翟瑞仁，逄朝霞

呼吸系統(tǒng)疾病是老年人常見(jiàn)病，主要表現(xiàn)為咳嗽、咳痰、憋喘，主要病理變化為肺失宣降。百佛清肺定喘化痰散具有鎮(zhèn)咳、解痙平喘、抗炎、抑菌的作用，臨床用于治療支氣管哮喘，急慢性支氣管炎、肺炎、肺氣腫、肺積水、肺心病、慢性咽喉炎等，效果顯著。但對(duì)其藥效學(xué)和毒理學(xué)未做研究，作用機(jī)制及藥性并不清楚。本研究擬從藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行初步研究，為本制劑臨床研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ICR種小白鼠，雌雄各半，體重（21±2）g，由國(guó)藥品生物制品檢定所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 藥品 百佛清肺定喘化痰散，為筆者所在醫(yī)院非標(biāo)準(zhǔn)制劑，由制劑室提供（國(guó)藥準(zhǔn)字H2010619）；慶大霉素（魯抗辰欣藥業(yè)，國(guó)藥準(zhǔn)字H100408803）；羅紅霉素（長(zhǎng)春長(zhǎng)慶藥業(yè)，國(guó)藥準(zhǔn)字H20059858）。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 全自動(dòng)生化分析儀Senlo-8010；FA2004電子分析天平。

1.4 鎮(zhèn)咳作用 ICR小鼠，40只，體重（21±2）g，雌雄各半。隨機(jī)分四組，分別為對(duì)照組，大劑量組，小劑量組和咳必清陽(yáng)性對(duì)照組。采用氨水引咳法，在鐘罩內(nèi)通以25%～28%氨水0.2 ml汽化，觀察各組氨水引起的咳嗽潛伏期和2 min內(nèi)的咳嗽次數(shù)，作為給藥前正常對(duì)照。然后4組分別灌胃給藥或水，給藥50 min后，再次測(cè)定咳嗽潛伏期和2 min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

1.5 對(duì)離體氣管平滑肌的作用（解痙平喘作用）

1.5.1 對(duì)乙酰膽堿作用的影響 （量效曲線）按藥理實(shí)驗(yàn)常規(guī)制作豚鼠離體氣管標(biāo)本，懸吊于 （32±0.2）℃的20 ml TYrode液的浴槽中，負(fù)荷2 g，平衡0.5 h后，將氣管鏈環(huán)固定于拉力環(huán)能器上，用自動(dòng)平衡記錄儀描記收縮，整個(gè)實(shí)驗(yàn)中用 95%O2+5%CO2，TYrode 液（按 Muralt的配方）。用累積液度方法，每次加-Logmol濃度于浴槽，并記錄收縮幅度，直至最大反應(yīng)，先測(cè)定給藥前乙酰膽堿的量—效反應(yīng)作為對(duì)照，然后換液。待收縮幅度恢復(fù)到原始水平，分別取藥物0.1、0.5、1.0 g，加入浴槽內(nèi)，用同樣方法分別測(cè)定每一劑量藥物作用下的乙酰膽堿量—效反應(yīng)。繪制量—效反應(yīng)曲線。根據(jù)給藥物后激動(dòng)劑量—效曲線移動(dòng)情況。判斷藥物作用的性質(zhì)。

1.5.2 對(duì)組胺作用的影響（量效曲線）實(shí)驗(yàn)方法同1.5.1。

1.6 抗炎作用 取ICR種小白鼠80只，雌雄各半，重（21±2）g，隨機(jī)分為四組：高劑量組（10.0%溶液）、低劑量組（5.0%溶液）、水對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組（丙酸倍氯美松）將藥液或水均外涂于耳廓兩側(cè)。連續(xù)2次給藥（間隔0.5 h）后1 h，每鼠均由尾靜脈注射1%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液 （0.05 ml/10 g），然后，立即以二甲苯0.1 ml滴于左側(cè)耳廓兩側(cè)，15 min后，根據(jù)其藍(lán)染深度，按1、2、3級(jí)評(píng)分。計(jì)算各組得分均值與標(biāo)準(zhǔn)差，用t檢驗(yàn)比較組間差異顯著性。

1.7 抑菌作用 實(shí)驗(yàn)以無(wú)菌生理鹽水為陰性對(duì)照組，13.8%的藥物為大劑量組，7.4%為小劑量組。羅紅霉素、慶大霉素為陽(yáng)性對(duì)照組，試驗(yàn)采用紙片法，菌種均為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)菌種，普通瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)。

2 結(jié) 果

2.1 鎮(zhèn)咳作用 給藥后與給藥前比較，水對(duì)照組，咳嗽潛伏期及咳嗽次數(shù)均無(wú)明顯變化（P＞0.05），而大劑量組給藥后可使咳嗽潛伏期延長(zhǎng)，咳嗽次數(shù)減少，與給藥前比較有顯著性差異（P＜0.01或P＜0.05），表明大劑量具有非常明顯的鎮(zhèn)咳作用。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 對(duì)小白鼠的鎮(zhèn)咳作用（±s）

