石興兵

(廣安市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，四川 廣安 638000)

缺血性腦卒中是一種以高發(fā)病率、死亡率、致殘率為特征的常見病，且呈逐年上升趨勢。其中腦梗死發(fā)病率約占全部腦卒中的60% －80%［1］。由于腦組織對缺氧的耐受性最差，急性缺血性腦卒中后由于腦部血液循環(huán)障礙，造成腦部急性缺氧，腦內(nèi)乳酸、自由基大量生成，進(jìn)一步加重腦損害。因此，急性腦卒中后盡快改善腦部血液循環(huán)、糾正腦組織缺氧、保護(hù)半暗帶維持神經(jīng)細(xì)胞存活和促進(jìn)神經(jīng)生長是本病治療的關(guān)鍵［2］。

黃芩苷是唇形科植物黃芩的主要成分之一，為黃酮類化合物。研究表明，黃芩苷在外周多種組織器官(肝臟、免疫系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等)，具有抗自由基損傷、抗炎、抗病毒、抗血栓及擴(kuò)血管等作用［3］。近年來，黃芩苷在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用開始受到重視，其抗炎抗氧化特性有利于大腦梗死半暗帶神經(jīng)細(xì)胞的恢復(fù)。在動物水平，黃芩苷對大腦中動脈栓塞引起的腦梗死損傷有保護(hù)作用，能減輕缺血皮質(zhì)谷氨酸和天門冬氮酸釋放增加［4］。因此，基于上述特性，我們認(rèn)為黃芩苷片可能為腦梗死的治療提供新的思路。而國內(nèi)外尚無相應(yīng)臨床研究報(bào)道。因此，本文采用黃芩苷片對51例腦梗塞患者進(jìn)行治療，并探討其可能的保護(hù)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

病例選自2010年2月至2011年5月間在我科住院的男性患者共51例。年齡(51－70)歲，平均(63±6)歲，全部患者均為急性期，首次發(fā)病。病程均在24小時(shí)內(nèi)，CT排除腦出血、腦腫瘤以及由于血液病和房顫、心功能不全引起的腦卒中。經(jīng)篩選除嚴(yán)重肝腎疾病患者外，全部患者均無免疫系統(tǒng)疾病，根據(jù)入院的日期隨機(jī)分為常規(guī)治療組(常規(guī)治療，28例)和干預(yù)組(即在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上早期應(yīng)用黃芩苷片，23例)。兩組患者年齡、性別無顯著性差異(p＞0.05)。所使用的黃芩苷片購于湖南紳泰春藥業(yè)有限公司(國藥準(zhǔn)字H43021781)。用法:口服，一次0.5g，一日3次。兩組患者均連續(xù)治療1個(gè)月。

1.2 標(biāo)本采集與測定

所有患者均留取發(fā)病后24小時(shí)、120小時(shí)的靜脈血各5ml。離心分離血清，置于－20℃冰箱保存待測。

1.3 臨床療效評判

對兩組患者分別于入院時(shí)和入院后1月進(jìn)行臨床療效評定。療效以減分率評定:基本痊愈≥89%、顯效≥46%、好轉(zhuǎn)≥18%、無效≤18%。其中前三種情況認(rèn)為是有效。研究末期計(jì)算出有效率。神經(jīng)功能缺損的評定采用1995年全國腦血管病學(xué)術(shù)會議《卒中患者神經(jīng)功能缺損評分標(biāo)準(zhǔn)》(CSS)。同時(shí)評判患者的認(rèn)知障礙水平(MMSE)和日常生活能力(Barthel指數(shù))。

1.4 炎癥及氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測

血清IL-1、TNF-α 測定，采用 ELISA 法。TNF-α試劑為R＆D公司產(chǎn)品。丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)測試盒均購自南京建成生物工程研究所。具體操作按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 黃芩苷片對臨床治療效果的影響

結(jié)果表明，干預(yù)組總有效率為86.96%(20/23)，其中，臨床痊愈、顯效、好轉(zhuǎn)分別為2例、11例和7例;常規(guī)治療組總有效率為78.57%(22/28))，其中，臨床痊愈、顯效、好轉(zhuǎn)分別為1例、10例和11例。兩組有效率比較未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)意義的差別，見表1。

