譚燕華 王冬梅 沈文濤 方 哲 鮑時(shí)翔

硒具有多種重要的生物功能，是動(dòng)物生命活動(dòng)所必需的元素，硒的缺乏或其含量的不足都會(huì)影響動(dòng)物正常的生理機(jī)能。1973年聯(lián)合國(guó)宣布“硒是生命的必需，硒是生命的火種”，足見硒對(duì)生命的重要性。硒作為動(dòng)物體內(nèi)谷胱甘肽過氧化物酶和硒蛋白、硒核酸的組成成分來發(fā)揮生理功能。有關(guān)硒在人體和陸生動(dòng)物體內(nèi)的生理功能的研究較多，在水產(chǎn)動(dòng)物上的研究報(bào)道較少。近些年，硒對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的影響引起了人們的高度重視，有很多研究報(bào)道證明，硒能夠影響水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能、抗氧化能力和免疫功能。在飼料中添加硒，能夠顯著提高鱸魚的特定增長(zhǎng)率、成活率、組織蛋白含量、氧化酶活力。幼鯉在飼料中硒含量0.4 mg/kg時(shí)達(dá)到最大增重率、成活率和最低餌料系數(shù)，在硒含量0.3 mg/kg和0.5 mg/kg時(shí)免疫功能和抗病力最強(qiáng)。飼料中硒含量顯著影響皺紋盤鮑血清中各類抗氧化酶的活力，并且和VE有交互作用。適宜含量的硒能夠促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物的生理機(jī)能，長(zhǎng)期硒攝入不足會(huì)引起大西洋鮭（Salmo salar）生長(zhǎng)遲緩、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶活性降低等缺乏癥，餌料硒不足和過量都會(huì)引起暗紋東方鲀魚苗的成活率降低，硒過量還會(huì)產(chǎn)生畸形率較高的中毒癥狀。因此，硒在水產(chǎn)動(dòng)物飼料中的添加量的研究具有非常重要的意義。

方斑東風(fēng)螺，俗稱花螺，是近幾年東南沿海新興的養(yǎng)殖品種，其肉質(zhì)鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富，養(yǎng)殖技術(shù)簡(jiǎn)單、利潤(rùn)高，是海南省第一大養(yǎng)殖貝類。當(dāng)前以小雜魚為餌養(yǎng)殖東風(fēng)螺，存在很多不便和弊端，急需人工配合飼料的供給。市場(chǎng)上曾出現(xiàn)過商品配合飼料，但由于養(yǎng)殖效果差、物理性能不能滿足生產(chǎn)要求，不能被養(yǎng)殖戶接受而退出市場(chǎng)。品質(zhì)優(yōu)良的飼料不僅各種營(yíng)養(yǎng)素全面，而且各種營(yíng)養(yǎng)素的含量要適宜。飼料中各種營(yíng)養(yǎng)素適宜含量的確定有賴于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)試驗(yàn)，因此，要想生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的方斑東風(fēng)螺飼料，必須全面開展方斑東風(fēng)螺各種營(yíng)養(yǎng)素需求的研究。東風(fēng)螺的營(yíng)養(yǎng)需求研究剛剛起步，僅有東風(fēng)螺蛋白質(zhì)、脂肪、糖、鈣和磷需求量的報(bào)道，關(guān)于微量礦物元素和維生素的需求研究未見報(bào)道，故遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足科學(xué)配制飼料的需要。本實(shí)驗(yàn)在前期營(yíng)養(yǎng)研究的基礎(chǔ)上，擬研究硒在東風(fēng)螺配合飼料中的添加量，以期為東風(fēng)螺礦物添加劑和人工配合飼料的研制和開發(fā)提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)采用海南省海峰育苗場(chǎng)生產(chǎn)的同一批螺苗，用實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)飼料馴化2周，使之適應(yīng)配合飼料，饑餓2 d后，選擇體重(2.7±0.15)g的螺用于實(shí)驗(yàn)。

