束雅春 秦昆明 殷放宙 劉 曉 吳 蕓 蔡寶昌，

1．南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，南京 210029;2．南京中醫(yī)藥大學(xué)國(guó)家教育部中藥炮制規(guī)范化及標(biāo)準(zhǔn)化工程研究中心，南京 210029;3．南京中醫(yī)藥大學(xué)國(guó)家中醫(yī)藥管理局中藥炮制標(biāo)準(zhǔn)重點(diǎn)研究室，南京 210029;4．南京海昌中藥集團(tuán)有限公司，南京 210061

銀翹散始載于清代醫(yī)家吳鞠通的代表著作《溫病條辨》，根據(jù)《內(nèi)經(jīng)》“風(fēng)淫于內(nèi)，治以辛涼，佐以苦甘;熱淫于內(nèi)，治以咸寒，佐以甘苦”的理論而創(chuàng)制的名方。由金銀花、連翹、桔梗、薄荷、荊芥、牛蒡子等九味藥組成，具有辛涼解表、清熱解毒的功效，主治風(fēng)溫初起，當(dāng)時(shí)以治療風(fēng)溫、溫?zé)岵∫约澳承╇s病屬于邪在衛(wèi)分、上焦而聞名，并一直沿用至今。現(xiàn)代臨床上主要用于治療流行性感冒、急性扁桃腺炎、咽喉炎、肺炎、皰疹、麻疹、流行性腮腺炎等病毒性感染疾病，是中醫(yī)臨床上廣泛使用并且療效確切的中藥方劑之一。

中藥配方顆粒是在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，采用現(xiàn)代科技手段將傳統(tǒng)中藥飲片按一定生產(chǎn)工藝制成的提取物與適當(dāng)?shù)妮o料或藥材細(xì)粉制成的供臨床調(diào)劑使用的粉狀或顆粒狀產(chǎn)品。具有劑量準(zhǔn)確、衛(wèi)生、即沖即服和貯存攜帶方便的特點(diǎn)，現(xiàn)已被中國(guó)、日本、韓國(guó)等國(guó)家廣泛使用［1］。雖然中藥配方顆粒比傳統(tǒng)中藥飲片有一些優(yōu)勢(shì)，但仍有許多專家學(xué)者對(duì)中藥飲片這一改革表示質(zhì)疑，例如在飲片原有形態(tài)特征消失后如何控制中藥配方顆粒的質(zhì)量，單味中藥配方顆粒混合配方與傳統(tǒng)飲片合煎湯劑是否等效，中藥配方顆粒在尚無(wú)統(tǒng)一的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)情況下，如何監(jiān)管等?本文通過(guò)對(duì)銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑與配方顆粒湯劑在高效液相色譜指紋圖譜、浸出物及相對(duì)密度方面的比較研究，分析二者差異，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器與試劑

島津LC－20AB高效液相色譜儀，包括DGU－20A3在線脫氣機(jī)、SIL－20A自動(dòng)進(jìn)樣器、SPD－M20A檢測(cè)器、CTO－20A柱溫箱和Class－VP色譜工作站;電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱101型 (上海索譜儀器有限公司);Mettler Toledo AL104電子天平 (梅特勒－托利多儀器上海有限公司)。甲醇為色譜純 (美國(guó)Merck公司)，其他試劑為分析純。

1.2 試藥

銀翹散傳統(tǒng)飲片購(gòu)自南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房，經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院宋金斌教授鑒定。銀翹散配方顆粒購(gòu)自南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房，由江陰天江藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:YMC－Pack ODS－A(250 mm ×4.6 mm，5μm) (YMC Co.Ltd，Japan);流動(dòng)相:乙腈 (A) －0.1%甲酸水溶液 (B)梯度洗脫 (0～20 min，A:5%;20～35 min，A:5% ～10%;35～75 min，A:10% ～18%;75～95 min，A:18% ～24%;95～105 min，A:24% ～35%;105～120 min，A:35% ～45%;120～125 min，A:2%);流速:1 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):254 nm;柱溫:35℃;進(jìn)樣量:5μL。

2.2 供試品溶液的制備

2.2.1 處方組成

金銀花9g、連翹9g、桔梗6g、淡竹葉4g、生甘草5g、淡豆豉5g、牛蒡子9g、薄荷6g、荊芥穗5g。

2.2.2 傳統(tǒng)飲片湯劑的制備

精密稱取金銀花、連翹、桔梗、淡竹葉、生甘草、淡豆豉、牛蒡子飲片加10倍量水浸泡30 min，用傳統(tǒng)砂鍋武火煮沸后，改用文火煎煮15 min，加入后下飲片薄荷、荊芥穗再煎煮5 min，趁熱濾出藥液，量得體積為292 mL的一煎藥液備用。同法再加6倍量水，煎煮15 min制備二煎藥液197 mL，合并兩次藥液，搖勻，加純凈水定容至500 mL，備用。

