西安市第二醫(yī)院 (西安 710004)嚴(yán) 瑾

近代腫瘤分子生物學(xué)研究表明,宮頸癌的發(fā)生發(fā)展與 HPV感染有關(guān),并由多種癌基因及抑癌基因共同參與,通過(guò)不同機(jī)制使原癌基因激活,抑癌基因失活,從而使細(xì)胞增殖和凋亡失調(diào)所致[1]。我們通過(guò)免疫組化 SP法探討 P16在宮頸病變中的表達(dá)及臨床意義。

資料與方法

1 一般資料 取我院與西北醫(yī)院 2008～ 2009年宮頸活檢和手術(shù)切除的宮頸標(biāo)本 106例,所有病變均經(jīng)病理證實(shí),其中宮頸癌 23例,上皮內(nèi)瘤變 63例(CINⅠ 20例,CINⅡ 18例,CINⅢ 25例),20例正常宮頸鱗狀上皮作對(duì)照?；颊吣挲g 24～ 61歲,平均年齡4.5歲。

2 方 法 標(biāo)本經(jīng)常規(guī)甲醛固定、脫水、石蠟包埋、切片,分別行常規(guī)病理檢查和 P16染色,采用免疫組化 SP法。SP試劑盒及陽(yáng)性對(duì)照片均購(gòu)自福建邁新公司。

3 結(jié)果判定 免疫組化染色結(jié)果判斷分別按陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)及染色強(qiáng)度計(jì)分。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為 0,計(jì) 0分;1%～25%計(jì) 1分;26%～50%計(jì) 2分;51%～75%計(jì) 3分;76%～100%計(jì) 4分。染色陰性計(jì) 0分;淡黃色計(jì) 1分;棕黃色計(jì) 2分;棕褐色計(jì) 3分;兩種積分相加,積分為 0～ 1分,表示陰性(一);積分為 2～ 3分,表示陽(yáng)性;積分為 4～ 5分,表示陽(yáng)性 (++);積分為 6～ 7分,表示陽(yáng)性 (+++)。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用 SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

P16蛋白在不同宮頸病變中陽(yáng)性表達(dá)率的比較:P16蛋白在宮頸癌、CINⅢ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅠ級(jí)和正常宮頸中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為 91.3%、88%、83.3%、55%、55%,P16蛋白在宮頸癌、CINⅢ級(jí)與 CINⅠ級(jí)中的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);在 P16蛋白在宮頸癌、CINⅢ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅠ級(jí)與正常宮頸中的表達(dá)差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),見(jiàn)附表。

附表 P16蛋白在不同程度宮頸病變中陽(yáng)性表達(dá)率的比較

討 論

P16基因是人們發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)直接作用于細(xì)胞周期,抑制細(xì)胞分裂的基因[2]。P16基因又稱細(xì)胞周期依賴性激酶(CDK),定位于人染色體 9p21,編碼由 148個(gè)氨基酸組成的核結(jié)合蛋白,P16蛋白與細(xì)胞周期蛋白 D1(Cyclin D1)競(jìng)爭(zhēng),特異性結(jié)合 CDK4或 CDK6而抑制其活性,組織細(xì)胞進(jìn)入 G1/S期,無(wú)限制擴(kuò)增向腫瘤發(fā)展和轉(zhuǎn)化,從而達(dá)到抑癌作用。P16的突變和缺失廣泛存在于人類腫瘤中,且其低表達(dá)與腫瘤的病理分級(jí)、腫瘤分級(jí)及預(yù)后有關(guān)[3]。目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì) P16蛋白與宮頸癌的研究較多,認(rèn)為 P16蛋白在宮頸癌中的表達(dá)較高,而在非癌組織中的表達(dá)較低,表明 P16蛋白與宮頸癌的發(fā)生可能有關(guān)[4]。研究表明 P161NK4A基因及其產(chǎn)物在大多數(shù)原發(fā)性腫瘤細(xì)胞中缺失,而卻在 100%的 CINⅢ和宮頸癌中過(guò)表達(dá)。文獻(xiàn)報(bào)道高危HPV可誘導(dǎo) P16蛋白過(guò)表達(dá),在 HPV相關(guān)的宮頸癌及其癌前病變的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,HPV的 E7致瘤蛋白能特異性地包裹并使 pRb失活,P161NK4A與 pRb的反饋調(diào)節(jié)被破壞,pRb的失活不能有效抑制 P161NK4A的聚集,導(dǎo)致細(xì)胞中腫瘤抑制因子 P161NK4A表達(dá)增加,然而過(guò)度表達(dá)的 P161NK4A,由于 P161NK4A-pRb反饋環(huán)的破壞,不能正常發(fā)揮腫瘤抑制功能,細(xì)胞呈現(xiàn)持續(xù)增值狀態(tài),最終發(fā)生瘤變。本研究結(jié)果顯示,P16蛋白在宮頸癌、CINⅢ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅠ級(jí)和正常宮頸中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為 91.3%、88%、83.3%、55%,P16蛋白在宮頸癌與 CINⅠ級(jí)、CINⅢ級(jí)與 CINⅠ級(jí)中的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意(P＜0.05);在宮頸癌與正常宮頸、CIN與正常宮頸中的表達(dá)差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);P16在宮頸癌和 CIN中的表達(dá)均顯著高于正常宮頸,并且隨著宮頸病變程度的加重P16的表達(dá)強(qiáng)度和陽(yáng)性表達(dá)率不斷升高,P16蛋白與宮頸癌及 CIN病變程度和進(jìn)展可能有關(guān),提示 P16蛋白有可能用于鑒別宮頸不典型增生,篩查出需要早期治療的高?；颊?并監(jiān)測(cè)宮頸病變的發(fā)生發(fā)展。

綜上所述,宮頸癌是從宮頸上皮內(nèi)瘤變到浸潤(rùn)性癌的一個(gè)由量變到質(zhì)變的連續(xù)發(fā)展的過(guò)程,其中宮頸輕度上皮內(nèi)瘤變是可逆性的,因此我們選擇合適的標(biāo)記物對(duì)宮頸 CIN早期有效的篩查,以減少宮頸癌的發(fā)生。P16蛋白在宮頸癌及其癌前病變中過(guò)表達(dá),并且隨著宮頸病變程度的加重 P16的表達(dá)強(qiáng)度和陽(yáng)性表達(dá)率不斷升高,提示 P16蛋白與宮頸癌及其癌前病變關(guān)系密切,可作為宮頸癌及其癌前病變?cè)缙谠\斷的標(biāo)記物。

[1]黃海萍,葉學(xué)正.p53、P16在宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌中的表達(dá)及意義探討 [J].腫瘤與治療,2008,21(2):136-139.

[2]鄧 飛,胡新榮.P16與宮頸癌 [J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué),2006,14(3):500-502.

[3]方 艷,吳宏培.P16和 HSP70在原發(fā)性肺癌中的表達(dá)及其臨床意義 [J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,2009,38(11):1515-1516.

[4]江 濤,李隆玉.P16在宮頸癌組織中的表達(dá)及其意義[J].實(shí)用癌癥雜志,2005,11(20):581-587.