表1 治療一月后兩組療效評估

2.2 黃芩苷片對神經(jīng)功能的改善

經(jīng)過一個(gè)月的治療，患者神經(jīng)功能缺損水平、日常生活活動能力、認(rèn)知功能障礙水平均較治療前顯著改善(p＜0.05)，干預(yù)組與常規(guī)治療組比較有顯著性差異(p＜0.05)。說明黃芩苷片在對神經(jīng)功能缺失的保護(hù)上發(fā)揮了重要作用(表2)。

表2 治療前后神經(jīng)功能缺損、認(rèn)知障礙水平，日常生活能力比較

2.3 黃芩苷片降低了炎癥因子的表達(dá)

我們研究了黃芩苷片對炎癥因子表達(dá)的影響。從表3可以看出，兩組患者治療初始(即24小時(shí)內(nèi))血清炎癥因子(IL-1、TNF-α)含量無明顯差異(p＞0.05)。經(jīng)過5天的藥物干預(yù)，所有患者的炎癥因子均表達(dá)下降(p＜0.05)。相比常規(guī)治療組，干預(yù)組血清IL-1的下降無顯著差異性(p＞0.05)，但血清TNF-α水平卻顯示出更強(qiáng)的下降趨勢(p＜0.001)(表3)。

表3 治療前后兩組患者血清中炎癥因子的改變

2.4 黃芩苷片降低了血清中氧化應(yīng)激水平

兩組患者治療初始(即24小時(shí)內(nèi))，MDA含量與SOD活性無明顯差異(p＞0.05)。實(shí)施不同治療措施5天后，兩組MDA含量均有明顯下降而SOD活性明顯上升，與治療初始比較，差異有顯著性(p＜0.05)。而兩組間比較，發(fā)現(xiàn)干預(yù)組患者血清中氧化應(yīng)激水平更低(p＜0.001)(表4)。

表4 治療前后兩組患者血清中MDA含量及SOD活性的改變

3 討論

腦血管病是危害人類生命與健康的常見病和多發(fā)病，具有發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高和復(fù)發(fā)率高的特點(diǎn)，是中老年人致死和致殘的主要疾病。由于老年人口的不斷增加和生活水平的提高，腦血管病的發(fā)病率仍在不斷上升。2009年衛(wèi)生部統(tǒng)計(jì)，中國內(nèi)地用于治療腦血管病的總費(fèi)用約達(dá)二百億元人民幣，其中缺血性腦卒中的直接住院費(fèi)用為一百零八億元;腦卒中的死亡率是心肌梗死的(4－6)倍，帶來的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)是心肌梗死的十倍［5］。腦梗死是腦血管病中的常見類型，其損傷機(jī)制復(fù)雜，除了自由基損傷、鈣離子超載外，近年來免疫炎癥反應(yīng)以及氧化應(yīng)激在缺血性腦損傷中的作用已得到公眾的肯定［6］。

炎性細(xì)胞因子包括腫瘤壞死因子和白細(xì)胞介素等作為炎癥反應(yīng)的重要遞質(zhì)，共同參與機(jī)體免疫反應(yīng)、應(yīng)激反應(yīng)和炎癥的調(diào)節(jié)。有文獻(xiàn)報(bào)道，發(fā)現(xiàn)IL-1于發(fā)病第1天即達(dá)高峰，隨時(shí)間推移逐漸下降，在第7天時(shí)仍高于正常水平。腦梗死后的星形膠質(zhì)細(xì)胞可迅速表達(dá)IL-1，卒中患者的血清 IL-1在較長時(shí)間內(nèi)保持高水平，具體機(jī)制目前尚不清楚。因此，在我們的研究中，兩組患者于治療后5天IL-1的下降水平差異不明顯。

TNF-α是免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)中的重要組成部分，是參與炎癥反應(yīng)的主要介質(zhì)之一，與內(nèi)皮的損傷有關(guān)。急性腦梗塞發(fā)病后血清TNF的變化與IL-1變化類似。TNF-α還可刺激內(nèi)皮細(xì)胞釋放 IL-1，二者協(xié)同作用，能提高內(nèi)皮細(xì)胞原凝血物活性，而抑制纖溶酶原激活物釋放，使纖溶活性低下，血液呈高凝狀態(tài)，導(dǎo)致血栓形成［7，8］。

