帕提曼·卡吾力 古麗曼·木哈買提拜 賈新建

硫氰酸鈉（NaSCN）是白色斜方晶系結(jié)晶或粉末，毒害品。它的毒性主要由其在體內(nèi)釋放的氰根離子在體內(nèi)能很快與細(xì)胞素氧化酶中的三價(jià)鐵離子結(jié)合，抑制該酶活性，使組織不能利用氧而產(chǎn)生中毒。原料乳或者奶粉中摻入硫氰酸鈉后可有效的抑菌、保鮮，延長(zhǎng)產(chǎn)品的保質(zhì)期，故不法奶戶用這點(diǎn)將硫氰酸鈉摻入原料乳或者奶粉中，損害了消費(fèi)者的健康。隨著衛(wèi)生部在食品安全方面的工作力度逐漸加大，2008年12月12日衛(wèi)生部發(fā)布的《食品中可能違法添加的非使用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單（第一批）》中明確規(guī)定乳及乳制品中硫氰酸鈉屬于違法添加物質(zhì)。國(guó)家為打擊違法添加非使用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治中，也制定有檢測(cè)方法，本方法在使用過(guò)程中，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，檢測(cè)限低，適用于牛奶中硫氰酸根的快速測(cè)定，保障了對(duì)硫氰酸根的離子在牛奶中的殘留監(jiān)控。

1 材料與方法

1.1 儀器

離子色譜儀：配備淋洗液發(fā)生器和電導(dǎo)檢測(cè)器；

離心機(jī)：冷凍離心機(jī)。

1.2 試劑與材料

試驗(yàn)用水均為超純水，乙氰（色譜純），固相萃取小柱：ONGUAR RP 柱（2.5 ml），或相當(dāng)者（如 C18），使用前依次用5 ml甲醇和10 ml水活化。硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)品：北京化工廠生產(chǎn)。

硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：將硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)品于80℃烘箱內(nèi)烘干2 h。準(zhǔn)確稱取干燥后的硫氰化鉀1.6732 g于1000 ml容量瓶中，定容，混勻。即得1000 mg/kg硫氰根標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)中間液：硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 ml，置于100ml容量瓶中，加水至刻度。此溶液含硫氰酸10mg/l。

硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)使用液：移取 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 ml硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)中間液、用水定容于10 ml容量瓶中，濃度分別為 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mg/l。

樣品處理與測(cè)定：取牛乳樣品4 ml，加入5 ml乙氰沉淀蛋白，取清液 1 ml，加水稀釋至 10 ml，0.22 μm尼龍膜過(guò)濾后，過(guò)ONGUAR RP柱，即可進(jìn)樣。

1.3 離子色譜參考條件

色譜柱：強(qiáng)親水性陰離子交換柱。IONPACAS16，4.0 mm×250 mm 分析柱；IONPAC AG16，4.0 mm×50 mm保護(hù)柱；或其他相當(dāng)者。

流動(dòng)相：KOH溶液，梯度淋洗。淋洗液由淋洗液在線發(fā)生器在線產(chǎn)生。KOH梯度程序如下：

表1 流動(dòng)相梯度

流速：1.0 ml/min；抑制器：ASRS-300型抑制器，4 mm；抑制器抑制模式：外接水模式，抑制電流175 mA；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣體積：100 μl。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

按2.4建立的儀器條件，取濃度范圍在0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 μg/ml的硫氰酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液各加 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 ml，用水定容于10 ml容量瓶中，上機(jī)測(cè)定，峰面積是：0.0478、0.1021、0.2672、0.5673、1.1523，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線，方程分別為Y=0.6199-0.0092X，相關(guān)系數(shù)r=0.9999。

1.5 回收率試驗(yàn)

在2.4項(xiàng)建立儀器條件下對(duì)添加了0.25、0.5、1.25 mg/kg硫氰酸的牛奶進(jìn)行了回收率的測(cè)定試驗(yàn)和批內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算批間相對(duì)偏差，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 牛奶中硫氰酸不同添加濃度的回收率測(cè)定結(jié)果

圖1 硫氰酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 硫氰酸根標(biāo)準(zhǔn)品圖譜

圖3 標(biāo)準(zhǔn)添加樣1圖譜

圖4 標(biāo)準(zhǔn)添加樣2圖譜

圖5 牛奶樣品平行樣1圖譜

圖6 牛奶樣品平行樣2圖譜

1.6 樣品分析與結(jié)果（見(jiàn)表3）

表3 樣品測(cè)定結(jié)果

2 結(jié)果計(jì)算

X=(C-C0)×9×10/4

式中：X——液態(tài)牛奶中硫氰酸的含量(μg/ml)；

C——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣溶液中硫氰酸的濃度(μg/ml)；

9——液態(tài)奶的體積與乙腈體積之和(ml)；

4——液態(tài)奶的體積(ml)；

10——稀釋倍數(shù)；

3 精密度

在重復(fù)性條件下，獲得的硫氰酸根的獨(dú)立測(cè)試結(jié)果能夠滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。

4 討論

4.1 在測(cè)定樣品前，如果實(shí)驗(yàn)室溫度較低，應(yīng)等待柱溫升至30℃后再開(kāi)泵。

4.2 配制好的樣品和流動(dòng)相使用前0.45 μm或0.2 μm的水系濾膜過(guò)濾，可以獲得相對(duì)穩(wěn)定的回收率。

4.3 方法中“只加水”淋洗液技術(shù)，能夠自動(dòng)產(chǎn)生需要的淋洗液濃度，替代了傳統(tǒng)人工配制的方式，克服了因手動(dòng)配制帶來(lái)的濃度不準(zhǔn)確，操作繁復(fù)缺點(diǎn)。