2.2.3 配方顆粒湯劑的制備

精密稱取經(jīng)折算后的與銀翹散傳統(tǒng)飲片等量的單味藥配方顆粒，以100℃熱開(kāi)水沖兌至300 mL，加純凈水定容至500 mL，備用。

分別精密量取傳統(tǒng)飲片湯劑與配方顆粒湯劑樣品溶液各1.5 mL至5 mL容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，邊加邊輕輕振搖，靜置30min，用0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾，即得供試品溶液。

圖1 銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑樣品色譜圖

圖2 銀翹散配方顆粒湯劑樣品色譜圖

2.3 兩種湯劑高效液相色譜指紋圖譜的比較

精密吸取傳統(tǒng)飲片湯劑與配方顆粒湯劑供試品溶液各5 μL注入液相色譜儀，按上述色譜條件操作，考察125 min供試品溶液的色譜分離情況，記錄125 min色譜圖，即得。結(jié)果見(jiàn)圖1、圖2。

2.4 兩種湯劑浸出物含量的比較

按照2010版《中國(guó)藥典》附錄Ⅹ項(xiàng)下浸出物測(cè)定法，精密量取銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑、配方顆粒湯劑各25 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時(shí)，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量。兩種湯劑平行測(cè)定3份，取平均值，得傳統(tǒng)飲片湯劑浸出物為0.5380 g，配方顆粒湯劑浸出物為0.3223 g。

2.5 兩種湯劑相對(duì)密度的比較

按照2010版《中國(guó)藥典》附錄Ⅶ項(xiàng)下相對(duì)密度測(cè)定法之比重瓶法，取潔凈、干燥并精密稱定重量的比重瓶，裝滿供試品后，置20℃水浴中放置若干分鐘，使內(nèi)容物溫度達(dá)到20℃，用濾紙除去溢出側(cè)管的液體，立即蓋上罩。然后將比重瓶自水浴中取出，再用濾紙將比重瓶的外面擦凈，精密稱定，減去比重瓶的重量，求得供試品的重量后，將供試品傾去，洗凈比重瓶，裝滿新沸過(guò)的冷水，再照上法測(cè)得同一溫度時(shí)水的重量［2］，兩種湯劑分別平行測(cè)定3份，根據(jù)公式計(jì)算，得傳統(tǒng)飲片湯劑相對(duì)密度為1.0075393，配方顆粒湯劑相對(duì)密度為1.0035308。

3 討論

銀翹散屬解表類方劑，且其中多味飲片中均含有揮發(fā)性成分。因此，傳統(tǒng)飲片第一次煎沸后改文火煎15 min后加入后下藥物，再煎5 min，以盡量減少揮發(fā)性成分的損失［3］。銀翹散配方顆粒湯劑處方劑量經(jīng)折算后與銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑等量，因此，兩者實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較更具有客觀性與可比性。就實(shí)驗(yàn)結(jié)果總體而言，指紋圖譜技術(shù)在兩種湯劑的應(yīng)用中屬“整體輪廓”比較，二者色譜圖形和相對(duì)應(yīng)的色譜峰保留時(shí)間基本相似，所含主要化學(xué)成分大致相同，但部分成分的相對(duì)含量差別較大，尤其是銀翹散配方顆粒湯劑大多數(shù)化學(xué)成分的含量 (以峰面積計(jì))只是傳統(tǒng)飲片湯劑的1/2，個(gè)別化學(xué)成分只達(dá)到了1/3。根據(jù)二者浸出物和相對(duì)密度的測(cè)定結(jié)果比較，銀翹散配方顆粒湯劑也均小于傳統(tǒng)飲片湯劑。因此，通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn)，銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑和配方顆粒湯劑質(zhì)量存在顯著差異，因此兩者的臨床療效也必然有一定的差異。這就印證了為什么中藥配方顆粒自其誕生的那天起就爭(zhēng)論不斷，核心問(wèn)題是中藥配方顆粒與傳統(tǒng)飲片湯劑療效是否相同。

中藥配方顆粒在原料中藥材、飲片、生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等各環(huán)節(jié)還有許多研究工作要做;配方顆粒湯劑與傳統(tǒng)飲片湯劑的等效性還需要更多的科研工作做支持［1］。只有重視從源頭上控制藥材和飲片的質(zhì)量，協(xié)調(diào)不同企業(yè)生產(chǎn)工藝，加強(qiáng)反映內(nèi)在質(zhì)量控制技術(shù)的研究，建立和完善配方顆粒行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，中藥配方顆粒的質(zhì)量才能得到根本改觀，才能為保障人類健康發(fā)揮應(yīng)有的作用。

［1］李松林，宋景政，徐宏喜．中藥配方顆粒研究淺析［J］．中草藥．2009，40:1－7．

［2］國(guó)家藥典委員會(huì)編．中華人民共和國(guó)藥典 (一部)［S］．北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:216－217．

［3］束雅春，秦昆明，劉曉，等．HPLC法測(cè)定荊芥飲片煎煮過(guò)程中胡薄荷酮的含量變化［J］．中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17(16):60－62．