孫 萍，盛家和，姚曉賓

河南省腫瘤醫(yī)院檢驗科，河南鄭州 450003

我院從2009年開始使用AVE-763B全自動尿沉渣分析儀進(jìn)行尿沉渣檢測，在檢測過程中，筆者發(fā)現(xiàn)，該儀器具有快速、不易污染、并減輕了工作中的勞動強度等優(yōu)點，而且它能及時對流動視野中的有形成分進(jìn)行捕捉、判別、并定量報告，使尿沉渣的檢測自動化、操作規(guī)范化。但在使用過程中，筆者也同時發(fā)現(xiàn)，各檢測項目均存在不同程度的干擾因素，尤其是紅細(xì)胞和白細(xì)胞。目前尿液分析的方法主要有顯微鏡檢查法、流式尿液有形成分分析法、干化學(xué)法等，顯微鏡檢查法是最常使用并得到公認(rèn)的檢測方法[1-2]。為此，筆者將通過AVE-763尿沉渣分析儀與顯微鏡鏡檢對尿沉渣中紅、白細(xì)胞的檢測進(jìn)行比較，并進(jìn)一步探討其假陽性影響因素，為今后工作積累經(jīng)驗。

1 材料與方法

1.1 材料

選擇2010年3～8月來我院就診的門診患者50例，住院患者1530例，其中，女877例，男653例，用一次性尿杯留取中段晨尿（尿量＞20 ml）待檢。

1.2 儀器及試劑

AVE-763B全自動尿沉渣分析儀及其配套試劑，OLYMPUS顯微鏡，水平式離心機，離心管，尿沉渣計數(shù)板。

1.3 方法

所有留取的尿標(biāo)本經(jīng)人工充分混勻后分別倒入2支清潔的試管內(nèi)，各10 ml左右。一份上AVE-763B全自動尿沉渣分析儀做自動分析檢測，另一份按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第3版）[3]尿沉渣檢查的方法，離心沉淀后取尿沉渣進(jìn)行顯微鏡檢查，所有標(biāo)本檢測均在2 h內(nèi)完成。

1.4 正常參考值及結(jié)果判定

AVE-763B 全自動尿沉渣分析儀：紅細(xì)胞：0～4 個/μl，白細(xì)胞0～8個/μl。顯微鏡鏡檢正常參考范圍：紅細(xì)胞0～3個/HP，白細(xì)胞0～5個/HP，超過此范圍為陽性。以顯微鏡檢查作為尿常規(guī)檢查中有關(guān)形態(tài)學(xué)檢查的“金標(biāo)準(zhǔn)”，AVE測得陽性標(biāo)本而顯微鏡鏡檢陰性視為假陽性，AVE測得陰性標(biāo)本而顯微鏡鏡檢陽性視為假陰性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

使用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件，儀器法和鏡檢法比較采用配對χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AVE-763B尿沉渣分析儀與手工鏡檢結(jié)果比較

AVE-763B全自動尿沉渣分析儀與顯微鏡檢查尿中紅細(xì)胞和白細(xì)胞，結(jié)果比較見表1。配對χ2檢驗結(jié)果顯示兩種檢測方法差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測兩種方法比較Kappa值均大于0.8，說明兩種方法對紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測均具有較高的一致性。鏡檢法檢測紅細(xì)胞的假陽性率為12.7%，白細(xì)胞的假陽性率為9.5%。

表1 AVE-763B尿沉渣分析儀與手工鏡檢結(jié)果比較（例）

2.2 檢測過程中引起尿沉渣分析儀假陽性因素分析

雖然儀器法和鏡檢法具有較好的一致性，但是仍存在一定程度的誤判，紅細(xì)胞檢測的假陽性率為12.7%，假陰性率為14.9%，白細(xì)胞檢測的假陽性率為9.5%，假陰性率為1.6%。紅細(xì)胞檢測存在更多的干擾因素引起儀器誤判，常見的影響因素見表2。結(jié)晶和霉菌孢子易引起儀器誤判為紅細(xì)胞，上皮細(xì)胞和大量紅細(xì)胞易引起儀器誤判為白細(xì)胞。

