周建偉，張 昭，唐 勇，盧圣鋒

(1.四川省中醫(yī)藥科學院，四川成都610041;2.四川省綿陽市中醫(yī)院，四川綿陽621000;3.成都中醫(yī)藥大學，四川成都610075)

頸椎病是臨床常見病、多發(fā)病之一，椎動脈型頸椎病(Cervical Spondylosis of Vertebral Artery Type，CSA)是頸椎病的常見類型，一旦患有該病，往往纏綿難愈，不僅長期折磨患者，也給家庭、社會帶來負擔。筆者在開展針灸推拿治療CSA臨床研究取得滿意療效的基礎上，于2006年8月至2007年12月以椎動脈型頸椎病兔模型為對象，觀察電針對模型兔血漿內(nèi)皮素(ET)和血清超氧物歧化酶(SOD)的影響，旨在探討電針治療CSA的作用機理?，F(xiàn)將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 動物

健康日本大耳白兔40只，體重2.5～3 kg，雌雄各半。由成都中醫(yī)藥大學動物房提供。

1.2 藥物、試劑及實驗器材

內(nèi)皮素放射免疫測定試劑盒:解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所(原北京東亞免疫技術研究所)，批號040423。超氧化物歧化酶測試盒:南京建成生物工程研究所，批號040425。消痔靈注射液:北京雙鶴藥業(yè)股份公司生產(chǎn)，zz－4965－京衛(wèi)藥準字(1998)第104094號。戊巴比妥鈉:中國醫(yī)藥(集團)上海化學試劑公司。MT－1000A型彩色多譜勒儀。G6805－1型電針儀:青島鑫生實業(yè)有限公司，編號20030561。華佗牌針灸針:蘇州醫(yī)療用品廠有限公司，規(guī)格:Φ0.30×13 mm。電熱恒溫培養(yǎng)箱:天津?qū)嶒瀮x器廠。移液管:5 μl、100 μl、200 μl、1000 μl，eppendof。電子分析天平(DF110):常熟儀器設備廠。高速冷凍離心機(CR22G):日立工機株式會社。TsT GW可見光分光光度計:上海分析儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 造模方法 選擇體重2.5～3 kg健康成年日本大耳白兔，雌雄各半，隨機分為空白組和模型組，每組20只。空白組不予造模。模型組以脫毛劑將左側(cè)自枕后及頸部的體毛脫掉，消毒，用硬化劑10 ml注射于 C3～C5頸椎橫突側(cè)面，分別于第2、4、6、8周重復注射1次。8周后 TCD檢測造模后模型組與空白組椎－基底動脈血流動力學狀態(tài)，檢測結果顯示椎－基底動脈血流動力學出現(xiàn)異常者為造模成功。造模過程中，空白組2只、模型組3只動物無明顯原因死亡，空白組4只、模型組3只動物出現(xiàn)身體不同部位的瘡瘍，14只動物經(jīng)TCD檢測示造模成功。

1.3.2 實驗分組 將造模成功的14只動物隨機分為模型組和模型加電針組(簡稱模針組)，每組7只;14只未經(jīng)造模的動物隨機分為空白組和空白加電針組(簡稱空針組)，每組7只。

1.3.3 治療方法 治療從造模成功后第3天開始，模針組、空針組予以電針“百會”、“風池”(雙側(cè))、頸1～3夾脊(雙側(cè))(參照中國針灸學會實驗針灸分會制定的《動物針灸穴位圖譜》)，“百會”直刺0.3～0.5 cm;雙側(cè)“風池”斜向內(nèi)下方刺入0.5～0.8 cm;頸1－3夾脊(雙側(cè))直刺0.5～0.8 cm。進針后，不進行手法刺激，連接電針儀，正極連接雙側(cè)風池，負極連接雙側(cè)頸2夾脊以形成刺激回路，施以疏密波，頻率2～100 Hz，電壓2～4 V，強度至肌肉抖動而不出現(xiàn)嘶咬。每日1次，留針20 min，10天為一療程，間隔1天進行下一療程，共2個療程?？瞻捉M及模型組動物正常喂養(yǎng)。

1.3.4 指標檢測 觀察結束后第2天，用1%的戊巴比妥鈉麻醉各組動物，心前區(qū)備皮，心尖部取血，分別檢測血漿內(nèi)皮素(ET)和血清超氧物歧化酶(SOD)含量，前者采用放免法，后者采用黃嘌呤氧化酶比色法，操作由實驗室專人負責，嚴格按照說明書進行。

1.3.5 數(shù)據(jù)分析 所有實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計，均采用(±s)表示。兩組間比較符合正態(tài)分布用獨立樣本t檢驗，非正態(tài)分布用非參數(shù)檢驗;多組間比較用單因素方差分析。

2 結果

2.1 治療后各組動物血漿ET變化比較

見表1。表1的結果提示，與模型組比較，模針組治療后動物血漿ET水平顯著下降(P＜0.05)，表明電針可顯著降低血漿ET含量。

表1 血漿ET結果

2.2 治療后各組動物血清SOD變化比較

見表2。表2的結果提示，與模型組比較，模針組治療后動物血清SOD水平顯著升高(P＜0.05)，表明電針可顯著提高血清SOD含量。

表2 血清SOD結果

3 討論

椎動脈型頸椎病(CSA)是頸椎病的常見類型，又稱頸性眩暈癥、椎－基底動脈缺血綜合癥，是由各種機械性與動力性因素致椎動脈遭受刺激或壓迫，引起血管狹窄、折曲而造成以椎－基底動脈供血不足為主要病理變化的綜合征，臨床表現(xiàn)以發(fā)作性眩暈為主，可伴有頭昏、頭痛、失眠、耳鳴、視物不清、惡心、嘔吐，甚至突然猝倒等癥［1］。一旦患病，往往纏綿難愈，不僅長期折磨患者，也給家庭、社會帶來負擔。CSA的臨床治療以保守治療為主，包括中西藥物、物理療法、針灸推拿等，均有一定療效。