以魚粉和豆粕為主要蛋白源、魚油為主要脂肪源配制基礎(chǔ)飼料，飼料配方及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。所有固體原料粉碎過80目篩后，按配比稱量在混合機(jī)中混合均勻。在基礎(chǔ)飼料中分別添加Na2SeO30.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/kg，配制 6 種濃度梯度的實(shí)驗(yàn)飼料，編號(hào)分別為 F1、F2、F3、F4、F5、F6。按比例加入魚油和水，攪拌均勻，制成飼料顆粒，冷凍保存。經(jīng)測(cè)定6種實(shí)驗(yàn)飼料硒的含量分別為 1.5、1.7、1.9、2.1、2.3、2.5 mg/kg。

表1 基礎(chǔ)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)成分

1.2 方法

1.2.1 東風(fēng)螺養(yǎng)殖管理

實(shí)驗(yàn)于2009年10月6日至12月16日在海南省文昌市龍樓鮑魚養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)3個(gè)平行。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)在42 cm×48 cm×40 cm的塑料箱中進(jìn)行，流水養(yǎng)殖，支架上鋪3～4 cm厚度的細(xì)沙，水深25 cm，每箱放養(yǎng)50只幼螺。自然海水養(yǎng)殖，不調(diào)節(jié)鹽度和溫度，養(yǎng)殖期間，鹽度變化范圍24‰～29‰，水溫變化范圍 19.1～30 ℃，pH 值 8.0～8.5，每天 17：00 投餌，1 h后收集殘餌，每天10：00測(cè)定水溫和鹽度。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)餌料及組織營(yíng)養(yǎng)成分分析

飼料營(yíng)養(yǎng)成分分析以不添加魚油和水分的干物質(zhì)為材料，東風(fēng)螺組織以去殼后的新鮮軟體部為材料測(cè)定。分析方法為水分含量的測(cè)定采用105℃烘干恒重法，粗蛋白的測(cè)定采用凱氏定氮法，粗脂肪的測(cè)定采用索氏抽提法，粗灰分的測(cè)定采用馬福爐550℃灰化法，硒含量委托中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測(cè)試中心檢測(cè)，采用GB/T13883—2008方法測(cè)定。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)計(jì)算與統(tǒng)計(jì)

式中：W0——試驗(yàn)初始體重(g)；

Wt——試驗(yàn)結(jié)束時(shí)體重(g)；

L0——試驗(yàn)初始?xì)じ?cm)；

Lt——試驗(yàn)結(jié)束時(shí)殼高(cm)。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS11.0軟件Tukey進(jìn)行顯著性分析，P＜0.05為顯著差異,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。

2 結(jié)果

2.1 飼料中硒的添加量對(duì)方斑東風(fēng)螺生產(chǎn)性能的影響(見表2)

表2 飼料中硒的添加量對(duì)方斑東風(fēng)螺生長(zhǎng)、成活率及餌料系數(shù)的影響

從表2可知，隨著飼料硒添加量的增加，東風(fēng)螺增重率和殼增長(zhǎng)率逐漸增大，F(xiàn)5組達(dá)到最大值，比對(duì)照組提高17.8%和14.6%，但差異不顯著（P＞0.05），硒添加量繼續(xù)增加，增重率和殼增長(zhǎng)率有所降低。F5組的餌料系數(shù)顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），其他各組間無顯著差異（P＞0.05）。方斑東風(fēng)螺的成活率都很高，各組間沒有顯著差異（P＞0.05），說明本實(shí)驗(yàn)硒的添加范圍對(duì)成活率沒有構(gòu)成影響。

2.2 飼料中硒的添加量對(duì)方斑東風(fēng)螺品質(zhì)的影響(見表3)