表2 儀器法假陽性的主要影響因素

3 討論

尿液有形成分檢查是常規(guī)尿液分析中不可缺少的組成部分，是診斷腎臟疾病及泌尿系統(tǒng)疾病的主要方法之一，并可為臨床提供診斷及鑒別診斷的依據(jù)。AVE-763B全自動尿沉渣分析儀采用“機器視覺技術(shù)”，即通過全自動顯微鏡和數(shù)碼圖像采集單元的配合，采用計算機圖像處理與識別軟件，自動跟蹤，識別和分類尿液中的有形成分。獨創(chuàng)低倍鏡掃描陰性過篩，低倍鏡目標(biāo)定位，高倍鏡跟蹤識別功能，通過顯微鏡對流動計數(shù)池內(nèi)的有形成分的顯微放大，由主機控制攝像同步裝置對分布在視閾內(nèi)的樣品攝取多幅圖像進(jìn)行分析處理，實現(xiàn)了樣品的傳送、樣品的染色、混勻、吸取、排放及定量以及顯微鏡鏡檢過程的全自動控制，需人工干預(yù)少。在檢測過程中筆者發(fā)現(xiàn)，該儀器對陰性標(biāo)本過篩較可靠，不失為一種尿液篩查好方法，但尿中有形成分復(fù)雜，有干擾因素存在會引起儀器誤認(rèn)造成假陽性，需要人工辨認(rèn)[4]。

本實驗結(jié)果顯示儀器法和鏡檢法檢測紅細(xì)胞Kappa值為0.83，白細(xì)胞Kappa值為0.88，說明兩種方法具有較好的一致性，兩種檢測方法比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。但是在工作中，儀器法仍存在一定程度的誤判，由表2可知：結(jié)晶是造成紅細(xì)胞假陽性的最主要因素，這可能與在做質(zhì)控過程中，用高倍鏡調(diào)焦距時光線太強，致使結(jié)晶類物質(zhì)反光太強，且某些結(jié)晶與紅細(xì)胞體積大小相似，以致機器誤認(rèn)有關(guān)。霉菌孢子和成團(tuán)的細(xì)菌也是造成紅細(xì)胞假陽性增高的原因。因此，當(dāng)尿液中出現(xiàn)上述成分而提示紅細(xì)胞結(jié)果異常時，應(yīng)鏡檢復(fù)查[5]。白細(xì)胞假陽性大部分是由于鱗狀上皮細(xì)胞引起，占70.5%。當(dāng)尿中出現(xiàn)鱗狀上皮細(xì)胞時，由于其細(xì)胞核與白細(xì)胞體積和形態(tài)較相似，在機器攝取的圖像中，鱗狀上皮細(xì)胞的核就會出現(xiàn)藍(lán)色的“+”，顯示是白細(xì)胞，而被機器誤認(rèn)。當(dāng)尿中紅細(xì)胞數(shù)量較多時，大量的紅細(xì)胞會造成白細(xì)胞假陽性。筆者在檢測過程中發(fā)現(xiàn)像草酸鈣結(jié)晶、非晶形鹽類結(jié)晶對紅、白細(xì)胞均有一定程度的影響，會造成二者呈假陽性增高，本組中結(jié)晶對紅細(xì)胞造成的假陽性占62.4%，對白細(xì)胞造成的假陽性占10.3%。

在醫(yī)院尿標(biāo)本不斷增多的情況下，對每個標(biāo)本都嚴(yán)格操作進(jìn)行人工鏡檢是很困難的。全自動尿沉渣分析儀的普及，解決了尿液分析中的主要問題。AVE-763B全自動尿沉渣分析儀規(guī)范了尿液檢查的報告形式和尿液自動檢測的標(biāo)定，操作簡便。由于尿中有形成分形態(tài)大小不一，存在干擾因素，因此，當(dāng)尿沉渣分析儀與鏡檢不符時，要以顯微鏡檢查為準(zhǔn)，并密切結(jié)合臨床綜合分析，必要時進(jìn)行動態(tài)觀察[6]。

[1]叢玉隆,馬俊龍,岳秀玲,等.中國健康人尿液顯微鏡檢測法有形成分結(jié)果調(diào)查[J].臨床檢驗雜志,2006,24(2):81-84.

[2]叢玉隆.尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化建議[J].中華檢驗學(xué)雜志,2002,25(7):249-250.

[3]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:293-296.

[4]左新華.AVE-762沉渣分析儀、尿干化學(xué)分析儀及尿沉渣鏡檢聯(lián)合監(jiān)測的臨床應(yīng)用價值[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2010,28(1):75-78.

[5]李一龍.UF-100尿沉渣儀紅細(xì)胞測定質(zhì)量探討及對策[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2009,47(31):89-90.

[6]李光亮,金曉東,陳廣平.UF-100尿沉渣分析儀和干化學(xué)測定尿中白細(xì)胞和紅細(xì)胞的比較[J].國外醫(yī)學(xué):臨床生物化學(xué)和檢驗學(xué)分冊,2005,26(1):62.