燥至恒重的芍藥苷對(duì)照品適量，加甲醇溶解，制成每1mL含50μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液制備 取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，精密稱取0.5g，置50mL量瓶中，加甲醇約45mL，超聲提取20min，取出，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，靜置，用0.45μm的微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。

2.4 空白試驗(yàn) 取缺赤芍陰性樣品0.5g，照樣品含量測(cè)定項(xiàng)下提取，按上述色譜條件分析。與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，無明顯其它峰出現(xiàn)。結(jié)果證明陰性樣品對(duì)該試驗(yàn)無干擾。

2.5 線性范圍考察 精密稱取芍藥苷對(duì)照品7.7mg，加甲醇適量溶解并定容至25mL，精密吸取上述溶液0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL，用甲醇稀釋至10mL，搖勻，每一濃度標(biāo)樣進(jìn)樣20μL，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，芍藥苷對(duì)照品為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=939747x+43424，r=0.99998。結(jié)果表明芍藥苷在0.308～3.696μg之間呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn) 取同一對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣測(cè)定5次，芍藥苷平均峰面積為1201989，RSD=0.74%（n=5），結(jié)果表明精密度良好。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn) 按2.3項(xiàng)下的方法對(duì)同一批樣品（100301）進(jìn)行6次平行測(cè)定，結(jié)果芍藥苷平均含量為 3.614mg/g，RSD=1.26%（n=6）。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取樣品（100301）適量，按2.3項(xiàng)下的方法制成供試品溶液，放置 0、2、4、8、12、24h，分別進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果芍藥苷平均含量為3.626mg/g，RSD=0.97%（n=6），表明樣品溶液放置24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知含量的樣品（100301）6份，分別添加芍藥苷對(duì)照品（濃度為0.81mg/mL）1.0mL，按樣品測(cè)定方法制成供試品溶液，依法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 芍藥苷回收率試驗(yàn)（n=6）

2.10 樣品含量測(cè)定 按2.2項(xiàng)下和2.3項(xiàng)下上述方法制備對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別精密吸取20μL，依上述色譜條件測(cè)定，3批樣品中芍藥苷的含量測(cè)定結(jié)果見表2。

表2 三批樣品中芍藥苷的含量

3 小結(jié)

本文建立的高效液相色譜法測(cè)定泰安寧顆粒及赤芍藥材中的芍藥苷含量的方法，方法簡(jiǎn)便快速，重現(xiàn)性及穩(wěn)定性均較好，可用于泰安寧顆粒制劑的質(zhì)量控制。

[1]國家藥典委員會(huì)．中華人民共和國藥典（2005年版一部）[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.