由表3可知，飼料中硒的添加量對(duì)肥滿度無顯著影響（P＞0.05），但對(duì)軟體組織營(yíng)養(yǎng)成分的含量有很大影響。粗蛋白含量F3組顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），F(xiàn)6組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），其他實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。粗脂肪含量F3組高于對(duì)照組，其他實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組，所有實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比較差異極顯著（P＜0.01），其中添加0.6 mg/kg的F4組脂肪含量最低，比對(duì)照組低37.36%?？偦曳治奶砑恿枯^低的實(shí)驗(yàn)組（0.2～0.6 mg/kg），與對(duì)照組相比無顯著差異，添加量較高的0.8 mg/kg和1.0 mg/kg兩組，灰分含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。隨著硒添加量的增加，軟體部組織水分含量呈降低趨勢(shì)，其中F4～F6與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05）。在飼料中添加硒使軟體組織的硒含量呈現(xiàn)降低趨勢(shì)。當(dāng)添加量達(dá)到1 mg/kg時(shí)，組織硒含量劇烈降低，與對(duì)照組相比差異極顯著（P＜0.01）。

表3 飼料中硒的添加量對(duì)方斑東風(fēng)螺肥滿度和營(yíng)養(yǎng)成分的影響

3 討論

3.1 硒的添加量對(duì)方斑東風(fēng)螺生長(zhǎng)和成活率的影響

關(guān)于硒促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)的生理機(jī)制，有報(bào)道稱硒是谷胱甘肽過氧化物酶的組成成分，能防止過氧化物在細(xì)胞內(nèi)的蓄積，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，增強(qiáng)免疫功能，降低死亡率，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。還有研究證明,硒可以提高血漿中三碘甲腺原氨酸的水平,促進(jìn)生長(zhǎng)激素合成與分泌,從而加快動(dòng)物的生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)合成。但是硒濃度過高或過低，都會(huì)抑制動(dòng)物的生長(zhǎng)。動(dòng)物對(duì)硒的營(yíng)養(yǎng)需求有一個(gè)適宜范圍，在這個(gè)范圍內(nèi)動(dòng)物才會(huì)達(dá)到最佳生長(zhǎng)狀態(tài)，這種關(guān)系是硒的Weinberg原理。因此，研究動(dòng)物對(duì)硒的適宜需求量或飼料中的適宜添加量，對(duì)科學(xué)配制飼料具有重要的實(shí)際意義。梁萌青等在純化飼料中添加不同濃度的硒（0.0～1.0 mg/kg）喂養(yǎng)鱸魚，結(jié)果表明，添加量在0.4 mg/kg飼料時(shí)鱸魚成活率最高、特定增長(zhǎng)率最大、餌料系數(shù)最小，飼料中硒缺乏和過量均對(duì)鱸魚的生長(zhǎng)和成活產(chǎn)生不利影響。蘇傳福等報(bào)道，在飼料中添加0～4.8 mg/kg硒能促進(jìn)草魚的生長(zhǎng)，提高飼料效率，但對(duì)草魚成活率沒有顯著影響，添加量在0.6 mg/kg時(shí)特定生長(zhǎng)率、增重率和飼料效率達(dá)到最大值，硒濃度高于或低于0.6 mg/kg的實(shí)驗(yàn)組草魚生長(zhǎng)受到抑制。王安利等報(bào)道，中國(guó)對(duì)蝦飼料中硒含量在0.44 μg/g時(shí)獲得最佳生長(zhǎng)效果，當(dāng)硒含量達(dá)到1.25 μg/g時(shí)，對(duì)蝦狀態(tài)出現(xiàn)異常，可能是因硒過量而致。由于本實(shí)驗(yàn)側(cè)重實(shí)用性，所以采用飼料生產(chǎn)原料，而沒有采用純化飼料，飼料中魚粉含量為51%，基礎(chǔ)飼料中含1.5 mg/kg的硒。試驗(yàn)結(jié)果表明，在飼料中添加硒，與對(duì)照組相比，硒能夠促進(jìn)增重率和殼增長(zhǎng)率的提高，但差異不顯著。其原因可能是：飼料誘食性不好，東風(fēng)螺耐饑餓能力強(qiáng)，有些東風(fēng)螺長(zhǎng)時(shí)間不攝食，體重和螺高標(biāo)準(zhǔn)相差較大。趙吉偉等在含65%魚粉的虹鱒配合飼料中添加硒，添加組與對(duì)照組的生長(zhǎng)和抗氧化酶活力無顯著差異，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，基礎(chǔ)飼料中的硒含量1.0 mg/kg完全能滿足虹鱒生長(zhǎng)的需要。雖然本實(shí)驗(yàn)中殼增長(zhǎng)率和增重率與對(duì)照組相比無顯著差異，但是，在飼料中添加硒0.8 mg/kg時(shí)，增重率和殼增長(zhǎng)率比對(duì)照組提高17.8%和14.6%，此時(shí)餌料系數(shù)最低（P＜0.05）?？紤]到養(yǎng)殖生產(chǎn)的實(shí)際情況，認(rèn)為在飼料中添加硒0.8 mg/kg比較適宜。

