韋廣輝

人工牛黃甲硝唑膠囊為復(fù)方制劑，主要成分為甲硝唑與人工牛黃。甲硝唑?qū)Υ蠖鄶?shù)厭氧菌具有抗菌作用，主要用于治療急性智齒冠周炎、局部牙槽膿腫、牙周炎、根尖周炎等。國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)[1]中未收載其溶出度檢查項(xiàng)。為了有效控制藥品質(zhì)量，為評(píng)價(jià)和控制藥品質(zhì)量提供依據(jù)，筆者參考文獻(xiàn)[2]采用紫外分光光度法，測(cè)定3個(gè)生產(chǎn)廠家樣品的體外溶出度，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

UV－2550型紫外分光光度計(jì)(日本島津公司);D－800LS型智能藥物溶出儀(天津大學(xué)精密儀器廠);AE－240型電子天平(梅特勒－托利多儀器〈上?！涤邢薰?。人工牛黃甲硝唑膠囊(市售品，A廠產(chǎn)品批號(hào)為1010008，B廠產(chǎn)品批號(hào)為101201，C廠產(chǎn)品批號(hào)為20091203);甲硝唑?qū)φ掌?批號(hào)為0191－9804，中國(guó)藥品生物制品檢定所);鹽酸為分析純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備

取人工牛黃甲硝唑膠囊各1粒，用(37±0.5)℃的鹽酸溶液(9→1 000)溶解后，稀釋至900 mL，搖勻，經(jīng)0.45μm濾膜濾過(guò)，再精密取濾液3 mL，置50 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。稱取甲硝唑?qū)φ掌?0 mg，精密稱定，置50 mL容量瓶中，用(37±0.5)℃的鹽酸溶液(9→1 000)溶解后，稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品貯備液;再精密取3 mL，置50 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。取空白膠囊1粒，加入按處方比例稱取的1粒膠囊量的人工牛黃和輔料，按供試品溶液的制備方法配制成陰性對(duì)照品溶液。

2.2 測(cè)定波長(zhǎng)確定

以鹽酸溶液(9→1 000)為空白對(duì)照，在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)對(duì)照品、供試品和陰性對(duì)照品溶液進(jìn)行掃描。結(jié)果見(jiàn)圖1?？梢?jiàn)，供試品和對(duì)照品溶液紫外吸收?qǐng)D譜峰谷特征基本一致，最大吸收波長(zhǎng)為277 nm，而陰性對(duì)照品溶液在此波長(zhǎng)處無(wú)紫外吸收，故選擇277 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.3 方法學(xué)考察

圖1 紫外分光光譜圖

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:精密吸取對(duì)照品貯備液 1，2，3，4，5 mL，分別置50 mL容量瓶中，加鹽酸溶液(9→1 000)稀釋至刻度，搖勻，照紫外分光光度法在277 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程 Y=0.037 8X－0.002 8，r=0.9998(n=5)。結(jié)果表明甲硝唑質(zhì)量濃度在 4.22 ～20.10μg/mL范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn):取同一批對(duì)照品，依法制備對(duì)照品溶液并測(cè)定吸光度。結(jié)果的 RSD為0.3%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取由35 min溶出液制備的供試品溶液，分別于0，1，2，4，8 h 時(shí)測(cè)定吸光度。結(jié)果的 RSD 為 0.56%(n=5)，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗(yàn):精密移取已知質(zhì)量濃度的溶出液2，3，4 mL各2份，置100 mL量瓶中，分別加入對(duì)照品貯備液2，3，4 mL，加溶出介質(zhì)至刻度，搖勻，測(cè)定吸光度，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.4 溶出度測(cè)定

采用槳法，按2010年版《中國(guó)藥典(二部)》附錄溶出度測(cè)定法[2]項(xiàng)下操作。量取經(jīng)脫氣處理的鹽酸溶液(9→1 000)900 mL，注入溶出杯中，恒溫至(37±0.5)℃，轉(zhuǎn)速為50 r/min，取人工牛黃甲硝唑膠囊1粒，裝入沉降籃，投入溶出杯中，啟動(dòng)旋轉(zhuǎn)并開(kāi)始計(jì)時(shí)，分別在第 5，10，15，25，35，50 min 時(shí)間點(diǎn)取溶液 10 mL，每次取樣后，立即補(bǔ)充同體積同溫度的溶出介質(zhì)，所取溶出液經(jīng)0.45μm濾膜濾過(guò)，精密量取濾液3 mL，置50 mL量瓶中，稀釋至刻度，測(cè)定吸光度，并計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)的累積溶出百分率。結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 甲硝唑加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

表2 各時(shí)間點(diǎn)樣品累積溶出百分率(%，n=6)

2.5 溶出曲線繪制

將表2中的數(shù)據(jù)以時(shí)間為橫坐標(biāo)、累積溶出百分率為縱坐標(biāo)，繪制成溶出曲線。結(jié)果見(jiàn)圖2。

3 討論

選擇溶出方式時(shí)，曾對(duì)比轉(zhuǎn)籃法和槳法，轉(zhuǎn)籃法有時(shí)會(huì)出現(xiàn)轉(zhuǎn)籃被膠囊碎片堵塞的現(xiàn)象，影響藥物溶出，因此選擇槳法。但因溶出過(guò)程中膠囊會(huì)浮在水面，影響溶出，故需使用沉降籃。轉(zhuǎn)速通常選用50～75 r/min，一般不超過(guò)100 r/min，但考慮到對(duì)胃動(dòng)力減弱的患者也能有較好的治療效果，故選用50 r/min。人工牛黃甲硝唑膠囊是一種胃溶型制劑，故選擇鹽酸溶液(9→1 000)作為溶出介質(zhì)，這也與含量測(cè)定項(xiàng)的溶劑保持一致。對(duì)于溶出溫度，選擇接近人體正常溫度的(37±0.5)℃作為測(cè)定溫度較適宜。

圖2 樣品溶出曲線

試驗(yàn)結(jié)果表明，采用紫外分光光度法測(cè)定人工牛黃甲硝唑膠囊中甲硝唑的溶出度，方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，可用于產(chǎn)品的質(zhì)量評(píng)價(jià)與控制。

[1]WS－1001(HD－0204)－2002，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)·化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(第三冊(cè))[S].

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(二部)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:153－154，附錄85－附錄87.