筆者前期開展了針灸推拿治療CSA的臨床研究，結果顯示電針、推拿綜合方案治療CSA可取得滿意的臨床療效［2～3］，可顯著地改善椎－基底動脈血液動力學的紊亂［4］。但其作用機理如何，尚需進一步探討。因此本文所涉及的研究工作旨在通過電針對CSA模型兔血漿內(nèi)皮素、血清超氧化物歧化酶影響的研究，試圖闡明電針治療CSA的部分機理，為臨床針刺治療CSA提供可靠的實驗依據(jù)。

既往研究業(yè)已表明，頸椎橫突孔骨性狹窄或先天發(fā)育纖細［5］，鉤椎關節(jié)增生之骨贅或頸椎不穩(wěn)機械性壓迫，均可造成椎動脈狹窄［6］。長期的壓迫造成管壁的壓力持續(xù)增高，缺血、缺氧，內(nèi)皮細胞產(chǎn)生大量內(nèi)皮素(ET)釋放入血，使椎動脈持續(xù)收縮，當超過人體的代償能力時就造成椎－基底動脈供血不足，從而出現(xiàn)一系列臨床癥狀。SOD廣泛存在于需氧代謝細胞中，是機體內(nèi)的主要抗氧化酶，可以抑制脂質(zhì)過氧化反應，清除超氧陰離子而起保護細胞的作用，從而解除超氧陰離子對機體的損害。研究表明，CSA時由于頸椎及其鄰近組織因長期受壓而出現(xiàn)的缺血缺氧等微循環(huán)障礙，是引發(fā)體內(nèi)自由基代謝紊亂的重要原因［7］，它可使SOD水平或活力下降，機體清除自由基活性降低，自由基積累過剩，引起組織損傷，同時又進一步加重對椎動脈、神經(jīng)根的壓迫刺激，造成椎－基底動脈持續(xù)的缺血缺氧［8］。這些研究都表明，CSA時機體椎－基底動脈供血不足，血漿ET水平顯著增高，而血清SOD水平則明顯降低，本文及筆者既往的研究［9］也得出了一致的研究結果。

本研究結果提示，CSA造模兔血漿ET和血清SOD含量異常:模型組與空白組相比血漿ET值明顯升高(P ＜0.01)，血清 SOD 值明顯降低(P ＜0.01);電針治療后，與模型組相比，模針組血漿ET值顯著降低(P ＜0.05)，血清 SOD 值顯著升高(P ＜0.05)。結果表明，電針能降低椎動脈型頸椎病模型兔血漿ET水平，提高血清SOD水平。電針可能通過調(diào)節(jié)ET水平，緩解血管痙攣，改善組織的缺血、缺氧;通過調(diào)節(jié)SOD水平，清除機體多余自由基，抑制脂質(zhì)過氧化反應的作用，保護血管內(nèi)皮，減輕組織損傷，改善循環(huán)灌流，增加椎動脈血流量，而對椎動脈型頸椎病發(fā)揮治療作用。

［1］潘之清.實用脊柱病學［M］.濟南:山東科學技術出版社，1996:306－311

［2］周建偉，胡玲香，李寧，等.針刺推拿綜合方案治療椎動脈型頸椎病的多中心隨機對照研究［J］.中國針灸，2005，25(4):227－23

［3］Zhou jianwei，Hu Linxiang，Li Ning，et al.Observation on the Therapeutic Effect of Acupuncture Combined with Massage for Cervical Spondylosis of Vertebral Arterial Type by Using Trancranial Dopplyer Ultrasonography［J］.World J of Acupuncture － Moxibustion，2006，16(2):3－10

［4］周建偉，胡玲香，李寧，等.針刺推拿綜合方案治療椎動脈型頸椎病經(jīng)顱多普勒超聲觀察［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2005，12(11):10－12

［5］戈曉華，鄒艷秋，李翔，等.健康人椎動脈B型超聲聲像圖及脈沖多普勒血流參數(shù)測值［J］.中國超聲醫(yī)學雜志，1990，1(1):35

［6］Hukubo A.Trans－ unco－ discol approach a combined anterior and lateral approach to cervica ldisc［J］.J Neurosurg，1976，38(2):285

［7］姜杰，施杞.中醫(yī)藥治療頸椎病機理研究進展［J］.中國中醫(yī)骨傷科雜志，1999，7(1):53

［8］Lin CL，Jeng AY，Howng SL，et al.Endothelin and subarachnoid hemorrhage－induced cerebral vasospasm:pathogenesis and treatment［J］.Curr Med Chem，2004，11:1779 －1791

［9］周建偉，張凡，趙菁菁，等.椎動脈型頸椎病患者椎－基底動脈血供的TCD探討［J］.四川醫(yī)學，2005，26(5):484－486