3.2 硒的添加量對(duì)方斑東風(fēng)螺軟體營(yíng)養(yǎng)成分的影響

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，在飼料中添加硒不同程度影響了軟體組織營(yíng)養(yǎng)成分含量。隨著硒添加量的增加，軟體組織粗脂肪、水分含量呈現(xiàn)逐漸降低趨勢(shì)，粗蛋白和總灰分含量呈現(xiàn)由低到高的變化。蘇傳福等報(bào)道，硒對(duì)草魚營(yíng)養(yǎng)組分也具有顯著影響，隨著硒添加量的提高，肌肉灰分含量增加、水分降低、蛋白質(zhì)含量先升高后降低、脂肪含量先降低后升高。梁萌青等報(bào)道，添加硒對(duì)鱸魚魚體脂肪、灰分、水分無顯著影響，但添加0.4 mg/kg硒顯著提高了魚體蛋白含量。胡先勤等報(bào)道，酵母硒對(duì)鯽魚體組織成分無顯著影響。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果有些差異，可能是由實(shí)驗(yàn)配方、硒添加量、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不同等因素造成的。硒對(duì)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)成分的代謝機(jī)制和影響規(guī)律有待研究。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，F(xiàn)4、F5兩組粗蛋白及F4總灰分含量和對(duì)照組相比較無顯著差異，F(xiàn)5總灰分含量顯著高于對(duì)照組，F(xiàn)4、F5的粗脂肪和水分含量極顯著或顯著低于對(duì)照組，從螺肉營(yíng)養(yǎng)成分可知這兩組螺品質(zhì)較好，從而建議飼料中應(yīng)添加0.6～0.8 mg/kg的硒。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著硒添加量的增大，組織硒含量逐漸降低，這與王安利等報(bào)道的中國(guó)對(duì)蝦頭胸部和腹部肌肉中硒含量隨硒的添加量增加而降低的結(jié)果一致。胡先勤等則報(bào)道，隨著飼料中酵母硒濃度的增加，鯽魚血清和肝臟中的硒含量呈增加的趨勢(shì)。然而，魏文志等在飼料中無論添加無機(jī)硒還是有機(jī)硒，全血硒含量和谷胱甘肽過氧化物酶活性都沒有顯著性差異。梁萌青等在飼料中添加硒，促進(jìn)了鱸魚肝臟和血液中硒含量的顯著增加，隨著硒添加量的增加，肝臟和血液中的硒含量出現(xiàn)了Weinberg原理描述的曲線形變化。從上述結(jié)果推測(cè)，梁萌青等的硒添加量范圍使鱸魚硒含量涵蓋了從低上升到高然后再降低的完整曲線，而其他研究只呈現(xiàn)了曲線的一部分。飼料中的硒如何在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)代謝以及影響組織硒含量，有待進(jìn)一步研究。

18篇，刊略，需者可函索）