肖紅霞

自身免疫性肝病是一類原因不明的慢性肝病，根據(jù)其臨床表現(xiàn)、生化、免疫學(xué)、影像學(xué)和組織病理學(xué)特點(diǎn)，分為自身免疫性肝炎(autoimmue hepatitis，AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis，PBC)、原發(fā)性硬化性膽管炎(primary sclerosing cholangitis，PSC)等。自身免疫性肝病無特征性病癥，目前缺乏明確的診斷標(biāo)準(zhǔn)。但由于此類疾病是特異性或非特異性自身抗原刺激機(jī)體引起肝組織的損傷，血清中常出現(xiàn)相關(guān)的自身抗體。因此，這些自身抗體的實(shí)驗(yàn)室檢查對(duì)此類疾病的診斷尤為重要。本資料用酶聯(lián)免疫吸附法和免疫印跡法分別檢測自身免疫性肝病和慢性病毒性肝炎患者血清中的自身抗體，探討兩類疾病之間自身抗體的差異性及臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

按診斷標(biāo)準(zhǔn)收集2009年7月至2011年7月山西省中醫(yī)門診及住院的自身免疫性肝病患者27例，其中AIH患者16例，PBC患者9例，PSC患者2例;慢性病毒性肝炎患者45例，其中慢性乙型肝炎(HBV)25例，慢性丙型肝炎(HCV)20例。另外隨機(jī)收集20例健康體檢人員為正常對(duì)照。

1.2 方法

用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測抗核抗體(ANA)，試劑由德國IMTEC公司提供。用免疫印跡法檢測抗肝抗原抗體譜，試劑由德國IMTEC公司提供。抗肝抗原抗體譜包括:抗線粒體抗體(AMA-M2)、抗肝腎微粒體抗體Ⅰ型(LKM-1)、抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原抗體(SLA/LP)、抗多核點(diǎn)抗體(Sp100)、跨膜糖蛋白210kd抗體(gp-210)、抗肝細(xì)胞漿Ⅰ型抗原抗體(LC1)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ANA的檢測結(jié)果

AIH患者血清ANA檢出陽性率最高，病毒性肝炎組ANA陽性檢出率較低;AIH組、PBC組和PSC組分別與HBV組、HCV組及正常對(duì)照組比較(χ2檢驗(yàn))，均P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。因此推斷，檢測ANA對(duì)自身免疫性肝病有診斷意義。

表1 各組ANA的檢測結(jié)果

2.2 抗肝抗原抗體譜檢測結(jié)果

AIH組的SLA/LP和LKM-1抗體陽性檢出率較高，為62.5%、37.5%，分別與 HBV組和 HCV組的SLA/LP和LKM-1抗體陽性檢出率比較，均P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PBC組AMA-M2和 gp-210抗體的陽性檢出率最高，為88.9%和55.6%，分別與HBV組和HCV組的AMA-M2和gp-210抗體的陽性檢出率比較，均P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PSC組有1例檢出AMA-M2抗體陽性。在診斷明確的20例HCV中檢出1例抗LKM-1抗體陽性。見表2。

表2 各組抗肝抗原抗體譜檢測結(jié)果 例

3 討論

自身免疫性肝病是機(jī)體自身免疫反應(yīng)過度造成的肝組織損傷。出現(xiàn)肝功能異常及相應(yīng)癥狀體征的一組慢性肝臟疾病，包括由肝細(xì)胞受累的自身免疫性肝炎和主要因肝內(nèi)、肝外膽管細(xì)胞受累的原發(fā)性膽汁性肝硬化和原發(fā)性硬化性膽管炎。我國是慢性肝炎的高發(fā)區(qū)，以病毒性肝炎為主，但近年來自身免疫性肝病有升高的趨勢(shì)。自身免疫性肝病的特點(diǎn)是，在肝臟出現(xiàn)病理性炎癥損傷的同時(shí)，血中伴有特征性與肝臟相關(guān)的循環(huán)自身抗體。檢測自身抗體已成為自身免疫性肝病診斷和鑒別診斷的重要手段[1]。