氧化應(yīng)激在缺血性腦損傷中也起到推波助瀾的作用。腦梗死時(shí)，腦血流的阻斷導(dǎo)致重要的營養(yǎng)物質(zhì)和含氧量急速減少，ATP減少，Ca2+進(jìn)入細(xì)胞，使線粒體功能受損，并激活Ca2+依賴性蛋白水解酶，將黃嘌呤脫氫酶水解為黃嘌呤氧化酶［9］。同時(shí)腦微血管系統(tǒng)中存在的谷胱甘肽-谷胱甘肽還原酶自由基清除系統(tǒng)功能下降，超氧化物歧化酶(SOD)活性降低，對自由基的清除能力減弱。過量的自由基能夠氧化細(xì)胞膜和基底膜上的不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過氧化，膜的液態(tài)性、流動性改變，損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞和基底膜;并使膠原纖維的膠原蛋白交聯(lián)，透明質(zhì)酸降解，引起細(xì)胞外基質(zhì)疏松，彈性下降，共同作用破壞了血腦屏障的完整性。向腦內(nèi)注射或腦表面灌注自由基生成劑都可以增加血腦屏障的通透性;而自由基清除劑，如SOD與一些合成的自由基清除劑等都能減輕腦梗死再灌注后血腦屏障的損害。

黃芩苷是唇形科植物黃芩的有效成分之一，屬葡萄糖醛酸苷類，水解后產(chǎn)生黃芩素和葡萄糖醛酸，具有清熱解毒、抗炎、利膽、降壓、利尿、抗變態(tài)反應(yīng)等多方面的作用。近年來隨著國際上對黃芩苷研究的持續(xù)升溫以及認(rèn)識的逐步深入，認(rèn)為黃芩苷在清除氧自由基、減輕組織的缺血再灌注損傷、調(diào)節(jié)免疫、抗凋亡等多方面均有作用［3］。

綜合上述研究，我們可以推斷出黃芩苷確實(shí)可以通過下調(diào)炎癥因子表達(dá)、降低氧化應(yīng)激、對抗凋亡等多種途徑改善腦梗死。盡管有很多動物實(shí)驗(yàn)支持這一假設(shè)，但是直至今日國內(nèi)外尚無相應(yīng)的臨床研究。我們大膽的設(shè)計(jì)了此試驗(yàn)，并取得了良好的臨床效果。在我們的研究中，每日給予黃芩苷片1.5克很好的改善了患者的臨床預(yù)后。在神經(jīng)功能的恢復(fù)、認(rèn)知功能的改善、生活自理能力的提高上均顯現(xiàn)出了較好的效果。在服用藥物5天后即顯著下調(diào)炎癥因子的表達(dá)，同時(shí)也明顯的降低了氧化應(yīng)激。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們可以推斷黃芩苷在給藥后的第5天就已經(jīng)發(fā)揮其抗炎抗氧化作用，提示早期使用黃芩苷片對腦梗死患者具有重要的治療意義。

［1］Whisnant JP，Wiebers DO，O'Fallon WM，et al.A populationbased model of risk factors for ischemic stroke:Rochester，Minnesota［J］.Neurology ，1996，47(6):1420 －1428

［2］Weinberger J.Diagnosis and prevention of atherosclerotic cerebral infarction［J］.CNS Spectr.，2005，10(7):553 －564

［3］Srinivas NR.Baicalin，an emerging multi-therapeutic agent:pharmacodynamics，pharmacokinetics，and considerations from drug development perspectives［J］.Xenobiotica，2010，40(5):357 －367

［4］Tu XK，Yang WZ，Shi SS，et al.Neuroprotective effect of baicalin in a rat model of permanent focal cerebral ischemia［J］.Neurochem Res，2009，34(9):1626 －1634

［5］曾利明.中國每年治療腦血管病費(fèi)用達(dá)二百億元［Z］.中國新聞網(wǎng)，2009－06－21

［6］Wang Q，Tang XN，Yenari MA.The inflammatory response in stroke［J］.J Neuroimmunol，2007，184(1 －2):53 －68

［7］Buttint M，Apdel K，Sauter A，et al.Expression of tumor necrosis factors alpha after focal cerebral ischemia in the rat［J］.Neuroscience，1996，71(1):1－16

［8］Aito H，Aalto KT，Raivio KO.Biphasic ATP depletion caused by transient oxidative exposure is associated with apoptotic cell death in rat embryonal cortical llcurons［J］.Pediatr Res，2002，52(1):40－45

［9］Sen CK，Packer L.Antioxidant and redox regulation of gene transcription［J］.FASEB J，1996，10(7):709 － 720