表1 對(duì)小白鼠的鎮(zhèn)咳作用（±s）

與給藥前比較，*P＜0.05，#P＜0.01

組別 n 給藥前咳嗽反應(yīng) 給藥后咳嗽反應(yīng)潛伏期（s）次/min 潛伏期（s）次/min對(duì)照組 10 104.1±37.5 46±27 116.2±31.2 41±23小劑量組 10 98.8±39.2 31±23 88.7±35.1 23±20大劑量組 10 58.0±12.8 41±23 119.2±35.2# 20±18*陽(yáng)性對(duì)照組 10 45.5±7.7 55±12 76.8±28.9 14±10*

2.2 對(duì)離體氣管平滑肌的作用（解痙平喘作用）

2.2.1 對(duì)乙酰膽堿作用的影響 （量效曲線）分別給藥物0.1、0.5、1.0 g時(shí)，均使乙酰膽堿的量—效反應(yīng)曲線右移，最大反應(yīng)降低，且拮抗作用呈劑量依賴性增強(qiáng)，其最大反應(yīng)分別降低15.9%、21.6%和53.4%。曲線50%點(diǎn)分別右移1.6、3.4、8.0 cm，結(jié)果表明該藥物具有對(duì)抗乙酰膽堿收縮豚鼠氣管平滑肌的作用。

2.2.2 對(duì)組胺作用的影響（量效曲線）給藥物0.1 g和0.5 g分別使組胺量—效曲線右移，最大反應(yīng)降低。其最大反應(yīng)將分別降低66.1%和80.1%，曲線20%點(diǎn)分別右移6.0、13.0 cm。結(jié)果表明該藥物有非常顯著的拮抗組胺收縮氣管平滑肌的作用，且對(duì)組胺的拮抗效應(yīng)明顯強(qiáng)于對(duì)乙酰膽堿的拮抗效應(yīng)。

2.3 抗炎作用 大劑量組白鼠耳殼藍(lán)染得分較對(duì)照組明顯低（P＜0.05），說(shuō)明該藥物有降低炎性滲出的作用。見(jiàn)表2。

表2 對(duì)二甲苯致小鼠耳部炎癥反應(yīng)的影響（±s）

表2 對(duì)二甲苯致小鼠耳部炎癥反應(yīng)的影響（±s）

與對(duì)照組比較，*P＜0.05

組別 n 藍(lán)染級(jí)別評(píng)分對(duì)照組 10 2.4±0.8小劑量組 10 1.8±0.7*大劑量組 10 1.7±0.7*陽(yáng)性組 10 1.6±0.6*

2.4 抑菌作用 該藥物對(duì)金黃色葡萄球菌、甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎雙球菌、大腸桿菌、變形桿菌，具有一定程度的抑制作用。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 抑菌實(shí)驗(yàn)（mm）

3 討 論

百佛清肺定喘化痰散是經(jīng)現(xiàn)代提取技術(shù)、制備工藝加工制成的醫(yī)院制劑。本方選用老鸛草、板蘭根、甘草、百部、五味子、玄參、牡蠣和瓜萎8味中藥組方。百部、老鸛草、板藍(lán)根、瓜萎對(duì)多種革蘭陽(yáng)性及陰性細(xì)菌均有不同程度的抑菌作用，因此具有良好的抗菌抗炎作用。甘草具有鎮(zhèn)咳祛痰作用，牡蠣、瓜萎具有化痰、軟堅(jiān)、散結(jié)的作用，百部具有潤(rùn)肺止咳作用，因此鎮(zhèn)咳祛痰平喘效果很好。甘草、老鸛草、板蘭根、瓜萎具有清肺熱解毒作用；老鸛草有祛風(fēng)的作用，因此能有效的清肺熱。五味子、百部、玄參具有滋陰固精潤(rùn)肺補(bǔ)氣的作用。上述中草藥有效成分混合協(xié)同生效，能產(chǎn)生清肺熱、抗菌、抗炎、鎮(zhèn)咳祛痰、平喘、養(yǎng)陰潤(rùn)肺、補(bǔ)氣等藥理作用。

本研究從現(xiàn)代藥理學(xué)的角度證實(shí)大劑量百佛清肺定喘化痰散給藥后可使小白鼠咳嗽潛伏期延長(zhǎng)，咳嗽次數(shù)減少，提示有鎮(zhèn)咳作用；使乙酰膽堿、組胺的量—效反應(yīng)曲線右移，最大反應(yīng)降低，且拮抗作用呈劑量依賴性增強(qiáng)，結(jié)果表明該藥物具有對(duì)抗乙酰膽堿、組胺收縮豚鼠氣管平滑肌的作用，且對(duì)組胺的拮抗效應(yīng)明顯強(qiáng)于對(duì)乙酰膽堿的拮抗效應(yīng)，提示有解痙平喘作用；大劑量組白鼠耳殼藍(lán)染得分較對(duì)照組明顯低，結(jié)果該藥物有降低炎性滲出的作用，提示有抗炎作用；該藥物對(duì)金黃色葡萄球菌、甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎雙球菌、大腸桿菌、變形桿菌，具有一定程度的抑制作用，提示有抑菌作用。為百佛清肺定喘化痰散用于治療老年呼吸系統(tǒng)疾病提供了藥理依據(jù)。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[S].2010年版（一部）.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.80，61.

[2]孫文基，謝世昌.天然藥物成分定量分析[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2003.414.

[3]童玉懿，宋萬(wàn)志.五味子（南北）的高壓液相圖譜及木脂素成分含量測(cè)定[J]. 中國(guó)中藥雜志，1989，14（10）：35.