本研究結(jié)果顯示，AIH組的ANA檢出率最高，為87.5%，其次PBC組為66.7%，PSC組因標(biāo)本量少不易比較。ANA是細(xì)胞內(nèi)所有核抗原成分的自身抗體總稱，其靶抗原包括細(xì)胞核、細(xì)胞漿、細(xì)胞骨架和細(xì)胞分裂周期蛋白等。ANA是AIH患者血清中最先被發(fā)現(xiàn)的自身抗體，至今仍是診斷AIH敏感性最高的標(biāo)志性抗體[2]。ANA不具有疾病特異性，本研究表明在其他自身免疫性疾病、慢性病毒性肝炎，甚至有報(bào)道稱健康老年人群中亦可有陽性表現(xiàn)[3]。自身免疫性肝病組(包括AIH組、PBC組和PSC組)ANA檢出率明顯高于慢性病毒性肝炎組(包括HBV組、HCV組)和健康對(duì)照組，因此我們認(rèn)為，通過檢測ANA將有助于自身免疫性肝病的鑒別診斷。

研究中自身免疫性肝病患者檢出AMA-M2，LKM-1，SLA/LP，Sp100，gp-210和 LC1抗體陽性率均明顯高于病毒性肝病患者，特別是自身免疫性肝病特異性LC-l抗體在病毒性肝病患者血清中未出現(xiàn)。血清檢測中，AIH患者主要以 SLA/LP(62.5%)和 LKM-1(37.5%)抗體陽性檢出率較高?？筍LA/LP抗體是肝細(xì)胞漿內(nèi)的一種可溶性蛋白[4]，我們研究的非AIH組患者SLA/LP基本為陰性，故抗SLA/LP抗體檢測對(duì)AIH具有較高特異性，可以作為AIH的血清學(xué)參考指標(biāo)。

本研究中9例PBC患者AMA-M2的陽性檢出率最高，為88.9%，略低于國內(nèi)學(xué)者的報(bào)道[5]。另外，PBC患者gp-210抗體的陽性檢出率較高，為55.6%，而其他自身免疫性肝病組和慢性病毒性肝炎組gp-210抗體為陰性，故gp-210抗體對(duì)PBC的診斷具有高度特異性。本地區(qū)PSC發(fā)病較少，收集的病例中只有1例AMA-M2抗體為陽性，無法判斷其敏感性和特異性，隨著研究的深入，我們將對(duì)PSC的自身抗體檢測做進(jìn)一步探討。病毒性肝炎中也檢出一定量的自身抗體，但檢出陽性率較低。需要強(qiáng)調(diào)的是在診斷明確的20例HCV中檢出1例抗LKM-1抗體陽性，提示抗LKM-1抗體和HCV存在交叉免疫現(xiàn)象。這提示臨床抗病毒治療時(shí)要注意，對(duì)抗LKM-1抗體陽性的HCV患者慎用干擾素，以防產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。

綜上所述，ANA和抗肝抗原抗體在自身免疫性肝病的診斷中占重要地位。自身抗體在不同的肝病中存在差異性表達(dá)，早期通過聯(lián)合檢測自身抗體有助于正確診斷和鑒別診斷，對(duì)指導(dǎo)治療和預(yù)后有一定作用。

[1] 賈繼爾.自身抗體檢測在自身免疫性肝病診斷中的應(yīng)用[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2003，26(2):120-122.

[2] Pietro Invernizzi，Ana Lleo，Mauro Podda.Interpreting Serological Test in Diagnosing Autoimmune LiveRDiseases[J].Semin LiveRDis，2007，27:161-172.

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[4] Wies I，BrunneRS，HenningeRJ，et al.Identification of Target Antigen foRSLA/LP Autoantibodies in Autoimmune Hepatitis[J].Lancet，2000，355:1510-1515.

[5] 張利方，閻有功，周 萍.原發(fā)性膽汁性肝硬化患者自身抗體檢測及其臨床意義[J].臨床內(nèi)科雜志，2008，25(9):67-629.